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Analyse de la formation de complexes protéiques à des concentrations micromolaires par couplage d...
Analyse de la formation de complexes protéiques à des concentrations micromolaires par couplage d...
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JoVE Journal Biochemistry
Analysis of Protein Complex Formation at Micromolar Concentrations by Coupling Microfluidics with Mass Photometry

Analyse de la formation de complexes protéiques à des concentrations micromolaires par couplage de la microfluidique avec la photométrie de masse

Full Text
2,992 Views
06:39 min
January 26, 2024

DOI: 10.3791/65772-v

Myndert Claasen1, Zornitsa Kofinova1, Matteo Contino2, Weston B. Struwe3,4

1Refeyn Ltd., 2Adaptix Ltd., 3Physical and Theoretical Chemistry Laboratory, Department of Chemistry,University of Oxford, 4The Kavli Institute for Nanoscience Discovery,University of Oxford

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole combine la photométrie de masse avec un nouveau système microfluidique pour étudier les interactions protéine-protéine de faible affinité. Cette approche est basée sur la dilution rapide de complexes hautement concentrés en solution, ce qui permet des mesures de faible affinité et élargit l’applicabilité de la photométrie de masse.

Ce protocole démontre une toute nouvelle façon d’analyser les complexes protéiques de faible affinité. Il permet aux chercheurs de détecter et de caractériser certaines interactions protéiques même lorsqu’elles sont faibles ou transitoires, ce qui était généralement très difficile, voire impossible, auparavant. Les interactions protéiques sont cruciales pour le fonctionnement cellulaire, mais leur détection et leur mesure peuvent être difficiles.

La photométrie de masse est un excellent outil pour quantifier la formation de complexes protéiques, mais elle a des limites avec des échantillons dilués. Nous résolvons ce problème avec MassFluidix. L’écart de recherche que nous abordons est de savoir comment les scientifiques peuvent caractériser de manière fiable les interactions de faible affinité entre les protéines en solution.

Les avantages de notre approche sont qu’elle vous permet de rechercher des interactions protéiques faibles en solution sans avoir besoin de marqueurs ou d’immobilisation. Ainsi, les chercheurs peuvent observer les protéines d’intérêt et la façon dont elles interagissent sans craindre qu’elles ne perturbent le système qu’ils examinent.

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Ce mois-ci dans JoVE numéro 203 Microfluidique photométrie de masse interactions protéine-protéine de faible affinité anticorps IgG récepteur Fc néonatal

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