Plateforme de puces microfluidiques cliniques pour l’isolement de cellules tumorales circulantes polyvalentes

Ce protocole décrivait une méthode de dénombrement des cellules tumorales rouges et d’isolement clinique des CTC. Pour commencer, cultivez les cellules tumorales MCF-7, MDA-MB-231 et HeLa dans un flacon de culture cellulaire à une fois 10 à la cinquième dans un millimètre de DMEM, complété par 10% de sérum de veau fœtal et 1% de pénicilline-streptomycine. Incuber les cellules à 37 degrés Celsius avec 5% de dioxyde de carbone.

Lorsque les lignées cellulaires se développent en monocouches adhérentes jusqu’à 95 % de confluence, détachez-les de la boîte de culture avec une solution de trypsine à 0,25 % pendant deux minutes. Colorez les cellules tumorales en ajoutant trois microlitres de Calcein AM et placez la boîte dans l’incubateur pendant 30 minutes. À la fin de l’incubation, digérez toutes les cellules avec de la trypsine.