Laboratoire Estimation des gains en efficience de transfert net trophiques des congénères de PCB dans le lac Trout ( Salvelinus namaycush) De sa proie

L’objectif général de l’expérience suivante est d’estimer l’efficacité du transfert trophique net des congénères des BPC vers le touladi à partir de ses proies, puis de déterminer si le degré de chloration ou le degré de solubilité lipidique du congénère des BPC a un effet sur son efficacité de transfert trophique net. Pour ce faire, on mène d’abord une expérience en laboratoire au cours de laquelle des touladis sont nourris avec un aliment naturel tel que le blo sur une période d’au moins quatre mois. Dans un deuxième temps, l’extraction et le nettoyage servent à extraire les BPC des tissus du touladi et du blo et à préparer les extraits pour la procédure de quantification.

Ensuite, la chromatographie en phase gazeuse, la spectrométrie de masse utilisant l’ionisation chimique négative est utilisée afin de déterminer les concentrations de congénères en PCB dans les tissus des poissons. Les résultats montrent que l’efficacité du transfert trophique net des congénères des BPC au touladi à partir de ses proies n’est pas affectée de manière significative par le degré de chloration des congénères des BPC. Les résultats montrent également que l’activité du touladi ne semble pas avoir d’effet significatif sur l’efficacité du transfert trophique net.

Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes comme l’injection du contaminant directement dans les poissons du SIV ou dans la nourriture des poissons du SIV, est que le poisson SS accumule le contaminant de la manière qui imite le mieux le processus d’accumulation du contaminant dans le poisson féreux dans son milieu naturel. La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car les étapes de concentration et d’extraction nécessitent un grand soin pour être effectuées correctement. La meilleure façon d’apprendre ces étapes est d’observer visuellement.

La démonstration de cette procédure sera assurée par Jim O’Keefe, un chimiste de mon laboratoire. Tout d’abord, décongelez une quantité appropriée de poissons-proies préalablement stockés dans un congélateur à moins 30 degrés Celsius. Coupez les proies décongelées en morceaux pesant environ un à cinq grammes à l’aide d’un couteau de chef.

Ensuite, pesez la quantité de poissons-proies à placer dans chacun des aquariums et déposez les morceaux dans chaque réservoir. Après avoir laissé les poissons prédateurs se nourrir pendant environ une heure, retirez la nourriture mangée et laissez-la sécher à l’air libre pendant environ 20 minutes. Une fois que la nourriture a été pesée, notez la quantité de nourriture placée dans chaque réservoir et la quantité de nourriture consommée pour chacun des réservoirs.

Après avoir sacrifié et congelé les poissons prédateurs, choisissez un ensemble de composites de prédateurs, de poissons et/ou de poissons-proies pour la décongélation, et laissez les composites décongeler partiellement en utilisant l’homogénéisation de taille appropriée. Chacun des composites. Pour chaque composite, placez un échantillon de 50 à 100 grammes de l’homogénat dans un bocal nettoyé, à l’acétone, rincé et étiqueté.

Après avoir bouché le pot, conservez-le à moins 30 degrés Celsius jusqu’au moment du traitement pour l’extraction. Pesez 20 grammes de tissu de poisson homogénéisé décongelé dans un bécher de 200 millilitres, puis environ 40 grammes de sulfate de sodium et mélangez bien avec une spatule. Ajouter une solution de spicule de substitution contenant les congénères 30, 61, 161 et 166 à une concentration qui donne une concentration finale de 20 nanogrammes par millilitre.

Dans l’extrait. Laisser sécher l’échantillon à température ambiante pendant le mélange Toutes les 20 minutes après que l’échantillon a atteint une consistance de sable sec. Installez un appareil d’extraction soli avec une fiole de 500 millilitres contenant des copeaux d’ébullition en téflon, une chaussette, du sl et un condenseur.

Ajoutez ensuite le mélange de poisson séché dans un dé à coudre en verre avec un fond de disque fritté grossier. Ajouter 150 millilitres d’une solution prémélangée à 50 % d’hexane et à 50 % de chlorométhane dans le bécher utilisé pour l’échantillon et remuer tout en raclant les parois du bécher. À l’aide d’une spatule, transférez le solvant vers le haut du solit, en lui permettant de circuler à travers le solit et dans le ballon.

Après avoir répété l’étape précédente, placez la chaussette éclairée avec la fiole attachée sur un élément chauffant et fixez un condenseur. Ensuite, allumez l’élément chauffant en portant le solvant à ébullition douce. Ensuite, extrayez le solvant pendant au moins 16 heures, en veillant à ce que de l’eau froide soit fournie aux condenseurs.

Une fois le solvant refroidi, vérifiez si l’un des flacons d’échantillon contient de l’eau. Pour les flacons contenant de l’eau, ajoutez du sulfate de sodium et remuez jusqu’à ce que l’eau soit absorbée. Ensuite, concentrez l’échantillon à l’aide d’un concentrateur d’échantillon d’azote.

Une fois que l’échantillon a un volume inférieur à deux millilitres, transférez-le dans une fiole jaugée de cinq millilitres. Ensuite, portez le volume final à cinq millilitres en utilisant cinq à sept petits lavages d’hexane pour transférer l’échantillon résiduel de la verrerie précédente dans la fiole jaugée. À ce stade, transférez l’échantillon dans un flacon de 10 millilitres et étiquetez-le avec les informations de l’échantillon.

Préparez le gel de silice acidifié en ajoutant 44 grammes d’acide sulfurique concentré à 100 grammes de gel de silice activé. Ajoutez ensuite 10 grammes de gel de silice acidifié dans une petite colonne de chromatographie contenant un petit bouchon de laine de verre au fond. Après avoir pré-nettoyé la colonne avec 10 millilitres d’hexane, ajoutez-y un millilitre de l’extrait d’échantillon, éluez la colonne avec 20 millilitres d’hexane et prélevez l’échantillon dans un tube de verre conique de 20 millilitres.

Ensuite, placez le tube de verre sur un évaporateur d’azote ou un appareil NVAP sous un courant d’azote et immergez-le dans de l’eau chaude. Une fois que l’échantillon a été concentré à moins d’un millilitre, transférez-le dans une fiole jaugée d’un millilitre. Amenez ensuite le volume final à un millilitre en utilisant deux à trois petits lavages d’hexane pour transférer l’échantillon résiduel du tube dans la fiole jaugée.

Ensuite, transférez l’échantillon dans un flacon d’échantillonneur automatique de 1,8 millilitre étiqueté avec les informations de l’échantillon. Ajoutez quatre microlitres de l’étalon interne approprié, qui dans ce cas est du fenouil chloro déca dans le flacon. Vous utilisez les étalons appropriés pour étalonner l’instrument.

Ensuite, mettez en place le système de chromatographie et de spectrométrie de masse en mode d’ionisation chimique négative avec de l’hydrogène comme gaz vecteur à un millilitre par minute et du méthane comme gaz réactif. Utilisez une colonne capillaire en silice fondue recouverte de DB XLB à 0,25. Épaisseur de film micrométrique pour la séparation.

Injectez un à deux microlitres de l’échantillon en utilisant le mode d’injection fractionnée. À ce stade, analysez tous les étalons et échantillons par la méthode de l’étalon interne en utilisant du carbone 13 marqué DECA chloro b fenouil. Effectuez une vérification lors de l’étalonnage initial en exécutant un deuxième étalon de source et les flèches Chlore 1242 et 1260, puis comparez les valeurs prévues pour les congénères de la flèche chlore avec les quantités observées dans le cadre de cette procédure de vérification.

Une fois que la procédure d’étalonnage initiale a été effectuée avec succès, terminez l’analyse de tous les échantillons. Effectuez un contrôle d’étalonnage tous les 10 échantillons en utilisant l’un des mélanges d’étalonnage de l’étalonnage initial. Le touladi de Tre a connu une croissance substantielle en tant que touladi de lac initial.

Le poids moyen variait de 694 à 907 grammes, tandis que le poids moyen final du touladi variait de 853 à 1 566 grammes. Les concentrations moyennes de congénères contenant des BPC dans le touladi ont augmenté pendant l’expérience pour tous les congénères contenant des BPC. L’efficacité moyenne du transfert trophique net pour le touladi actif ne différait pas significativement de celle du touladi inactif.

touladi actif a conservé les congénères de BPC de la nourriture qu’il avait consommée avec presque la même efficacité que le touladi inactif pour 66 des 75 congénères contenant des BPC. L’erreur-type concernant l’estimation moyenne de l’efficacité nette du transfert trophique était faible pour six des neuf autres congénères des BPC. Les erreurs-types concernant l’estimation moyenne de l’efficacité du transfert trophique net étaient assez faibles à mesure que le degré de chloration augmentait ; les estimations de l’efficacité du transfert trophique net montraient une légère diminution.

Cependant, l’efficacité nette du transfert trophique ne variait pas de manière significative avec l’augmentation du degré de chloration des congénères des PCB AS log KOW, l’efficacité nette du transfert trophique diminuait de façon exponentielle. Ce taux de déclin était significativement différent de zéro, mais équivalait à 7 % par unité de log Koe. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’estimer l’efficacité du transfert trophique net des congénères CB aux poissons ous à partir de leurs proies à l’aide d’une expérience de laboratoire dans laquelle le poisson est nourri avec un aliment naturel.

N’oubliez pas que travailler avec des solvants organiques tels que l’hexane et le dichlorométhane peut être dangereux et que des précautions telles qu’une ventilation adéquate doivent toujours être prises lors de l’exécution de cette procédure.