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DOI: 10.3791/52239-v
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Nous présentons une procédure expérimentale de développement du biofilm de Candida albicans dans un modèle sous-cutané de souris. Les biofilms fongiques ont été quantifiés en déterminant le nombre d’unités formant des colonies et par une imagerie de bioluminescence non invasive, où la quantité de lumière produite correspond au nombre de cellules viables.
L’objectif global de l’expérience suivante est de valider l’utilisation d’une souche exprimant la luciférase pour la surveillance non invasive de la formation de biofilms in vivo par des cellules de candida albican. Ceci est réalisé en implantant des fragments de cathéter colonisés par une souche exprimant la luciférase de candida albicans dans le dos d’une souris. Au cours de la deuxième étape, la levure est laissée se développer en une épaisse couche de cellules intégrées dans une matrice extracellulaire, générant un biofilm mature à l’intérieur des cathéters.
Ensuite, un substrat est ajouté qui sera converti par l’enzyme luciférase. Cette réaction produit une lumière mesurable L’imagerie bioluminescente ou BLI est ensuite utilisée pour enregistrer et quantifier la formation du biofilm au sein de l’hôte vivant. Le principal avantage de cette technique par rapport à d’autres techniques existantes, telles que le système central Venmo, est que nous pouvons tester jusqu’à six biofilms à l’intérieur d’un animal, réduisant ainsi considérablement le nombre d’animaux dont nous avons besoin pour l’analyse statistique.
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