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DOI: 10.3791/62312-v
Ziyi Hu*1, Tingting Zhou*1, Fangrong Wu1, Fan Lin1,2
1Department of Cell Biology, School of Basic Medical Sciences,Nanjing Medical University, 2Institute for Brain Tumors & Key Laboratory of Rare Metabolic Diseases,Nanjing Medical University; Nanjing Medical University Affiliated Cancer Hospital; Key Laboratory of Human Functional Genomics of Jiangsu Province
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Les cellules souches du gliome (CSC) sont une petite fraction des cellules cancéreuses qui jouent un rôle essentiel dans l’initiation tumorale, l’angiogenèse et la résistance aux médicaments dans le glioblastome (GBM), la tumeur cérébrale primaire la plus répandue et la plus dévastatrice. La présence de CSG rend le GBM très réfractaire à la plupart des agents ciblés individuels, de sorte que des méthodes de dépistage à haut débit sont nécessaires pour identifier des combinaisons thérapeutiques efficaces potentielles. Le protocole décrit un flux de travail simple pour permettre un dépistage rapide de la thérapie combinée potentielle avec interaction synergique. Les étapes générales de ce flux de travail consistent à établir des CSG marqués à la luciférase, à préparer des plaques revêtues de matrigel, à dépister les médicaments combinés, à analyser et à valider les résultats.
Les cellules souches du gliome sont une sous-population de cellules du gliome, qui sont généralement résistantes à la chimiothérapie et à la radiothérapie. Nous avons décrit ici la méthode d’identification rapide des thérapies combinées, ciblant les cellules souches du gliome, au lieu des cellules de gliome différenciées. Par rapport à d’autres méthodes, qui peuvent être laborieuses et compliquées.
Ce protocole est relativement simple et rapide, pour identifier les combinaisons de médicaments potentiellement utiles. Commencez par prélever les cellules souches de gliome ou GSC dans le milieu de culture et centrifugez-les à 70 fois G pendant trois minutes à température ambiante. Après avoir retiré le surnageant, digérez les cellules avec de l’accutase pendant quatre minutes à 37 degrés Celsius.
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