Modèle murine de la sténose veineuse centrale utilisant la fistule d'Aortocaval avec une stenose sortante

La sténose veineuse centrale peut causer la fistule aortocaval, ou AVF, échec primaire de maturation, aussi bien que l’échec ultérieur dans une fistule de travail. Cette technique utilise une version modifiée d’un modèle avf murin établi qui récapitule le cours clinique de l’AVF humain et est facilement maîtrisé à travers plusieurs étapes critiques. Avant de commencer l’intervention, confirmez un manque de réponse au pincement des orteils chez une souris C57-Black/6 de neuf à 11 semaines et placez la souris dans la position de supination dans la zone chirurgicale.

Appliquez de l’onguent sur les yeux de l’animal et retirez la fourrure du côté ventral du cou vers le bas-ventre. Nettoyez et désinfectez ensuite le site chirurgical avec trois gommages séquentiels de 10 % povidone-iode et 70 % d’isopropanol, et placez un drapé chirurgical sur l’animal. Pour l’exposition au site de pinces et de perforation, placez la souris sous un microscope dissection et, à l’aide d’une technique stérile et d’un scalpel, faites une incision abdominale profonde pour la peau, de la ligne médiane, du bord inférieur du foie à juste au-dessus du pubis.

Couper à travers la musculature avec des ciseaux pour ouvrir la cavité abdominale, et insérer un rétracteur dans l’abdomen. Déplacez les entrailles sur le côté droit et enveloppez-les dans une gaze saline. Déplacez la vessie et les vésicules séminales sur le côté caudal de l’animal, et utilisez un support en micronœil pour disséquer la mésenterie entre le rectum et le rétroperitoneum pour obtenir une vue complète de l’aorte et du véna cava inférieur, ou IVC.

Ensuite, utilisez le support de micronède pour disséquer l’aorte infrarenale et l’IVC en bloc des tissus rétroperitoneals latéraux et dorsal environnants pour croiser les tissus ensemble, et disséquer les tissus environnants pour exposer le site de perforation aortique à environ trois quarts de la distance de la veine rénale gauche à la bifurcation aortique. Pour l’isolement de l’IVC, disséquer entre l’IVC infrarenal et l’aorte immédiatement distal à la veine rénale gauche et étendre la dissection distally à mi-chemin entre la veine rénale gauche et la bifurcation aortique pour l’observation infrarenal postopératoire d’IVC. Faire une fenêtre pour séparer l’IVC de l’aorte, et disséquer l’IVC du tissu environnant.

Ensuite, placez soigneusement un 8-0 suture monofilament polyamide sous l’IVC et l’aorte avant de tirer l’extrémité de suture à travers la fenêtre pour positionner la suture sous l’IVC seulement. Pour créer l’AVF, pliez d’abord une aiguille de calibre 25 à un angle de 45 à 60 degrés à quatre millimètres de la pointe de l’aiguille et serrez l’aorte infrarenale et l’IVC à l’aide d’un clip microchirurgical. Saisir le tissu conjonctif entourant la bifurcation, faire pivoter l’aorte de façon médiocre et caudally pour exposer le site de ponction de l’aorte légèrement étirée vers le côté ventral, et utiliser l’aiguille de calibre 25 pour percer l’aorte dans l’IVC.

Lorsque le tissu a été percé, relâchez l’aorte et tirez vers le haut du côté gauche de l’aorte pour couvrir le site de perforation avec le tissu environnant. Retirez ensuite l’aiguille et appuyez doucement sur le site de perforation à l’aide d’un écouvillon à bout de coton pour l’hémostase. Pour la création de sténose IVC, placez la pointe d’un cathéter intraveineux de calibre 22 longituditinement sur l’IVC et ligatez le cathéter à l’IVC avec un 8-0 Suture.

Lorsque la suture a été placée, retirer le cathéter et confirmer l’hémostase primaire avant de dégriffer l’aorte et l’IVC. Couvrir le site de perforation pendant une autre minute pour s’assurer de l’hémostase, et retourner les organes à leur cavité abdominale avant de fermer l’abdomen avec des sutures 6-0. Placez ensuite la souris dans une cage individuelle sans literie sur un dispositif de soutien thermique avec surveillance jusqu’à la récupération complète, et utilisez l’échographie Doppler pour confirmer la patency de la fistule.

Le septième jour après la procédure chirurgicale, les secteurs de fistule et de sténose de l’IVC sont facilement détectés dans la vue longitudinale. Chez les souris portant une sténose sans AVF, le segment de sténose présente une forme veineuse d’onde avec plus d’élargissement spectral que les souris sham-operated mais sans beaucoup de pulsatility. Chez les souris ayant un AVF ainsi qu’une sténose, le segment de sténose montre une forme d’onde pulsatile en plus de l’élargissement spectral, et la vitesse maximale moyenne du flux à la sténose chez les souris ayant un AVF avec sténose est significativement plus élevée que chez les souris atteintes de sténose seule.

Le diamètre moyen d’IVC à la sténose chez les souris avec la sténose seule est semblable à celui observé chez les souris avec un AVF et une sténose. En outre, en utilisant le segment en amont ou en aval comme référence, la sténose en pourcentage est significativement plus grande chez les souris ayant un AVF en plus d’une sténose. Lorsque vous ligate le cathéter IV et l’IVC ensemble, il est important de les attacher étroitement pour créer une sténose reproductible.

L’application de cette procédure au modèle veineux murin d’implantation de greffe pourrait répondre comment surmonter l’occlusion de la sténose veineuse de greffe.