Murine ניסיוני דגם של התפתחות גידולים מקורית גרור הצפק דרך Orthotopic הרכבה עם קרצינומה של תאי השחלות

המטרה הכוללת של הליך זה היא לצפות בהתפתחות של היווצרות גידול מקורי וגרורתי בקרצינומה של שחלות אפיתל. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הגינקולוגי האונקולוגי, כגון הבנת הביולוגיה של הגידול או דפרמנטציה של הצפק. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שחיסון אורוספטי של קרצינומה של שחלות אפיתל אנושי, או תאי EOC, מבוצע באמצעות גישה רטרופריטונאלית שגדלה עם צד גבי. כדי להכין קו תאי קרצינומה של תאים שקופים בשחלות אנושיות, צלחת ותחזק תאי ES2 במדיום RPMI-1640 עם 10% FBS ו-PenStrep ב-37 מעלות צלזיוס, ו-5% CO2. בשלב הצמיחה הלוגריתמית, הסר את המדיום הישן מהתרבית והשתמש בשלושה עד ארבעה מילימטרים של PBS כדי לשטוף את התאים פעם אחת. לאחר מכן, הוסף מילימטר אחד של טריפסין/EDTA ונדנד את הכלי כדי לכסות את כל השכבה החד-שכבתית. הסר והשליך את תמיסת הטריפסין והחזיר את התאים לחממה למשך שלוש עד חמש דקות. לאחר בחינת התאים במיקרוסקופ כדי לוודא שהתאים התנתקו וצפים, הוסיפו חמישה מילימטרים של מצע גידול טרי המכיל סרום כדי לנטרל את הטריפסין ולהשעות מחדש את התאים לפני העברתם לצינור חרוטי בקוטר 15 מילימטר. צנטריפוגה המתלה ב 300 פעמים G וטמפרטורת החדר