Les méthodes de détection quantitative d'anticorps induite par l'activation du complément sur les globules rouges

L’objectif global de l’expérience suivante est d’évaluer l’activation du complément par des anticorps contre les globules rouges ou les globules rouges dans le sérum du patient. Ceci est réalisé en incubant des globules rouges avec le sérum du patient en présence d’anticorps anti-C cinq bloquants pour induire le dépôt de C 4 et C3 à la surface des globules rouges. Ensuite, les globules rouges sont colorés avec des anticorps anti-C quatre et anti-C3 marqués par fluorescence, et la quantité de dépôt de complément sur les globules rouges peut ensuite être analysée par cytométrie en flux dans une méthode alternative.

Les globules rouges sont incubés avec le sérum du patient en l’absence d’anti-C cinq pour induire une lyse médiée par le complément. Le pourcentage de globules rouges lysés peut ensuite être déterminé en mesurant la quantité d’hémoglobine libérée par les cellules par spectrométrie. Le principal avantage de cette nouvelle technique par rapport aux méthodes existantes telles que l’hémolyse ou le test d’antiglobuline utilisées dans les diagnostics de routine est qu’elle est de nature quantitative et que nous pouvons détecter des différences sous-optimales dans l’activation du complément.