Un test de préférence olfactive pour mesurer les biais hédoniques olfactifs dans des modèles murins de dépression

Un biais négatif dans le traitement émotionnel est une caractéristique majeure des troubles dépressifs. Ce biais est particulièrement intéressant pour mieux comprendre la physiopathologie de la maladie. Ici, nous proposons un protocole pour l’évaluation fiable de la valeur des odeurs innées en utilisant des odeurs associées à diverses valences dans des modèles murins masculins et féminins de dépression.

L’évaluation du biais hédonique dans les modèles murins est essentielle, à la fois pour mieux évaluer le phénotype dépressif induit, et aussi comme outil pour étudier les mécanismes neuronaux à l’origine de ces changements dans l’attribution de la valence. Dans l’ensemble, ce protocole offre de nouvelles avenues pour la recherche translationnelle afin de comprendre le mécanisme sous-jacent à la dépression et l’efficacité du traitement. À l’avenir, nous tenterons de déchiffrer les circuits cérébraux à l’origine de ces processus émotionnels perturbés et des mécanismes potentiellement spécifiques au sexe, ainsi que l’action des antidépresseurs sur ces voies.

Pour commencer, préparez le dispositif expérimental à l’aide d’une arène à deux compartiments de 45 centimètres sur 50 centimètres sur 25 centimètres avec des parois en plexiglas gris et un sol blanc. Divisez l’arène en deux compartiments égaux de 25 centimètres sur 45 centimètres, à l’aide d’un mur en plexiglas gris mesurant 37 centimètres sur 25 centimètres. Fixez la boîte de Pétri perforée avec de l’adhésif et placez-la au bas de la paroi dans chaque compartiment.

Ensuite, utilisez un adhésif double face ou Blu Tack pour fixer chaque boîte de Pétri verticalement sur le mur de l’arène. Ensuite, positionnez une caméra à deux mètres au-dessus de l’arène pour enregistrer le comportement des animaux et permettre le suivi automatique de leurs mouvements tout au long de l’expérience. Divisez maintenant les souris en au moins deux groupes expérimentaux, les souris témoins et les souris du groupe test.

Transférez chaque souris dans la salle de test comportemental 30 minutes avant le début de l’expérience. À l’aide d’un luxmètre, réglez l’éclairage de l’arène à environ 40 lux et vérifiez que l’éclairage est uniformément réparti. Ensuite, ajoutez un papier filtre propre de 42,5 millimètres dans chacune des deux boîtes de Pétri de l’arène.

Le premier jour, placez doucement toutes les souris de la même cage dans l’arène pendant 10 minutes pour réduire la néophobie. Le jour du test, préparez dans un flacon en verre l’odeur sous une hotte chimique, en utilisant la dilution correcte. Diluez l’odorant dans de l’huile minérale ou de l’eau distillée en fonction de ses propriétés chimiques.

Juste avant de tester chaque souris, utilisez une micro-pipette avec un embout filtrant pour recueillir 200 microlitres de solution odorante sous le capot. Versez la solution sur le papier filtre dans l’une des boîtes de Pétri. Laissez le deuxième papier filtre dans l’autre boîte de Pétri non traité.

Transférez les boîtes de Pétri dans la salle de test. Ensuite, fixez-les verticalement sur le mur de l’arène. Placez chaque souris individuellement dans l’arène au centre entre les deux compartiments.

Enregistrez le comportement pendant 10 minutes à l’aide de la caméra aérienne. Retirez la souris de l’arène après la fin de la période d’observation. Retirez la boîte de Pétri odorante de l’arène.

Nettoyez ensuite l’arène à l’aide d’une solution désinfectante à 70 % d’éthanol et séchez-la soigneusement. Jetez le papier filtre usagé et préparez le prochain échantillon d’odeur pour la prochaine souris. Utilisez un logiciel de suivi automatique pour enregistrer la position de la souris tout au long du test.

Définissez des zones distinctes dans l’arène pour l’analyse. Pendant l’habituation, toutes les souris ont passé au moins 50 secondes dans les zones d’odeur et de contrôle, ce qui indique un engagement adéquat dans la tâche. Il est important de noter que les souris exposées à l’UCMS ont passé le même temps dans la zone d’odeur que les témoins.

Bien qu’une certaine différence ait pu être observée dans d’autres zones. Les souris femelles témoins se déplaçaient significativement plus que les femelles UCMS lorsqu’elles étaient exposées à l’urine mâle, mais pas pendant l’accoutumance ou l’exposition au TMT. Toutes les lectures de la réponse hédonique montrent des différences significatives ou une tendance statistique entre les femelles témoins et UCMS.

Cet effet est également visible à travers l’indice mondial d’exploration des odeurs, qui est une mesure combinée de la réponse hédonique et locomotrice. L’indice d’exploration des odeurs est positivement corrélé avec le score d’émotivité pour l’urine mâle et le TMT chez les souris femelles. Chez les souris mâles, aucune différence n’a été observée au cours de l’habituation ou de la distance totale parcourue au cours de l’essai.

Le temps passé dans la zone olfactive montre une réduction significative de l’exploration de l’urine féminine et du TMT chez les UCMS par rapport aux témoins. Les souris UCMS entrent beaucoup moins dans la zone d’odeur, ou ont tendance à le faire, et présentent un indice de préférence significativement réduit pour l’urine féminine et le TMT. L’indice d’exploration des odeurs montre une réponse comportementale négativement modifiée à l’urine femelle et au TMT des souris UCMS par rapport aux témoins, qui ont tendance à être positivement corrélées avec le score d’émotivité de l’animal.