הדמיית פאזה כמותית תלת מימדית לאפיון תת-סוגים של לימפוציטים

טען תרחיף תת-סוג לימפוציטים לתוך תא הדמיה.

מקם את החדר על שלב מיקרוסקופ הדמיית הפאזה הכמותית התלת מימדית.

התאם את פרמטרי המיקרוסקופ ואת מישור המוקד להדמיה אופטימלית.

במהלך הדמיית לימפוציטים, קרן הלייזר מתפצלת לקרני ייחוס ודגימה.

מכשיר המיקרו-מראה הדיגיטלי, הכולל מערך מיקרו-מראה בנתיב קרן הדגימה, מאפשר לקרן להסתובב 360 מעלות סביב הציר האופטי.

כל קרן העוברת דרך הלימפוציט עוברת שינוי פאזה המבוסס על שינויים במקדם השבירה בתוך התא.

הדגימה המתקבלת ואלומות הייחוס מתאחדות מחדש ויוצרות הולוגרמה דו-ממדית.

רצף של הולוגרמות המכילות מידע פאזה ומשרעת מזוויות שונות נלכד באמצעות סיבוב הקרן סביב הלימפוציטים.

רכוש הולוגרמות רקע מרובות עם זוויות תאורה משתנות, למעט לימפוציטים.

באמצעות אלגוריתם טומוגרפיית העקיפה, שחזר את ההולוגרמות לטומוגרפיה תלת מימדית של מקדם שבירה, המספק מידע מורפולוגי וביוכימי של לימפוציטים ללא צורך בתיוג.

להדמיה אופטימלית, יש לדלל כל דגימת תא לריכוז של 180 תאים למיקרוליטר של מדיום RPMI, ולהזריק לאט 120 מיקרוליטר מהדגימה המדוללת הראשונה לתא הדמיה. לאחר אישור היעדר בועות בתוך החדר, הנח טיפת מים מזוקקים על עדשת האובייקט של מיקרוסקופ פאזה כמותי תלת מימדי, והנח את תא ההדמיה על שלב התרגום של המיקרוסקופ. כוונן את ה-stagה כך שהדגימה תתיישר עם עדשת המטרה, ולחץ על פוקוס ומשטח בלשונית כיול של