December 9th, 2016
כדי להבהיר את תהליך רב שלבי של הפצת הצפק של קרצינומה השחלות, המחקר הנוכחי מציג מודל ניסיוני בעכברים של התפתחות גידולים המקורי וגרורות הצפק באמצעות חיסון orthotopic עם תאים סרטניים אלה.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לצפות בהתפתחות של היווצרות גידול מקורי וגרורתי בקרצינומה של שחלות אפיתל. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום הגינקולוגי האונקולוגי, כגון הבנת הביולוגיה של הגידול או דפרמנטציה של הצפק. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שחיסון אורוספטי של קרצינומה של שחלות אפיתל אנושי, או תאי EOC, מבוצע באמצעות גישה רטרופריטונאלית שגדלה עם צד גבי. כדי להכין קו תאי קרצינומה של תאים שקופים בשחלות אנושיות, צלחת ותחזק תאי ES2 במדיום RPMI-1640 עם 10% FBS ו-PenStrep ב-37 מעלות צלזיוס, ו-5% CO2. בשלב הצמיחה הלוגריתמית, הסר את המדיום הישן מהתרבית והשתמש בשלושה עד ארבעה מילימטרים של PBS כדי לשטוף את התאים פעם אחת. לאחר מכן, הוסף מילימטר אחד של טריפסין/EDTA ונדנד את הכלי כדי לכסות את כל השכבה החד-שכבתית. הסר והשליך את תמיסת הטריפסין והחזיר את התאים לחממה למשך שלוש עד חמש דקות. לאחר בחינת התאים במיקרוסקופ כדי לוודא שהתאים התנתקו וצפים, הוסיפו חמישה מילימטרים של מצע גידול טרי המכיל סרום כדי לנטרל את הטריפסין ולהשעות מחדש את התאים לפני העברתם לצינור חרוטי בקוטר 15 מילימטר. צנטריפוגה המתלה ב 300 פעמים G וטמפרטורת החדר
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מחקר זה מציג מודל ניסוי מורינתי כדי להבהיר את תהליך הריבוי השלבי של התפשטות צפקית של סרטן השחלות. המודל כולל חיסון אורתוטופי של תאי גידול כדי לחקור התפתחות הגידול המקורית ואת ההתמטזה הצפקית הבאה.