Name: Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par 1 H NMR Spectroscopy (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-15T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: Découvrez l'évaluation du métabolisme hépatique pendant la colonisation progressive de souris axéniques par spectroscopie RMN du proton. Cette méthode permet d'analyser les co-métabolites microbiens urinaires et les profils métaboliques hépatiques.

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Tous les spectres RMN utilisées comme exemples sont tirés d&#39;une étude publiés antérieurement 7 qui a été soutenu financièrement par Nestlé.

1. La colonisation du germe sans animaux et la collecte de l&#39;échantillon <ol><li> Retirer les animaux sans germes d&#39;isolateurs et de les héberger dans une salle de l&#39;élevage dans des cages conventionnelles équipés d&#39;un filtre à l&#39;avant des animaux conventionnels qui servent de témoins (figure 1). </li><li> Mélanger la moitié de la litière (3 jours) prises de la cage de commande classique avec la litière des animaux sans germes. Toujours garder un tiers de la litière sale conventionnels chaque fois qu&#39;il est nécessaire de le renouveler afin de maintenir un niveau de bactéries (il conserve pendant au moins 3 jours). </li><li> Recueillir l&#39;urine dans un microtube de 1,5 ml par une manipulation de la souris sur le tube et aider à la miction par masser doucement l&#39;intestin. Snap-geler immédiatement dans l&#39;azote liquide. Stockez au moins à -40 ° C jusqu&#39;à l&#39;analyse par RMN. Un volume minimum de 20 uL est nécessaire pour l&#39;acquisition d&#39;une sonde RMN de 5 mm, mais il est recommandé d&#39;utiliser 30 uL d&#39;améliorer la qualité de profilage métabolique. </li><li> Les animaux doivent be euthanasié sans l&#39;utilisation d&#39;anesthésiques afin d&#39;éviter les résonances RMN confusion due à un métabolisme hépatique de composés anesthésiques (par exemple, utiliser dislocation cervicale suivie d&#39;une confirmation de la mort par exsanguination) </li></ol> 2. Recommandation pour la collecte de la biopsie du foie <ol><li> Ne pas utiliser tout produit contenant de l&#39;alcool pour éviter toute contamination. Laver les outils utilisant la solution d&#39;eau ou une solution saline. </li><li> Ne pas percer la vésicule biliaire. En cas de fuite biliaire, laver immédiatement avec de l&#39;eau des tissus ou de solution saline. </li><li> Recueillir des biopsies du foie (environ 15-50 mg) dans le lobe gauche, comme illustré dans la figure 2. Pour les biopsies reproductibles, de collecter de manière cohérente dans le centre du lobe gauche en évitant les zones périphériques où le tissu est plus mince. </li><li> Aligner les biopsies geler dans l&#39;azote liquide immédiatement et les stocker à -80 ° C jusqu&#39;à l&#39;analyse par RMN. </li></ol> 3. RMN 1H acquisition de l&#39;urine microvolume </p&gt; <ol><li> Préparer 0,2 M solution de tampon phosphate de sodium dans D2O (99,8%), pH 7,4 contenant 1 mM 3 - (triméthylsilyl) d&#39;acide propionique 4-D (TSP). </li><li> Mélanger 30 uL d&#39;urine avec 30 uL de tampon phosphate de sodium. </li><li> Transférer 50 ul de solution mixte dans 1,7 mm RMN tube capillaire (figure 3 (2)) à l&#39;aide d&#39;une seringue en verre de 50 uL équipé d&#39;une aiguille métallique (OD 0,5 mm). Soyez prudent pour éviter les bulles. </li><li> Monter l&#39;adaptateur capillaire (Figure 3 (3)) sur le dessus de l&#39;échantillon d&#39;urine contenant des capillaires et le placer dans un microtube de 2,5 mm pour la RMN de 5 mm Sonde RMN (figure 3) (1). Utilisez cette combinaison de tubes en tant que régulier 5 mm pour tube RMN acquisition spectrale. </li><li> Utilisez la tige d&#39;extraction (Figure 3 (4)) pour enlever les capillaires de 2,5 mm tube RMN en vissant l&#39;adaptateur capillaires doucement pour la retirer. </li></ol> . 4 1 H RMN HR MAS de tissu biopsie du foie: la préparation des échantillons <ol><li> MAS composants du rotor et les outils sontdécrit dans la figure 4. </li><li> Insérer une biopsie (environ 15-50 mg) dans le rotor de zirconium (figure 4) (1) et remplissez le reste du volume avec pure O 2 D pour la RMN serrure. Attention à ne pas faire remonter les bulles car cela altérer la qualité du calage ultérieur et la qualité de l&#39;acquisition de données. </li><li> Insérer entretoise 50 uL Téflon (figure 4 (2)) en utilisant les vis cylindrique (figure 4 (5)). Dévissez et c&#39;est calibrer en utilisant la jauge de profondeur sur le côté court (figure 4 (8)). À cette étape, il est important de prêter une attention particulière à l&#39;échantillon, car une partie de cela peut fuir à travers le trou d&#39;espacement. Si cela est le cas, alors une partie de la biopsie est détruit et le poids de l&#39;échantillon n&#39;est plus fiable. Il est donc nécessaire de recommencer depuis le début de la préparation de l&#39;échantillon. </li><li> Placez la broche thead (figure 4 (3)) et vissez doucement avec le tournevis (figure 4 (6)). Sécher l&#39;eau résiduelle avec un morceau de tissu. </li><li> Placez le couvercle (Figure 4 (4)) à lasupérieur du rotor et l&#39;insérer dans l&#39;emballeur du rotor (figure 4 (6)). Appuyez fermement jusqu&#39;à ce que le bouchon est en place. Il ne doit pas être tout espace laissé entre le rotor et son capuchon. </li><li> Mark moitié de la partie inférieure du rotor en utilisant un marqueur noir pour permettre la détection optique de vitesse de rotation. </li><li> Placer le rotor à l&#39;intérieur du spectromètre RMN et commencer à tourner à 5 kHz. Acquérir spectre RMN 1H utilisant CPMG séquence d&#39;impulsions 13, conformément aux directives du fabricant. </li><li> Utilisez la résonance α glucose anomérique à 5,22 ppm (doublet) pour calibrer les spectres RMN. </li><li> Pour déballer le rotor, procéder en enlevant le bouchon en utilisant le déménageur bouchon (figure 4 (9)). Dévissez et retirez thead broches téflon entretoise en utilisant la vis cylindrique. Laver abondamment à l&#39;eau et de détergent. </li></ol> 5. Les résultats représentatifs L&#39;activité microbienne intestinale peut être contrôlée en utilisant le profilage métabolique urinaire. Un grand nombre de microbes urinairesco-métabolites identifiables par RMN 1H ont été décrits dans la littérature 7,14-17. Ces microbes de co-métabolites sont particulièrement utiles pour surveiller le processus de colonisation car ils fournissent un moyen rapide et non invasive pour estimer quand l&#39;écosystème nouvellement établie est stable. La figure 5A illustre clairement l&#39;apparition d&#39;microbienne intestinale co-métabolites sur le processus de colonisation. Cette figure montre un profil métabolique urinaire obtenu en suivant la procédure décrite à l&#39;étape 2 pour un animal colonisé 20 jours en utilisant la procédure décrite à l&#39;étape 1. Cet animal n&#39;a pas excréter le sulfate de toute indoxyle et les montants très peu de phenylacetylglycine (PAG) et p-crésol sulfate à l&#39;état de germe de frais (jour 0-bleu). Comme la colonisation progresse, ces trois marqueurs du métabolisme des protéines par le microbiote intestinal augmente considérablement pour atteindre un équilibre à jour 20 (rouge). Ceci est particulièrement facile à suivre pour un groupe d&#39;animaux, comme illustré sur la figure 5B en utilisant le PAGrésonance. Ce diagramme a été obtenue en intégrant la surface sous les résonances surlignées en gris sur la figure 5A (δ 7,40 à 7,43), ce qui correspond à une résonance particulière (triplet) de GCP pour un groupe de 7 animaux. 1 H à haute résolution Magic Angle Spinning (MAS RH) La spectroscopie RMN est une technique non destructive qui permet des acquisitions rapides et reproductibles de profils métaboliques de tout type de biopsie de 18 ans. Dans ce protocole, nous avons utilisé cette technique puissante pour obtenir un profil métabolique hépatique de deux souris avant (bleu) et après (rouge) colonisation (figure 6). Ce chiffre illustre bien l&#39;information qui peut être dérivé d&#39;un profil métabolique RMN MAS-fondée. De nombreux acides aminés ainsi que des métabolites issus de métabolisme énergétique comme le glucose, le glycogène, le lactate, les triglycérides, (D)-3-hydroxybutyrate et nicotinurate peuvent être visualisées. Ces profils contiennent également des informations pertinentes au stress oxydatif (c&#39;est à dire un ascorbiquecid, le glutathion), métabolisme des nucléotides (c&#39;est à dire l&#39;inosine, uridine) et le métabolisme de la méthylamine (c.-choline, la triméthylamine-N-oxyde). Dans cet exemple, il est très clair que le germe sans souris affiche presque pas de glycogène et de très faibles quantités de glucose et de triglycérides comme cela a été précédemment publiées 7. <img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig1.jpg" alt="Figure 1."/> Figure 1. Présentation du protocole colonisation. Animaux axéniques et conventionnelles sont logés dans des cages équipées de filtres côté à côte et leurs portées sont échangées afin de permettre la colonisation progressive du microbiote intestinal conventionnel (1). L&#39;activité microbienne intestinale est surveillé en utilisant 1 H RMN profilage métabolique basé (2-3). Le métabolisme hépatique est évalué par une MAS RH H profilage métabolique par RMN basé (4-5). <img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig2.jpg" alt="Figure 2."/> Figure 2. Souris vivanteAnatomie r. Le foie est affiché comme du côté plat de l&#39;orgue fait face à la table. Pour les biopsies reproductibles, il est conseillé de toujours prélever des échantillons à partir du centre du lobe gauche, comme indiqué par le rectangle en pointillés. <img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig3.jpg" alt="Figure 3."/> Figure 3 1,7 mm RMN kit capillaire pour travailler avec microvolumes clés:.. 1: 2,5 microtube RMN mm, 2: 1,7 mm RMN tube capillaire, 3: adaptateur capillaire, 4: tige d&#39;extraction. <img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig4.jpg" alt="Figure 4."/> Équipements MAS Figure 4 rotors principaux:.. 1: rotor MAS, 2: 50 uL entretoise en téflon, 3: thead broches, 4: CAP, 5: Vis cylindrique, 6: tournevis, 7: rotor conditionneur, 8: jauge de profondeur. <img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig5.jpg" alt="Figure 5."/> Figure 5. Évolution des profils métaboliques urinaires durant colonization. <ol class="ualpha"><li> Zoom sur la région aromatique des spectres entre 6.8 à 7.8 ppm, où la co-métabolites microbiens peuvent être visualisées. Spectres RMN 1 H ont été obtenues à partir d&#39;un seul individu au jour 0 (bleu), 4 (vert), 15 (orange) et 20 (rouge) l&#39;après-colonisation. La zone grise correspond à la zone qui a été intégrée pour rendre le schéma B. clés: 1-MeHistamine: 1-méthylhistamine; indoxyl-S: le sulfate de Indoxyl;:; Son p-crésol-S Histidine: le sulfate de p-crésol; PAG : Phenylacetylglycine. </li><li> La concentration moyenne durant la colonisation PAG (n = 7). T de Student-test a été utilisé pour comparer la différence de concentration en PAG à divers points de temps: a: p &lt;0,05 par rapport au jour 0, b: p &lt;0,01 par rapport à 10 jours. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/3642/3642fig6.jpg" alt="Figure 6."/> Figure 6. Typique de 600 MHz 1 H HR spectres RMN MAS de biopsies du foie provenant germ-free (en bleu) et ex-germ-free (red) les souris. Protons en gras sont responsables de la résonance de triglycérides clés:. 3-HB: 3-hydroxybutyrate, le GSH: glutathion réduit, TG: triglycérides, OTMA: triméthylamine-N-oxyde.

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<li>Fan, T., Lane, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure-based+profiling+of+metabolites+and+isotopomers+by+NMR%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Nuclear+Magnetic+Resonance+Spectroscopy%22%5BJournal%5D)">Structure-based profiling of metabolites and isotopomers by NMR.</a> Progress in Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy. 52, 48-48 (2008).</li>
<li>Fonville, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+partial+least+squares+models+and+related+chemometric+approaches+in+metabonomics+and+metabolic+phenotyping%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemometrics%22%5BJournal%5D)">The evolution of partial least squares models and related chemometric approaches in metabonomics and metabolic phenotyping.</a> Journal of Chemometrics. 24, 636-649 (2010).</li>
<li>Merrifield, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+metabolic+system-wide+characterisation+of+the+pig%3A+a+model+for+human+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biosyst%22%5BJournal%5D)">A metabolic system-wide characterisation of the pig: a model for human physiology.</a> Mol. Biosyst. , (2011).</li>
<li>Tugnoli, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+human+gastric+mucosa+by+HR-MAS+magnetic+resonance+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of human gastric mucosa by HR-MAS magnetic resonance spectroscopy.</a> International Journal of Molecular Medicine. 14, 1065-1071 (2004).</li>
<li>Sitter, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+HR+MAS+MR+spectroscopic+profiles+of+breast+cancer+tissue+with+clinical+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">Comparison of HR MAS MR spectroscopic profiles of breast cancer tissue with clinical parameters.</a> NMR Biomed. 19, 30-40 (2006).</li>
<li>Beckonert, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+profiling%2C+metabolomic+and+metabonomic+procedures+for+NMR+spectroscopy+of+urine%2C+plasma%2C+serum+and+tissue+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Metabolic profiling, metabolomic and metabonomic procedures for NMR spectroscopy of urine, plasma, serum and tissue extracts.</a> Nat. Protoc. 2, 2692-2703 (2007).</li>
</ol>

Nous n&#39;avons rien à révéler.

Dans ce protocole, nous avons décrit une procédure de colonisation progressive dans un milieu ouvert aux autres d&#39;étudier l&#39;impact du microbiote intestinal sur le métabolisme hépatique évalué par 1 H RMN HR MAS profilage des intacte biopsie. Diverses méthodes de la colonisation ont été décrits dans la littérature. Les méthodes les plus communes de coloniser les animaux avec un microbiote sont définis par gavage oral ou de l&#39;eau potable contaminée 19,20. L&#39;inoculation fécale peut éga...

Table des réactifs spécifiques et des équipements: <table border="1"><tbody><tr><th> Nom du réactif </th><th> Société </th><th> Numéro de catalogue </th><th> Commentaires </th></tr><tr><td> 2,5 mm microtube </td><td> Nouvelle ère </td><td> NE-H5/2.5-V-Br </td><td></td></tr><tr><td> 1,7 mm tube capillaire </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> NORS175001 </td><td></td></tr><tr><td> Adaptateur capillaire </td><td> Nouvelle ère </td><td> NE-325-5/1.7 </td><td></td></tr><tr><td> Extraction tige </td><td> Nouvelle ère </td><td> NE-341-5 </td><td></td></tr><tr><td> HR-MAS BL4 rotor avec 50 pl sphériques kit entretoise en téflon </td><td> Bruker </td><td> HZ07213 </td><td></td></tr><tr><td> Kit d&#39;outils pour 50 inserts uL </td><td> Bruker </td><td> B2950 </td><td></td></tr><tr><td> Advance III 600RMN MHz </td><td> Bruker </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 1 H RMN du solide HR MAS Sonde </td><td> Bruker </td><td></td><td></td></tr><tr><td> L&#39;oxyde de deutérium 99,9% </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 530867-1L </td><td></td></tr><tr><td> 3 - (triméthylsilyl) propionique acide D-4 (TSP) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 269913 </td><td></td></tr></tbody></table>

Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par 1 h nmr spectroscopy

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

Il est bien connu que les bactéries intestinales contribuent de manière significative à l&#39;homéostasie hôte, offrant une gamme de prestations telles que la protection immunitaire et la synthèse de vitamine. Ils fournissent également l&#39;hôte d&#39;une quantité considérable de nutriments, ce qui rend cet écosystème un organe métabolique essentiel. Dans le contexte de plus en plus évident le lien entre la flore intestinale et le syndrome métabolique, la compréhension des interactions métaboliques entre l&#39;hôte et sa microflore intestinale est devenue un enjeu important de la biologie moderne. 1-4 Colonisation (appelé aussi processus de normalisation) désigne la création de micro-organismes dans une ancienne exempte de germes d&#39;origine animale. S&#39;il est un processus naturel survenant à la naissance, il est aussi utilisé chez les adultes sans germes animaux pour contrôler l&#39;écosystème intestinal floraux et de mieux déterminer son impact sur le métabolisme de l&#39;hôte. Une procédure commune pour contrôler le processus de colonisation est d&#39;utiliser la méthode de gavage avec un single ou un mélange de micro-organismes. Cette méthode conduit à une colonisation très rapide et présente l&#39;inconvénient d&#39;être extrêmement stressant 5. Il est donc utile de minimiser le stress et d&#39;obtenir un processus plus lent de colonisation d&#39;observer progressivement l&#39;impact de la mise en place sur le métabolisme des bactéries hôtes. Dans ce manuscrit, nous décrivons une procédure pour évaluer la modification du métabolisme hépatique au cours d&#39;un processus de colonisation progressive en utilisant une technique non destructive métaboliques profilage. Nous proposons de suivre la colonisation microbienne intestinale en évaluant l&#39;activité métabolique microbienne intestinale reflétée par l&#39;excrétion urinaire de métabolites microbiens co-par une profilage métabolique par RMN H-fondée. Cela permet une appréciation de la stabilité de l&#39;activité microbienne intestinale delà de l&#39;établissement stable de l&#39;écosystème microbien intestinal généralement évaluée par le suivi des bactéries fécales par DGGE (électrophorèse sur gel dénaturant gradient). 6 Lela colonisation se déroule dans un environnement ouvert et conventionnelles est initiée par une litière sale souillés par des animaux conventionnels, qui serviront de témoins. Les rongeurs sont des animaux coprophages, ce qui assure une colonisation homogène, comme décrit précédemment. 7 Profilage métabolique hépatique est mesurée directement à partir d&#39;une biopsie du foie intact en utilisant 1 H High Angle magique Résolution Spinning spectroscopie RMN. Cette technique semi-quantitative offre un moyen rapide d&#39;évaluer, sans endommager la structure cellulaire, les principaux métabolites tels que les triglycérides, de glucose et de glycogène afin de mieux estimer l&#39;interaction complexe entre les processus de colonisation et le métabolisme hépatique 7-10. Cette méthode peut également être appliqué à toute une biopsie tissulaire 11,12.

Une procédure est décrite colonisation progressive pour mieux évaluer son impact sur le métabolisme hépatique hôte. La colonisation est surveillé non invasive, en évaluant l&#39;excrétion urinaire de métabolites microbiens co-par RMN basée sur le profilage métabolique tandis métabolisme hépatique est évalué par la Haute Résolution angle magique (MAS RH) RMN de profilage intacte biopsie.

Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par 1 H NMR Spectroscopy

Il est bien connu que les bactéries intestinales contribuent بشكل significatif à l'homéostasie de l'hôte, apportant divers avantages tels que la protection immunitaire et les vitamines...

L'objectif de cette procédure est d'évaluer l'impact d'une colonisation progressive sur le métabolisme hépatique de l'hôte. Cela est réalisé en colonisant d'abord progressivement des souris axéniques. Le processus de colonisation est suivi par l'évaluation de l'excrétion urinaire de cocométabolites microbiens au moyen de la spectroscopie RMN.Après le suivi du processus de colonisation, une biopsie hépatique est prélevée chez la souris et préparée pour le profilage métabolique. Le profil métabolique hépatique peut ensuite être obtenu à partir de la biopsie intacte par spectroscopie RMN à haute résolution avec rotation à l'angle magique, non destructive. En définitive, cette utilisation de la spectroscopie RMN du proton révèle divers métabolites impliqués dans des voies métaboliques telles que les voies énergétiques et du stress oxydatif.Ainsi, cette expérience peut fournir des informations sur les fonctions hépatiques durant la colonisation. Elle peut également être appliquée à d'autres systèmes, comme le rein. Pour coloniser les animaux, retirez les souris axéniques des isolateurs et hébergez-les dans une salle d'élevage conventionnelle, dans des cages équipées d'un filtre placé de

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JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Stable profilage isotopique par analyse spectrométrique de masse chromatographie en phase gazeuse du flux métabolique intermédiaire est décrite dans le...

Stable profilage isotopique du flux métabolique intermédiaire dans la phase de développement et de l&#39;adulte Caenorhabditis elegans</em

Préparation de l&#39;échantillon de<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em&gt; Extraits pour Magnétique Nucléaire études métabolomiques résonance

La neurochimie du cerveau des mammifères est modifiée dans de nombreuses maladies neurologiques et systémiques. Des profils caractéristiques des métabolites cérébraux peuvent être obtenus efficacement à partir d’extraits bruts de tissu cérébral. À cette fin, la spectroscopie RMN à haute résolution est utilisée, permettant une analyse quantitative détaillée des concentrations de métabolites (métabolomique).

Analyse métabolomique de cerveau de rat par la Résolution nucléaire Haute spectroscopie par résonance magnétique d&#39;extraits de tissus

Ici, des méthodes optimisées pour générer des modèles in vivo et in vitro de stéatose hépatique et pour analyser les phénotypes stéatotiques et les paramètres physiologiques associés sont décrites.

Analyse optimisée des<em&gt; In Vivo</em&gt; et<em&gt; In vitro</em&gt; Stéatose hépatique

Le protocole décrit une méthode simple de résection d’un foie de souris intact pour des études métaboliques par perfusion veineuse porte.

Ex Vivo Perfusion hépatique à travers la veine porte chez la souris

À l’aide d’un modèle murin de stéatose hépatique non alcoolique induite par l’alimentation, nous décrivons l’utilisation de nouvelles techniques d’imagerie par micro-tomodensitométrie in vivo comme méthode non invasive pour évaluer les stades de progression de la NAFLD, en nous concentrant principalement sur le réseau vasculaire hépatique hépatique en raison de son implication significative dans la dérégulation hépatique liée à la NAFLD.

Nouvelles techniques d’imagerie par micro-tomodensitométrie in vivo pour évaluer la progression de la stéatose hépatique non alcoolique

La spectroscopie par résonance magnétique nucléaire (RMN) est utilisée pour identifier la dérégulation des métabolites chez les patients atteints de diverses maladies. Cette technique permet de quantifier les métabolites dérangés, démêlant ainsi les informations physiopathologiques. Ici, nous décrivons la procédure étape par étape de l’approche basée sur la RMN pour la caractérisation métabolique des patients.

Identification et quantification des métabolites dérangés chez les patients gravement malades à l’aide de la métabolomique basée sur la RMN

Modèle murin de maladie hépatique stéatotique associée à un dysfonctionnement métabolique (MASLD) avec dysfonctionnement métabolique, modifications de l’expression génique hépatique et altérations histopathologiques hépatiques ressemblant à la MASLD humaine, y compris une fibrose qui progresse vers le stade 3 de fibrose avancée. Ce modèle peut être utilisé dans les études de physiopathologie du MASLD et dans les études précliniques de nouvelles thérapies.

Modèle murin de maladie hépatique stéatotique associée à un dysfonctionnement métabolique avec fibrose

Ce protocole basé sur la RMN étudie les interactions protéine-glycane faibles à l’aide de la cyanovirine-N et du D-mannose. En combinant des méthodes de détection de ligands et de protéines, il cartographie les sites de liaison, détecte les effets allostériques et identifie les complexes de rencontre. L’approche décrit la préparation des échantillons et l’analyse des données, offrant des informations structurelles et dynamiques précieuses pour les mécanismes de diagnostic et de reconnaissance...

Explorer les interactions protéine-glycane : progrès de la résonance magnétique nucléaire

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La colonisation de Euprymna scolopes Squid par Vibrio fischeri</em

Découvrez l'évaluation du métabolisme hépatique pendant la colonisation progressive de souris axéniques par spectroscopie RMN du proton. Cette méthode permet d'analyser les co-métabolites microbiens urinaires et les profils métaboliques hépatiques.

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Évaluer les changements métaboliques hépatiques pendant la colonisation progressive des axéniques de souris par¹ H NMR Spectroscopy

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