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Une sonde de fluorescence NIR-II brillante pour l’imagerie vasculaire et tumorale
Une sonde de fluorescence NIR-II brillante pour l’imagerie vasculaire et tumorale
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JoVE Journal Medicine
A Bright NIR-II Fluorescence Probe for Vascular and Tumor Imaging

Une sonde de fluorescence NIR-II brillante pour l’imagerie vasculaire et tumorale

Full Text
2,266 Views
05:51 min
March 17, 2023

DOI: 10.3791/64875-v

Yang Li*1,2, Xue Qiao*1, Xuechuan Hong1,2

1College of Science, Research Center for Ecology, Laboratory of Extreme Environmental Biological Resources and Adaptive Evolution,Tibet University, 2State Key Laboratory of Virology, Key Laboratory of Combinatorial Biosynthesis and Drug Discovery (MOE) and Hubei Province Engineering and Technology Research Center for Fluorinated Pharmaceuticals,Wuhan University School of Pharmaceutical Sciences

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Le présent protocole décrit une opération détaillée d’imagerie par fluorescence NIR-II en temps réel d’une souris à l’aide d’un dispositif d’imagerie optique NIR-II.

L’imagerie vasculaire et tumorale à haute résolution a été réalisée par le nanoprob proche infrarouge à fluorescent, fournissant une méthode précise et efficace pour diriger les maladies vasculaires et le cancer. L’imagerie in vivo dans la fenêtre NIR-II, qui nous permet d’examiner en profondeur le sujet vivant, offre des opportunités pour la recherche biomédicale et nos applications cliniques. Préparez-vous à l’imagerie proche infrarouge II ou NIR-II en plaçant du carton noir disponible dans le commerce au centre du support de l’appareil d’imagerie.

Ensuite, placez l’échantillon sur le carton noir, de sorte qu’il soit au centre du support. Après avoir sélectionné le filtre approprié, effectuez le réglage de la hauteur de la plate-forme. Appuyez longuement sur l’option de plate-forme vers le haut sur l’interface de l’écran tactile de la zone de contrôle de la console porteuse pour la déplacer vers le haut.

Et appuyez longuement sur la plate-forme pour la déplacer vers le bas. Après avoir synthétisé le colorant NIR-II HLY1, préparer les points HLY1 par la méthode de nanoprécipitation en utilisant DSPE-PEG-2K comme matrice d’encapsulation. Pour ce faire, placez un bécher contenant une solution de 10 milligrammes de DSPE-PEG-2K dans neuf millilitres d’eau pour la sonication à 25 degrés Celsius.

Ensuite, dissoudre un milligramme de HLY1 dans un millilitre de tétrahydrofurane ou THF. Et ajoutez lentement la solution dans la solution aqueuse DSPE-PEG-2K en cours de sonication. Par la suite, éliminer le THF du mélange par dialyse.

Après avoir concentré la solution ci-dessus par centrifugation avec ultrafiltration à 7, 100 g pendant 10 minutes, placez-la dans un réfrigérateur à quatre degrés Celsius pour une utilisation ultérieure. Pour l’imagerie in vivo, injectez les points HLY1 par voie intraveineuse dans les souris anesthésiées. Et trois minutes plus tard, procédez à l’imagerie par fluorescence NIR-II des vaisseaux sanguins de tout le corps des souris à l’aide d’un système d’imagerie optique NIR-II.

Concentrez-vous davantage sur la tête de la souris pour recueillir l’imagerie vasculaire cérébrale. Réglez les paramètres de l’instrument du système d’imagerie optique NIR-II à 90 milliwatts par centimètre carré et laser de 808 nanomètres. Collectez les images cinq minutes après l’injection de points HLY1 chez la souris et traitez les données à l’aide du logiciel ImageJ.

L’intensité de fluorescence de HLY1 dans la solution à 90% de THF contenant 90% d’eau était cinq fois supérieure à celle de la solution de THF, indiquant une caractéristique importante d’émission induite par agrégation ou d’AIE de HLY1. Les points HLY1 émettaient de forts signaux fluorescents sous un filtre passe-bas ou LP de 1 500 nanomètres, établissant leur aptitude à l’imagerie NIR-IIb. La longueur d’onde maximale d’absorption et d’émission des points HLY1 était de 740 nanomètres et 1 040 nanomètres, respectivement.

De plus, la taille hydrodynamique des points HLY1 a été déterminée à 145 nanomètres par diffusion dynamique de la lumière. Chez les souris administrées avec des points HLY1, les vaisseaux cérébraux et les microvaisseaux du membre postérieur ont été clairement identifiés par imagerie NIR-II sous un filtre LP de 1 500 nanomètres. En outre, les quatre tumeurs T1 des souris porteuses de tumeurs étaient également clairement visibles par imagerie NIR-II, indiquant la perméabilité et la rétention améliorées ou l’effet EPR des points HLY1.

Tous ces résultats suggèrent que les points HLY1 sont une sonde de fluorescence NIR-II brillante applicable à l’imagerie vasculaire et tumorale. La préparation de la nanosonde suspension à l’eau sous l’imagerie in vivo et par fluorescence NIR-II est la partie la plus importante de la procédure.

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