Name: Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 18 min 47 s
Description: Apprenez la transplantation hépatique orthotopique partielle chez le rat avec reconstruction artérielle. Cette méthode microchirurgicale évalue les dommages hépatocellulaires par dosage de l'alanine aminotransférase sérique.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Les auteurs remercient Pascal Paschenda et Mareike Schulz pour leur assistance technique.

<ol><li>Puhl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+viscosity+histidine-tryptophan-ketoglutarate+graft+flush+improves+subsequent+extended+cold+storage+in+University+of+Wisconsin+solution+in+an+extracorporeal+rat+liver+perfusion+and+rat+liver+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model.</a> Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).</li>
<li>Yagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Preservation+and+Microcirculation+with+POLYSOL+After+Partial+Liver+Transplantation+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats.</a> J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).</li>
<li>Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Value+of+a+physiological+liver+transplant+model+in+rats.+Induction+of+specific+graft+tolerance+in+a+fully+allogeneic+strain+combination%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination.</a> Transplantation. 33, 566-568 (1982).</li>
<li>Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+hepatic+arterial+blood+flow+in+rats+with+liver+transplants.+Examination+of+donor+liver-derived+serum+class+I+MHC+antigen+in+rats+with+liver+transplants+with+or+without+hepatic+arterial+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction.</a> Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).</li>
<li>Chaland, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+artery+anastomoses.+Hemodynamics+and+response+to+hemorrhage+in+conscious+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats.</a> Transplantation. 49, 675-678 (1990).</li>
<li>Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+consequence+of+rat+orthotopic+liver+transplantation+with+and+without+hepatic+arterial+reconstruction%3A+a+clinical%2C+pathological%2C+and+hemodynamic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Long-term consequence of rat orthotopic liver transplantation with and without hepatic arterial reconstruction: a clinical, pathological, and hemodynamic study.</a> Hepatology. 26, 198-205 (1997).</li>
<li>Zhong, Z., Theruvath, T. P., Currin, R. T., Waldmeier, P. C., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIM811%2C+a+mitochondrial+permeability+transition+inhibitor%2C+prevents+mitochondrial+depolarization+in+small-for-size+rat+liver+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">NIM811, a mitochondrial permeability transition inhibitor, prevents mitochondrial depolarization in small-for-size rat liver grafts.</a> Am. J. Transplant. 7, 1103-1111 (2007).</li>
<li>Spiegel, H. U., Palmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+techniques+of+orthotopic+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Invest.+Surg%22%5BJournal%5D)">Surgical techniques of orthotopic rat liver transplantation.</a> J. Invest. Surg. 11, 83-96 (1998).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C. 3rd, Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+technic+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Simplified technic for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Am. J. Surg. 130, 38-40 (1975).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li>
<li>Howden, B., Jablonski, P., Grossman, H., Marshall, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The importance of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Transplantation. 47, 428-431 (1989).</li>
<li>Gao, W., Lemasters, J. J., Thurman, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+new+method+for+hepatic+rearterialization+in+rat+orthotopic+liver+transplantation.+Reduction+of+liver+injury+and+improvement+of+surgical+outcome+by+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Development of a new method for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation. Reduction of liver injury and improvement of surgical outcome by arterialization.</a> Transplantation. 56, 19-24 (1993).</li>
<li>Zhao, D., Zimmermann, A., Wheatley, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometry+of+the+liver+after+liver+transplantation+in+the+rat%3A+significance+of+an+intact+arterial+supply%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Morphometry of the liver after liver transplantation in the rat: significance of an intact arterial supply.</a> Hepatology. 17, 310-317 (1993).</li>
<li>Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fifty-percent+partial+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Fifty-percent partial liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 292-293 (1996).</li>
<li>Lehmann, T. G., Bunzendahl, H., Langrehr, J. M., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+reconstruction+in+rat+liver+transplantation--development+of+a+new+tubing+technique+of+the+common+hepatic+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl.+Int%22%5BJournal%5D)">Arterial reconstruction in rat liver transplantation--development of a new tubing technique of the common hepatic artery.</a> Transpl. Int. 18, 56-64 (2005).</li>
<li>Reck, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+arterialization+on+hepatic+oxygen+supply%2C+tissue+energy+phosphates%2C+and+outcome+after+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Impact of arterialization on hepatic oxygen supply, tissue energy phosphates, and outcome after liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 582-587 (1996).</li>
<li>Hasuike, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+with+arterial+reconstruction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A simple method for orthotopic liver transplantation with arterial reconstruction in rats.</a> Transplantation. 45, 830-832 (1988).</li>
<li>Steffen, R., Ferguson, D. M., Krom, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+orthotopic+rat+liver+transplantation+with+arterial+cuff+anastomosis+to+the+recipient+common+hepatic+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A new method for orthotopic rat liver transplantation with arterial cuff anastomosis to the recipient common hepatic artery.</a> Transplantation. 48, 166-168 (1989).</li>
<li>Knoop, M., Bachmann, S., Keck, H., Steffen, R., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience+with+cuff+rearterialization+in+600+orthotopic+liver+grafts+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Experience with cuff rearterialization in 600 orthotopic liver grafts in the rat.</a> Am. J. Surg. 167, 360-363 (1994).</li>
<li>Hickman, R., Engelbrecht, G. H., Duminy, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 48, 1080(1989).</li>
<li>Liu, T., Freise, C. E., Ferrell, L., Ascher, N. L., Roberts, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+vascular+%22sleeve%22+anastomosis+for+rearterialization+in+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A modified vascular "sleeve" anastomosis for rearterialization in orthotopic liver transplantation in rats.</a> Transplantation. 54, 179-180 (1992).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+sleeve+anastomosis+for+reconstruction+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Modified sleeve anastomosis for reconstruction of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Microsurgery. 22, 62-68 (2002).</li>
<li>Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+partial+hepatectomies%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Rodent models of partial hepatectomies.</a> Liver Int. 28, 3-11 (2008).</li>
<li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRussell%2C+WMS+%22The+Principles+of+Humane+Experimental+Technique%22">The Principles of Humane Experimental Technique</a>. , Methuen & Co. Ltd. London. reprinted by UFAW (1992).</li>
</ol>

Nous n&#39;avons pas de conflits d&#39;intérêts à déclarer. Les rats sont logés sous pathogènes spécifiques sans conditions, selon les directives de la Fédération des Associations de laboratoire Sciences de l&#39;Animal (FELASA). Toutes les expériences ont été menées conformément à la loi fédérale allemande sur la protection des animaux et le «Guide pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire» (National Institutes of Health publication n ° 86-23, révisée en 1985).

Le premier modèle de rat BTA a été rapportée par Lee et al., En 1973 9, dans lequel tous les navires, y compris l&#39;artère hépatique ont été reconstruits par une méthode cousu main et le shunt porto-systémique extracorporelle a été utilisée. Ce modèle est techniquement compliqué et difficile à réaliser. Le modèle suivant a été l&#39;un sans reconstruction de l&#39;artère hépatique et le shunt extracorporelle, développé par les auteurs mêmes 10 en 1975. Par la suite, en 1979, Kamada et al. Introduit la technique d&#39;anastomose brassard pour le modèle sans 11 rearterialization hépatique. Avec ces modifications, le BTA chez le rat a été simplifiée avec un temps de anhépatique raccourci dans les opérations bénéficiaires et a été largement utilisé comme un modèle accepté expérimentale. Cependant, il ya eu une controverse considérable depuis lors sur la signification de artérialisation hépatique chez le rat BTA 8 parce que la artérialisation était une tâche exigeante, mais diserais pas affecté la survie après la transplantation. De nombreuses études sur artérialisation hépatique en utilisant des techniques de reconstruction différents ont été rapportés 8, tel qu&#39;un segment de l&#39;aorte à l&#39;aorte anastomose 3,9,17, une technique d&#39;anastomose brassard 18,19,20, une technique télescopique 5, une technique de stent 13, 16, et une technique d&#39;anastomose manchon 12,21-23. Bien que la technique de BTA rat n&#39;est pas encore standardisé aujourd&#39;hui, le modèle artérialisée a été de plus en plus favorisés en termes de sa supériorité physiologique 8,12,13,14. Parmi les techniques mentionnées ci-dessus, une technique de stent qui est simple et rapide à effectuer a été rapporté par Lehmann et al. 16 en 2005. L&#39;étude a montré d&#39;excellents résultats: pas de taux d&#39;occlusion a été observée dans l&#39;artère hépatique reconstruite à 8 h, 24 h et 6 mois après la reperfusion. Nous avons donc adopté cette technique pour artérialisation hépatique. Nous performancema cousu main anastomose pour la reconstruction de la SHVC et IHVC. Cette méthode fournit le site anastomotique avec une condition physiologique optimale, ce qui conduit à la réduction de l&#39;incidence de la thrombose 8, et est la meilleure simulation de microchirurgie et de la formation pour les chirurgiens. En outre, l&#39;anastomose peut être possible même avec des souches de vaisseaux courts. En ce qui concerne l&#39;anastomose de IHVC, cette méthode ne nécessite pas une longue IHVC sur le côté du greffon par rapport à la technique d&#39;anastomose brassard. Par conséquent, lorsque la veine rénale est disséquée des bailleurs de fonds pour faire l&#39;IHVC du greffon à long, cette méthode est applicable à la transplantation d&#39;un greffon qui nécessite une petite IHVC longue, comme une greffe de 30% qui se compose de lobes latéraux droit et du noyau caudé avec une courte intrahépatique la veine cave sans SHVC 2. En ce qui concerne les techniques de résection hépatique chez le rat, à ce jour, plusieurs méthodes ont été signalés, les deux principales techniques sont la technique de ligature de masse classiqueet la technique de bâtiment orienté 24. Nous effectuons la technique de ligature classique pour une résection hépatique 50% 15, mais sous un microscope chirurgical pour faire la fine procédure et d&#39;éviter des dommages aux lobes restants et les structures. Nous avons décrit les résultats représentatifs des rats receveurs dans notre modèle, les rats ont survécu pendant la période d&#39;observation de 7 jours sans complications apparentes. Le modèle peut être modifié à des fins différentes des expériences en choisissant les différents paramètres, tels que le stockage froid prolongé, prolongée d&#39;ischémie chaude qui inclut le don après la mort cardiaque, et l&#39;utilisation de greffons hépatiques plus petites ou des greffes à partir de modèles expérimentaux de lésions du foie ou des maladies. Dans notre expérience, il ya trois facteurs clés dans l&#39;ensemble des procédures qui peuvent affecter la survie après la transplantation, le paramètre le plus fiable pour les résultats du BTA rat: le montant de la perte de sang, le temps de fonctionnement, espécialement serrage moment de la veine porte et IHVC et la pertinence de la reconstruction de chaque navire, ce qui pourrait entraîner une sténose, thrombose, ou des saignements. Dans une période de formation de ce modèle, la plupart des échecs pourrait probablement être liée à ces facteurs. Dans cet article, vidéo, nous vous présentons étape par étape les instructions pour les procédures chirurgicales pour notre modèle de rat de BTA à la reconstruction partielle de l&#39;artère hépatique. Même si un modèle de rat de BTA est complexe et nécessite des compétences avancées de microchirurgie, cet article fournit une foule de renseignements pratiques, qui devrait servir comme un bon guide pour la formation et l&#39;apprentissage de ce modèle. Apprendre efficacement ce modèle est particulièrement important pour la réduction de la période d&#39;apprentissage, ce qui réduit le nombre d&#39;animaux et les coûts nécessaires à la pratique, et plus tard la reproduction de résultats fiables dans les expériences. Ceci est en ligne avec le concept des 3R (remplacement, réduction et raffinement) de l&#39;expérimentation animale, qui a été postulée par Russell et Burch en1959 25.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Microscope d&#39;opération </td><td> Leica </td><td> M651 </td><td></td></tr><tr><td> Source lumineuse </td><td> Schott </td><td> KL1500LCD </td><td></td></tr><tr><td> Des cotons-tiges </td><td> NOBA Verbandmittel </td><td> 974202 </td><td></td></tr><tr><td> Tampons de gaze (5x5 cm) </td><td> Fuhrmann </td><td> 10002 </td><td></td></tr><tr><td> solution de polyvidone iodée </td><td> Mundipharma </td><td> 6108022.00.01 </td><td></td></tr><tr><td> L&#39;huile à base d&#39;argile </td><td> Debika société </td><td> 090148 </td><td></td></tr><tr><td> TachoSil </td><td> Takeda Pharmaceuticals International GmbH </td><td> EU/1/04/277/001-004</td><td> Appliquée à la surface du foie réséqué </td></tr><tr><td> Scalpel lame n ° 11 </td><td> Pfm médical </td><td> 200130011 </td><td> Préparation de manchette et stents </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 14 </td><td> B. Braun </td><td> 4268210S </td><td> Brassard pour PV </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 18 </td><td> B. Braun </td><td> 4268130S </td><td> Perfusion par PV </td></tr><tr><td> Cathéter de calibre 24 </td><td> B. Braun </td><td> 4269071S </td><td> Stent pour les BD et HA </td></tr><tr><td> Suture soie 4-0 </td><td> Resorba </td><td> H3F </td><td> La résection hépatique </td></tr><tr><td> 6-0 suture de soie </td><td> Resorba </td><td> H1F </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 Prolene (polypropylène) de suture </td><td> Ethicon </td><td> 8701H </td><td> SHVC et IHVC </td></tr><tr><td> 4-0 suture Vicryl </td><td> Ethicon </td><td> V304H </td><td> Fermeture abdominale </td></tr><tr><td> 5 ml seringue </td><td> Terumo </td><td> SS + T05ES1 </td><td> Sauvegardez oreiller </td></tr><tr><td> Coussin chauffant </td><td> Thermo </td><td> 190 x 260 mm </td><td></td></tr><tr><td> Magnetic système de rétraction fixateur </td><td> Fin Sciences Tools Inc </td><td> 18200-01 18200-02 18200-03 18200-12 </td><td></td></tr><tr><td> Bain d&#39;eau froide </td><td> Huber </td><td> 740.000X </td><td> La préservation du greffon </td></tr><tr><td> Pince bipolaire </td><td> Söring </td><td> MBC-200 </td><td></td></tr><tr><td> Pince Mosquito </td><td> BONIMED </td><td> 451-476-03 </td><td> Deux paires utilisées </td></tr><tr><td> Adson micro pince </td><td> Dimeda </td><td> 10.176.12 </td><td></td></tr><tr><td> Km courbecro pince </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Droites micropincettes </td><td> Bonimed </td><td> 451-476-03 </td><td></td></tr><tr><td> Courbes Ciseaux micro </td><td> Medicon </td><td> 15/05/83 </td><td></td></tr><tr><td> Droites Ciseaux micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD12 </td><td> Fine incision </td></tr><tr><td> Ciseaux </td><td> AESCULAP </td><td> BC211W </td><td></td></tr><tr><td> Porte-aiguille micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD241R </td><td> Reconstruction </td></tr><tr><td> Porte-aiguille maire-Hegar </td><td> Mizuho Ikakogyo </td><td> 06-798-00 </td><td> Fermeture abdominale </td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog pince (droite) </td><td> ULRICH </td><td> CV3054 </td><td></td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog pince (courbe) </td><td> CODMAN </td> &lt;td&gt; 37-1062 </td><td></td></tr><tr><td> Satinsky pince </td><td> Mizuhoika </td><td> 09-230-24 </td><td></td></tr><tr><td> Pince vasculaire périphérique </td><td> Teleflex Medical </td><td> 353494 </td><td> Bénéficiaire SHVC </td></tr><tr><td> Pince micro navire (jetable) </td><td> AROSurgical Instruments Corporation </td><td> TKM-1-60 g </td><td> PV, IHVC greffe, et le destinataire HA </td></tr><tr><td> Pince micro navire (métal) </td><td> Fin Sciences Tools Inc </td><td> 18052-01 </td><td> Bénéficiaire IHVC </td></tr><tr><td> Solution de Ringer lactate </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 6150917.00.00 </td><td></td></tr><tr><td> Une solution saline normale </td><td> DeltaSelect </td><td> 1299.99.99 </td><td></td></tr><tr><td> Solution HTK </td><td> Dr. Franz Köhler Chemie GmbH </td><td> 31268.00.00 </td><td> Solution de conservation </td></tr><tr><td> Héparine-Natrium </td><td> Ratiopharm </td><td> 5394.02.00 </td><td> 500 UI avant la perfusion du greffon </td></tr><tr><td> Bicarbonate de sodium 8,4% </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 4399.97.99 </td><td> 0,5 ml après la reperfusion </td></tr><tr><td> Solution de glucose à 5% </td><td> B. Braun </td><td> 6714567.06.00 </td><td> 1,0 ml après la reperfusion </td></tr><tr><td> De sodium Cefuroxim </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 38985.01.00 </td><td> Antibiotique, 16 mg / kg </td></tr><tr><td> La buprénorphine </td><td> Essex Pharma </td><td> 997.00.00 </td><td> Analgésique, 0,1 mg / kg </td></tr><tr><td> Intensive Care Unit Cage </td><td> Produits Brinsea Ltd </td><td> Vetario S10 </td><td> Les soins postopératoires </td></tr></tbody></table>

interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Transplantation hépatique orthotopique (OLT) chez le rat en utilisant une greffe totale ou partielle est un modèle indispensable pour la recherche en transplantation expérimentale, telles que les études sur la préservation du greffon et 1,2 lésions d&#39;ischémie-reperfusion, les réponses immunologiques 3,4, 5,6 hémodynamique et petit-for-size syndrome 7. Le BTA rat est l&#39;un des modèles animaux les plus difficiles de la chirurgie expérimentale et exige des compétences de microchirurgie de pointe qui prennent beaucoup de temps à apprendre. Par conséquent, l&#39;utilisation de ce modèle a été limité. Depuis la fiabilité et la reproductibilité des résultats sont des éléments clés des expériences dans lesquelles ces modèles animaux complexes sont utilisés, il est essentiel pour les chirurgiens qui sont impliqués dans le BTA rat d&#39;être formés à des procédures bien standardisés et sophistiqués pour ce modèle. Bien que les techniques diverses variantes et modifications du BTA chez le rat ont été rapportés 8 depuis le premier modèle était décrivanted par Lee et al. 9 en 1973, la suppression de la reconstruction de l&#39;artère hépatique 10 et l&#39;introduction de la technique d&#39;anastomose brassard en Kamada et al. 11 ont été une avancée majeure dans ce modèle, car ils ont simplifié les procédures de reconstruction dans une grande mesure . Dans le modèle de Kamada et al., Le rearterialization hépatique a également été éliminé. Les rats ne pourrait survivre sans flux artériel hépatique après transplantation hépatique, il ya eu une controverse considérable sur la valeur de artérialisation hépatique. Cependant, la supériorité physiologique du modèle artérialisée a été de plus en plus reconnu, notamment en termes de préservation du système biliaire et l&#39;intégrité 8,12 8,13,14 foie. Dans cet article, nous présentons détaillées des interventions chirurgicales pour un modèle de rat de BTA à la reconstruction de l&#39;artère hépatique à l&#39;aide d&#39;une greffe partielle de 50% après résection du foie ex vivotion. Les procédures de reconstruction pour chaque navire et le canal biliaire sont réalisées par les méthodes suivantes: une suture 7-0 polypropylène continue pour le supra-et infrahepatic la veine cave; une technique brassard pour la veine porte, et une technique de stent pour l&#39;artère hépatique et la voie biliaire.

Toutes les rats destinataire (n = 20) ont survécu sans complications apparentes jusqu&#39;à ce que l&#39;euthanasie prévue pour le prélèvement sanguin à 1, 3, 24, et 168 heures (7 jours) après la reperfusion portale (n = 5 à chaque point dans le temps). Les échantillons de sang ont été prélevés dans la IHVC par une ponction directe avec une aiguille de calibre 27. Après la centrifugation à 5340 xg pendant 10 min, les échantillons de sérum ont été prélevés et analysés pour l&#39;alanine aminotransférase (ALAT), qui reflètent le degré d&#39;atteinte hépatocellulaire après la transplantation. L&#39;évolution temporelle de l&#39;évolution des taux sériques d&#39;ALT est illustré à la figure 16. Les taux d&#39;ALAT a atteint un pic à 24 h (moyenne ± écart type: 212,6 ± 67,9 UI / L), puis a diminué à l&#39;intérieur des limites normales à 168 h (33,6 ± 6,8 UI / L). <img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig1.jpg" /> Figure 1. Brassard pour la veine porte (PV) à partir d&#39;un 14-jauge de cathéter, et les stents de l&#39;artère hépatique (HA) et du canal cholédoque (BD) du 24-jauge cathéters. <img alt="Figure 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2.jpg" /> Figure 2. Schéma de la suppression du foie du rat donneur BD, des voies biliaires; artère hépatique. HA,; IHVC, infrahepatic la veine cave; PV, la veine porte; SHVC, la veine cave sus-hépatique. <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig3.jpg" /> Figure 3. Fonctionnement des bailleurs de fonds. a. Le rat est placé sur un coussin chauffant d&#39;un système de rétraction fixateur magnétique. L&#39;abdomen est ouvert par une incision médiane avec des extensions bilatérales. B. L&#39;insertion de l&#39;endoprothèse dans le canal cholédoque. C. Perfusion du foie par la veine porte. Les abréviations sont expliquered dans la figure 2. <img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig4.jpg" /> Figure 4. La fixation d&#39;une manchette de la veine porte. a, b. La pince DeBakey Bulldog qui saisit le tronc de la veine porte est placée au-dessus de la coupelle métallique. La coupe est monté dans le boîtier en plastique rempli de glace pilée. C. La veine porte est mis à travers le brassard. D. La paroi de la veine porte est retourné sur le brassard avec le moignon de la veine splénique l&#39;extérieur de la manchette lors de la 7 heures de position et une extension de la manchette à la position 12 heures. e. La veine porte est sécurisé avec un fil de soie 6-0 circonférentielle sur le brassard. Les flèches noires indiquent le moignon de la veine splénique. <img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig5.jpg" /> Figure 5. Ex vivol&#39;insertion d&#39;une endoprothèse dans l&#39;artère hépatique. a. Le foie est fixé par serrage des deux bords de la membrane, et l&#39;artère hépatique est tiré en ligne droite en maintenant le fil de ligature de l&#39;artère. b. La paroi antérieure de la petite incision sur l&#39;artère hépatique est maintenue par une pince droites micro . c, d. L&#39;endoprothèse est introduite dans l&#39;artère hépatique et fixé avec un fil de soie 6-0. <img alt="Figure 6" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6.jpg" /> Figure 6. Le schéma de la résection hépatique ex vivo de 50%. Lobes de couleur grise sont supprimés. ACL, antérieure du lobe caudé; PCL, lobe caudé postérieure; LLL, à gauche lobe latéral; LML, la partie gauche du lobe médian; RML, partie droite du lobe médian; SRL, supérieur du lobe latéral droit; IRL, inférieure du lobe latéral droit. Figure 7. Ex vivo résection hépatique de 50%. une ligature. Ligature du pédicule du lobe caudé postérieure. b. du pédicule de la partie gauche du lobe médian. c. Le foie avant la résection de 50%. d. Le foie après résection de 50%. <img alt="Figure 8" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig8.jpg" /> Figure 8. Ex vivo plastie de la veine cave sus-hépatique. a. Le foie est fixé par serrage des deux bords de la membrane avec la pince de moustiques. b. loger sutures avec 7-0 polypropylène sont fixés aux deux coins. <img alt="Figure 9" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig9highres.jpg" src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig9.jpg&quot; /&gt; Figure 9. Schéma de l&#39;implantation du greffon chez le rat. Destinataire Les procédures de reconstruction sont effectués pour le supra-et infrahepatic veine cave (SHVC et IHVC) avec une suture 7-0 continu, la veine porte (PV) par une technique de manchette, et l&#39;hépatique artère (HA) et du canal cholédoque (BD) par une technique de stent. <img alt="Figure 10" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig10.jpg" /> Figure 10. Destinataire opération jusqu&#39;à ce que l&#39;enlèvement du foie natif. une. L&#39;abdomen est ouvert par une incision médiane. b. La veine surrénale droite est ligaturé. c. Le foie natif est excisé. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="Figure 11" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig11.jpg" /> Figure 11. Anastomose de l&#39;suprahepatic la veine cave. a, b. Pince vasculaire périphérique pour la veine cave sus-hépatique est fixé à un bloc de l&#39;huile à base d&#39;argile. Les sutures de fixation aux deux coins sont maintenus avec une légère traction superiolaterally d&#39;élargir l&#39;anastomose. C. Continu de suture intraluminale de la rangée postérieure en cours. D. Suture continue de la rangée antérieure en cours. <img alt="Figure 12" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig12.jpg" /> Figure 12. La reconstruction de la veine porte. a, b. La pince de serrage de moustiques de la veine porte est fixé dans l&#39;argile à base d&#39;huile et tiré vers le hile du foie. cf. l&#39;insertion de la coiffe dans la veine porte. <img alt="Figure 13" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig13.jpg" /> Figure 13. Reconstruction de l&#39;artère hépatique. a, b,. </stron<html> g Insertion&gt; d&#39;un stent dans l&#39;artère hépatique commune bénéficiaire (CHA) à la bifurcation de l&#39;artère hépatique propre (PHA) et l&#39;artère gastro-duodénale (GDA). <img alt="Figure 14" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig14.jpg" /> Figure 14. Anastomose de la veine cave infrahepatic. une reperfusion. Les sutures de fixation à deux coins. b. suture continue de la rangée postérieure. c. suture continue de la rangée antérieure. d. du infrahepatic la veine cave. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="Figure 15" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig15.jpg" /> Figure 15. Toutes les procédures de reconstruction est terminée. Les abréviations sont expliquées dans la figure 2. <img alt="&lt;/ Html">&quot;Figure 16&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg&quot; /&gt; Figure 16 postopératoire évolution temporelle de l&#39;évolution des taux sériques d&#39;alanine aminotransférase (ALAT) (n = 20, n = 5 à chaque point dans le temps).. Les données sont exprimées en tant que moyen de barres d&#39;erreur qui indiquent l&#39;écart type. Les taux d&#39;ALAT a atteint un pic à 24 h (212,6 ± 67,9 UI / L), puis a diminué à l&#39;intérieur des limites normales à 168 h (33,6 ± 6,8 UI / L).

Transplantation hépatique orthotopique chez le rat est un modèle expérimental indispensable pour la recherche biomédicale. Nous présentons ici nos procédures chirurgicales de transplantation hépatique orthotopique chez le rat à la reconstruction de l&#39;artère hépatique à l&#39;aide d&#39;une greffe partielle de 50%.

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

La transplantation hépatique orthotopique (THO) chez le rat, utilisant un greffon total ou partiel, constitue un modèle expérimental indispensable pour la recherche sur la transplantation, telle que...

L'objectif général de cette procédure est de réaliser une transplantation hépatique partielle orthotopique chez le rat, en tant que modèle expérimental reproductible pour la recherche sur la transplantation. Cela est accompli en premier lieu par l'ablation du foie du rat donneur. La deuxième étape consiste en la préparation du greffon hépatique ex vivo, incluant une résection hépatique de 50 %.Ensuite, le foie natif du rat receveur est excisé. La dernière étape consiste en l'implantation de la greffe hépatique partielle dans le rat receveur. Finalement, les taux sériques d'alanine aminotransférase sont mesurés afin d'évaluer les lésions hépatocellulaires de la greffe hépatique après la transplantation.En général, les personnes novices dans cette procédure éprouvent des difficultés en raison de la complexité de celle-ci, qui exige des compétences avancées en microchirurgie. Pour commencer cette procédure, placer le rat donneur anesthésié sur un tapis chauffant après avoir confirmé par un pincement de l’orteil que l’animal est complètement anesthésié, puis fixer les membres supérieurs à l’aide du système de rétraction à fixateur magnétique. Raser les poils de toute la région abdominale du rat et stériliser la peau correspondante à l’aide d’une solution de povidone iodée.Ouvrir l'abdomen par une incision médiane avec des extensions bilatérales. Placer une seringue de cinq millilitres sous le dos du rat afin que la veine cave sus-hépatique soit soulevée vers l'avant à l’aide d’une pince hémostatique de type moustique, tirer l’ensemble vers la tête, puis appliquer les rétracteurs sous-costaux pour exposer le champ opératoire. En raison de la nécessité de manipuler fréquemment les rétracteurs et la seringue de cinq millilitres pendant l’intervention, aucun champ opératoire n’est utilisé autour de l’incision. Travailler sous un microscope chirurgical à un grossissement de 16 x, disséquer le ligament falciforme et le ligament triangulaire gauche en forme de huit, sectionner la veine phrénique gauche, puis rétracter les lobes médian et latéral gauche vers le haut à l’aide d’un tampon de gaze humide.À l’aide de forceps bipolaires, coaguler et sectionner les vaisseaux paraœsophagiens situés entre le lobe latéral gauche et le lobe antérieur. Déplacer les intestins à l’extérieur de l’abdomen, du côté gauche du rat, et les recouvrir avec un tampon de gaze humide. Tamponner, puis rétracter vers le haut le lobe latéral droit à l’aide d’un tampon de gaze humide.Isoler la veine cave infra-hépatique du tissu rétropéritonéal et ligaturer la veine sus-rénale droite, qui sera sectionnée ultérieurement juste avant le prélèvement de la greffe pour insérer un stent dans le canal biliaire. Commencer par ligaturer le canal biliaire au niveau de la bifurcation de l'artère gastroduodénale. Pratiquer une petite incision dans la paroi antérieure du canal biliaire en amont du point ligaturé, puis, en maintenant la paroi antérieure de l'incision avec une pince microchirurgicale droite tenue de la main gauche, utiliser une pince microchirurgicale courbe tenue de la main droite pour insérer un stent dans le canal. Le fixer à l’aide d’un fil de soie 6/0.Conserver l'une des extrémités coupées du fil sur le canal biliaire sur une longueur de quatre millimètres afin que le fil puisse être maintenu lors de l'anastomose ultérieure. Libérer la veine porte en ligaturant et en sectionnant les veines porte et splénique. Liger et sectionner l'artère gastroduodénale. Puis isoler l'artère hépatique commune depuis la tête du pancréas jusqu'à sa racine.Effectuez une rotation du foie vers la droite à l’aide de coton-tiges et disséquez le ligament entourant la partie postérieure du foie et de l’œsophage à l’issue des préparatifs. Pour l’excision du foie. Retirez les rétracteurs, la pince hémostatique destinée au processus xiphoïde et la seringue de cinq millilitres située sous la partie postérieure du rat.Replacer les intestins dans la cavité abdominale. Injecter 500 UI d'héparine sodique dans deux millilitres de solution saline normale par la veine pénienne. Environ trois minutes plus tard, remplacer la seringue de cinq millilitres, la pince hémostatique et le rétracteur, puis ligaturer l'artère hépatique commune en amont de son origine.Garder l'une des extrémités coupées du fil ligaturé pour l'artère hépatique commune. Longtemps après avoir clampé la veine cave sous-hépatique. Fermer près de la veine rénale droite avec une pince hémostatique fine.Clipper la veine porte avec un clamp vasculaire microchirurgical jetable en dessous du moignon de la veine splénique. Inciser la paroi antérieure de la veine porte et insérer un cathéter de 18 gauge dans la veine porte. Perfusionner le foie in situ avec 60 millilitres de solution froide d'histidine-tryptophane-cétoglutarate.À une pression hydrostatique de 20 centimètres, l'eau a immédiatement sectionné le diaphragme, la veine cave intrathoracique et la paroi antérieure de la veine cave infra-hépatique, permettant ainsi l'élimination de la solution de perfusion du foie. Pincez la veine cave infra-hépatique à l'aide d'une pince microchirurgicale juste en dessous du foie. Excisez le foie en disséquant la veine cave infra-hépatique.La veine porte, le diaphragme, les ligaments restants, la veine sus-rénale droite et l'artère hépatique commune. Placer le foie excisé dans une solution HTK froide contenue dans un récipient métallique placé dans une boîte en plastique remplie de glace pilée. Les interventions sur la greffe hépatique sont réalisées dans le récipient métallique rempli de solution HTK glacée, afin de fixer un manchon sur la veine porte : pincer le tronc veineux porte à l’aide d’un clamp DeBakey en forme de pince bulldog, puis positionner ce clamp en pont au-dessus du récipient.Placer la veine porte dans la manchette et pincer à nouveau la veine al ensemble avec l'extension de la manchette à la position de 12 heures ; retourner la paroi de la veine porte sur la manchette afin de positionner le moignon de la veine splénique à l'extérieur de la manchette à la position de sept heures, puis fixer la veine porte avec un fil de soie 6-0 afin d'insérer un stent dans l'artère hépatique. Stabiliser le foie en pinçant avec des pinces les deux bords du diaphragme, puis tendre l'artère hépatique commune en maintenant le fil ligaturé avec la pince DeBakey bulldog munie de ciseaux microchirurgicaux droits. Effectuer une petite incision dans la paroi antérieure de l'artère hépatique commune à l'aide de la main gauche.Tenez la paroi antérieure de l'incision avec une pince microchirurgicale droite et, de la main droite, insérez un stent dans l'artère hépatique commune. À l’aide d’une pince microchirurgicale courbe, fixez le stent avec un fil de soie 6/0 et laissez l’une des extrémités coupées du fil mesurer quatre millimètres de long. Perfusez le foie par le cathéter artériel avec cinq millilitres de solution HTK froide pour la résection hépatique à 50 %.Commencez par pincer le lobe postérieur avec une pince hémostatique afin de le maintenir en place. Ensuite, ligaturez son pédicule avec un fil de soie 4-0 et résez le lobe.Le lobe coracé antérieur est retiré de la même manière. Ensuite, faites pivoter la boîte en plastique de 90 degrés. Pincez le bord droit du diaphragme et la partie gauche du lobe médian.Effectuez une petite incision au niveau du bord supérieur de la limite des portions bilatérales du lobe médian, puis retirez la portion gauche après ligature. Après la ligature du pédicule avec un fil de soie 4-0, retirez le lobe latéral gauche et cautérisez soigneusement la surface hépatique réséquée à l’aide de forceps bipolaires. La masse hépatique est désormais réduite d’environ 50 % pour la plastie de la veine cave sus-hépatique.Commencez par fixer la position du foie en pinçant les deux bords du diaphragme avec une pince hémostatique. Ensuite, découpez la paroi antérieure de la veine cave sus-hépatique en enlevant la portion correspondante du diaphragme. Placez deux sutures en polypropylène 7-0 de l'extérieur vers l'intérieur aux deux coins, en tant que points de fixation pour l'anastomose ultérieure.Ensuite, découper la paroi postérieure de la veine cave sus-hépatique. Conserver le greffon hépatique à quatre degrés Celsius dans une solution HTK placée dans un bain d'eau froide. Préparer le receveur pour l'intervention de la même manière que pour l'opération du donneur et ouvrir l'abdomen par une incision médiane.Placer un écouvillon humide de gaze sur le côté droit du duodénum et sur l'ensemble des intestins. Pour obtenir un champ opératoire autour de la veine cave infrahépatique. Introduire les lobes latéral gauche et médian dans la cavité sous-phrénique gauche et rétracter le lobe latéral droit vers le haut à l’aide d’un écouvillon humide de gaze.Isolez la veine cave infrahépatique du tissu rétropéritonéal, ligaturez et sectionnez la veine sus-rénale droite à l’aide d’un champ humide et de compresses en coton. Tournez le foie vers la gauche et disséquez le ligament entourant la partie postérieure du foie. Sectionnez le canal biliaire juste en dessous de la branche provenant du lobe caudé.Conserver l'une des extrémités coupées du fil ligaturé pour le canal biliaire sur une longueur de quatre millimètres ; ligaturer et diviser l'artère gastroduodénale et l'artère hépatique propre à une distance de trois millimètres du point de bifurcation à partir de l'artère hépatique commune, afin d'obtenir une structure artérielle élargie à l'extrémité de l'artère hépatique commune. Pincer la veine cave infra-hépatique à l'aide d'une pince microvasculaire métallique juste au-dessus de la veine rénale droite, et la veine porte au niveau de sa bifurcation dans le hile hépatique à l'aide d'une pince hémostatique fine. Pincer ensemble la veine cave supra-hépatique et le diaphragme à l'aide d'une pince vasculaire périphérique, puis fixer cette pince dans un morceau d'argile à base d'huile. Réduire l'anesthésie avec de l'isoflurane à 0,4 % en volume. Enlever le foie natif du receveur en sectionnant la veine cave sus-hépatique au niveau de la limite entre celle-ci et le foie.La veine porte juste au-dessus de la mâchoire des pinces de moustique et la veine cave infra-hépatique légèrement en dessous du point médian entre le foie et la veine rénale droite. Placer la greffe hépatique de manière orthotopique. La reconstruction des vaisseaux est la partie la plus difficile et la plus importante de cette procédure.Il doit être effectué très soigneusement mais rapidement pour l’anastomose de la veine cave sus-hépatique par suture continue. Placer la suture de maintien sur la veine cave sus-hépatique du receveur de l’intérieur vers l’extérieur en utilisant le polypropylène 7-0 attaché à l’angle droit de la greffe, puis nouer le point de la même manière. Placer la deuxième suture de maintien à l’angle gauche.Ce point constituera le point de départ d'une suture continue. Pour élargir l'anastomose, saisissez et maintenez les fils à l'aide de pinces DeBakey bulldog aux deux extrémités, en exerçant une légère traction vers le haut et latéralement. Ensuite, percez avec le fil à l'angle gauche à travers la paroi du côté du greffon, de l'extérieur vers l'intérieur, en restant proche du nœud situé à l'extérieur, puis effectuez la rangée postérieure de la veine cave saphène intraluminale avec sept à huit points jusqu'à l'angle droit.Réalisez les premiers points avec soin afin que les lumières internes soient orientées l'une vers l'autre au bon angle. Percez avec le polypropylène sept zéro à travers le vaisseau du côté du greffon vers l'extérieur. Suturez la rangée antérieure de l'extérieur vers la gauche avec environ 10 points.Rincez l'intérieur avec une solution de Ringer lactate. Pour éliminer les bulles d'air, effectuez le dernier point de suture près du point de fixation, puis nouez-les ensemble. Pour la reconstruction de la veine porte, clampée la veine porte à l'aide d'un clamp pour microvaisseaux et fixez la pince mosquito dans l'argile. Ensuite, incisez la paroi antérieure de la veine porte juste en dessous de la mâchoire de la pince mosquito.Lavez l'intérieur de la veine porte du receveur et du manchon avec une solution de Ringer lactaté. Insérez le manchon dans la veine porte et fixez-le à l’aide d’un fil de soie circonférentiel de calibre six zéro. Enfin, restituez la perfusion du foie.Retirer la seringue de cinq millilitres située à l’arrière du rat et augmenter la concentration d’isoflurane à 0,8 pour cent en volume pour la reconstruction du foie par une technique de stent. Tout d’abord, saisir le fil de l’artère hépatique propre à l’aide d’une pince hémostatique fine et la fixer dans l’argile. Ensuite, placer une pince sur l’artère hépatique commune du receveur.Pratiquer une petite incision au niveau de la bifurcation de la structure en Y à l'extrémité de l'artère hépatique commune afin de créer une ouverture en forme d'entonnoir. Tenir le stent placé dans l'artère hépatique commune du greffon à l'aide d'une pince microchirurgicale courbe. Introduire le stent dans l'artère hépatique commune du receveur et le fixer à l'aide d'un fil de soie 6-0. Nœuder une extrémité de ce fil ensemble avec le fil de 4 millimètres situé sur l'artère hépatique commune du greffon, de sorte que les deux artères hépatiques communes se rapprochent l'une de l'autre, réduisant ainsi la tension au niveau du site d'anastomose.Après cela, desserrer la pince à ampoules pour l'anastomose de la veine cave infra-hépatique par un point d'anastomose continue de la même manière que pour la veine cave supra-hépatique, mais en utilisant davantage de points avec des prises plus fines. Après la déclampation, augmenter la concentration d'anesthésie à 1,0 pour cent en volume pour la reconstruction du canal biliaire. Tenir le fil du canal biliaire du receveur à l'aide d'une pince hémostatique fine et le fixer dans l'argile.Pratiquer une petite incision dans le canal biliaire au niveau approprié afin que le canal biliaire reconstruit ne soit pas trop long. Insérer le stent et le fixer à l’aide d’un fil de soie six zéro. Nœuder ce fil et le fil placé sur le canal de la greffe.À présent, toutes les procédures de reconstruction sont terminées. Fermer l'incision abdominale par des sutures continues en fil Vicryl 4-0 par couches. Immédiatement après l'opération, traiter le rat receveur par une injection sous-cutanée de sodium sphéro et de buprénorphine dans un total de 1,5 millilitre de solution saline normale.Laisser le rat se remettre pendant 60 minutes dans une cage d'unité de soins intensifs spéciale équipée d'air chaud et d'un apport en oxygène, avant de le ramener dans une cage ordinaire. Tous les rats receveurs ont survécu jusqu'à l'euthanasie programmée pour le prélèvement sanguin à 1, 3, 24 et 168 heures après la reperfusion portale. Les échantillons sériques ont été analysés pour déterminer les taux d'alanine aminotransférase, qui reflètent le degré de dommages hépatocellulaires des greffons hépatiques après la transplantation.Comme le montre ce greffon, les niveaux de LT ont atteint un pic à 24 heures, puis ont diminué pour revenir à des valeurs normales au bout de 168 heures. À l'issue de cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'effectuer une transplantation hépatique partielle chez le rat en tant que modèle expérimental reproductible pour la recherche sur la transplantation.

surgical-procedures-for-rat-model-partial-orthotopic-liver

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

Nous présentons une révision facile à mettre en place de la classique à deux revers technique pour la transplantation hépatique chez le rat.

Une transplantation hépatique orthotopique chez le rat

Transplantation hépatique auxiliaire fournit un support temporaire en insuffisance hépatique aiguë, jusqu'à la régénération du foie défaillant. La transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) avec artérialisation de la veine porte (PVA) rend une fonction hépatique suffisante. Nous avons développé une technique analogue chez le rat afin d'examiner l'influence de l'artérialisation de la veine sur la morphologie et la fonction de la greffe.

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l&#39;insuffisance hépatique aiguë

Ici, un protocole impliquant une transplantation hépatique partielle rat re-artérialisé est présenté. Plus précisément, 70 % foie a été réséquée en vivo en utilisant une technique de mise à jour d’une hépatectomie axée sur le navire. L’artère hépatique a été reconstruite d’une manière d’extrémité à l’autre. La technique de Brassard a été modifiée pour raccourcir le temps de l’abouchement de la veine cave infrahepatic.

Re-artérialisé Transplantation de foie partielle de Rat in vivo axée sur le navire 70 % hépatectomie

La reconstruction de la veine sus-hépatique (SHVC) reste une étape difficile dans une transplantation hépatique orthotopique rat. Dans cet article, nous montrons un protocole étape par étape pour la reconstruction de SHVC chez le rat en utilisant une technique nouvelle anastomose magnétique.

Un modèle de Rat de la Orthotopic Transplantation hépatique en utilisant une Technique nouvelle anastomose magnétique pour la Reconstruction de veine sus-hépatique

Le but de cette étude est de modifier le modèle de greffe du foie orthotopique de rat pour mieux représenter la transplantation de foie humain et améliorer la survie des receveurs. La méthode présentée rétablit l’afflux artériel hépatique en reliant l’artère hépatique commune du foie de donneur à l’artère hépatique appropriée du foie de destinataire.

Complications réduites après reconnexion artérielle dans un modèle de rat de transplantation orthotopique de foie

Le protocole de greffe hépatique auxiliaire hétérotopique de rat décrit ici offre un outil d’investigation pratique pour explorer les mécanismes de rejet de l’allogreffe hépatique. Ce modèle permet d’atténuer les obstacles chirurgicaux et le stress animal de la transplantation hépatique orthotopique chez le rat.

Modèle de greffe de foie entier auxiliaire hétérotopique utilisant une hépaticourétérostomie pour des études de rejet d’allogreffe

Cette vidéo montre le modèle orthotopique greffe aortique comme un modèle simple pour étudier le développement de la vasculopathie transplantation (TVP) chez les rats.

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Ici, nous présentons un nouveau modèle de foie de souris humanisé généré chez des souris TRECK)/SCID après la transplantation de cellules hépatiques humaines immatures et expansibles.

Génération d&#39;un humanisée foie de souris Utilisation hépatique humaine Cellules souches

Un modèle de pince hilaire de foie de rat unique a été développé pour étudier l'impact des molécules pharmacologiques dans l'amélioration ischémie-reperfusion. Ce modèle comprend la canulation directe de la fourniture de portail au segment hépatique ischémique via une branche de la veine porte, permettant une livraison directe hépatique.

Méthode de Direct segmentaire livraison intra-hépatique L&#39;utilisation d&#39;un modèle hilaire de foie de rat Clamp

Le but de ce manuscrit et protocole est d’expliquer et de démontrer en détail la procédure chirurgicale de transplantation rénale orthotopique chez le rat. Cette méthode est simplifiée pour obtenir la perfusion correcte du rein donneur et raccourcir le temps de reperfusion en utilisant la technique de l’anastomose du brassard veineux et urétral.

Greffe orthotopique de rein de rat: une approche chirurgicale nouvelle et simplifiée

Apprenez la transplantation hépatique orthotopique partielle chez le rat avec reconstruction artérielle. Cette méthode microchirurgicale évalue les dommages hépatocellulaires par dosage de l'alanine aminotransférase sérique.

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique (Vidéo) | JoVE Journal

Interventions chirurgicales pour un modèle de rat de transplantation hépatique orthotopique partielle avec reconstruction artérielle hépatique

Explorer plus de vidéos