Suppression de la réplication du virus de l’hépatite B à l’aide de lymphocytes T spécifiques de l’antigène viral

Prenez des lymphocytes T dotés de récepteurs qui se lient aux antigènes du virus de l’hépatite B, ou VHB.

Injectez les lymphocytes T dans la veine de la queue d’une souris.

Laissez les cellules injectées se propager dans le foie.

Pour imiter l’infection virale, prenez des plasmides portant le génome du VHB.

Injectez rapidement les plasmides dans la veine de la queue, en dirigeant les plasmides dans le foie.

La force du liquide perméabilise l’endothélium vasculaire et génère des pores temporaires dans les cellules.

Les plasmides pénètrent dans la cellule et subissent une synthèse d’ARN, produisant de l’ARNm qui est utilisé pour la production de protéines virales.

Certaines de ces protéines agissent comme des antigènes viraux.

Les molécules présentatrices d’antigènes transportent les antigènes viraux à la surface des cellules, les exposant aux lymphocytes T.

Ces cellules immunitaires interagissent avec les antigènes viraux et déclenchent des mécanismes pour éliminer les cellules infectées, inhibant ainsi l’assemblage et la propagation des protéines virales.

Pour l’administration hydrodynamique du plasmide HPV par la veine de la queue, diluez 10 microgrammes de plasmide HPV dans un équivalent de 8 % de la masse corporelle de PBS. Chargez le plasmide dans une seringue de 3 millilitres équipée d’une aiguille d’un demi-pouce de calibre 26 par souris.

Chauffez les souris HHD sous une lampe chauffante pendant cinq minutes pour dilater les veines de la queue et tirez soigneusement une souris dans une retenue en plastique. Localisez une veine latérale de la queue dilatée dans le tiers médian de la queue et insérez l’aiguille parallèlement à la veine pour délivrer tout le volume du plasmide à travers la veine de la queue sur une période de trois à cinq secondes.

Pour le transfert de cellules T CD8 positives dérivées d’iPSC spécifiques de l’antigène viral, prélever les cellules T CD8 positives iPSC au 22e jour de la culture, comme démontré, et ensemencer les cellules dans une nouvelle boîte de culture cellulaire de 10 centimètres.

Après 30 minutes dans l’incubateur de culture cellulaire, filtrez les cellules flottantes à travers une passoire en nylon de 70 micromètres et comptez les cellules viables. Dilué se vend à une concentration de^{PBS de 1,5} x 10 7 cellules par millilitre.

Injecter 200 microlitres de cellules chez des souris HHD âgées de quatre à six semaines dans la veine de la queue, comme cela vient d’être démontré. Le 14e jour après le transfert cellulaire, effectuez une administration hydrodynamique du plasmide HPV comme démontré.