הדמיית חלבון קינאז פעילות בעכבר באמצעות מיקרוסקופ הדמיה לכל החיים של פלואורסצנטי דו-פוטוני

0 צפיות • 6:37 דק׳ • May 29th, 2025

אבטח עכבר מורדם עם חלון גולגולת מעל קליפת המוח המוטורית שלו על הליכון.

העכבר מבטא מדווח חלבון קינאז-A בתאי עצב בקליפת המוח.

מקם את ההליכון מתחת למטרת FLIM של שני פוטונים.

הוסף טיפת מים בין המטרה לחלון הגולגולת.

אפשר לעכבר להתעורר ולהתאקלם בהליכון.

באמצעות תאורת שדה בהיר, אתר את אזור ההדמיה. סגור את מארז המיקרוסקופ כדי לחסום אור חיצוני.

הגדר את פרמטרי ההדמיה, התחל סיבוב הליכון כדי לגרום לתנועה והתחל בהדמיה.

תנועה כפויה מפעילה PKA, שמזרחן את המדווח, ומקרב את התורם והמקבל שלו פלואורופורים.

המיקרוסקופ מכוון לייזר אינפרא אדום, מעורר את התורם להעביר אנרגיה למקבל, ומפחית את חיי הקרינה של התורם.

כאשר התנועה נפסקת, PKA והמדווח חוזרים למצבם הלא פעיל, מפחיתים את העברת האנרגיה ומגדיל את חיי הקרינה של התורם.

נתח את התמונות כדי להשוות את רמות ה-PKA בקליפת המוח בזמן מנוחה ותנועה.

לפחות שבועיים לאחר התקנת חלון הגולגולת, הגדר את אורך הגל של לייזר עירור שני פוטונים ל-960 ננומטר ואשר חוסר תגובה לצביטה בבוהן בעכבר הניסוי המורדם הנח את העכבר המורדם על ההליכון הממונע והתקן את לוחית הראש של העכבר למחזיק לוחית הראש של מערך ההליכון. נקה את פני השטח של כיסוי חלון הגולגולת עם 70% אתנול והנח את ההליכון הממונע מתחת למטרה 2pFLIM.

מרחו טיפת מים מזוקקים בין כיסוי חלון הגולגולת במטרה, ואפשרו לעכבר להתעורר ולהתאקלם בסביבת ה

צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים

התחברות

גלה סרטונים נוספים

FLIM דו-פוטוני