16 בדצמבר 2017
בין השתלת איברים מוצקים בטן, שתלי הלבלב נוטים לפתח איסכמיה חמורה פגיעה reperfusion שתל פציעה-הקשורים נזק, המוביל בסופו של דבר לירידה שתל מוקדם. פרוטוקול זה מתאר מודל של השתלת לבלב מאתר באמצעות טכניקה ללא תפר השרוול, אידיאלי עבור ניתוח נזקים אלה מוקדם, ברישול.
שמי בנו קרדיני, ממעבדת המחקר ע"ש דניאל סברובסקי במחלקה לניתוחי קרביים, השתלות וחזה של האוניברסיטה הרפואית אינסברוק. היום אנו הולכים להראות לכם דגם עכבר להשתלת לבלב בטכניקת שרוול שונה. להרדים את בעל החיים התורם בזריקה תוך-צפקית של קטמין וקסילזין, ולגלח את אזור הבטן.
לאחר מכן הנח את הנמען על שדה ניתוחי במצב שכיבה, ושפשף את אזור הניתוח שלוש פעמים עם כלורהקסידין. כעת, בצע לפרוטומיה בקו האמצע מאזור הערווה ל-xiphoid והגדל את החתך תת-עלותי לשני הצדדים כדי לקבל תצוגה טובה יותר על השדה הניתוחי. לאחר מכן יש להוציא את הקרביים לצד שמאל, ולהזריק הפרין לתוך הווריד הנבוב האינפרא-כליה.
בשלב הבא, זהה את אבי העורקים הבטני הפרוקסימלי לחציית וריד הכליה השמאלי, ערער את אבי העורקים וקשר אותו בנקודה זו. כעת, עברו להילום הכבד, זהו ונתחו את צינור המרה המשותף קרוב לכבד, וקשרו אותו קרוב ללבלב. לבסוף, חצה את צינור המרה המשותף מעל הקשירה.
לאחר מכן, נתח את וריד הפורטל קרוב לכבד כדי להשיג אורך מספיק לאנסטומוזיס ורידי. כטיפ, השאירו חתיכת כבד קטנה על וריד הפורטל לזיהוי קל יותר מאוחר יותר. לאחר מכן, ערער את וריד הכליה השמאלי ברקמה הפריאאורטית וקשר אותו.
לאחר מכן חצו את וריד הכליה ואת הרקמה הפריאורטית, והישארו בצד ימין של הקשירה. לאחר מכן, נתח בצורה בוטה את אבי העורקים הבטני מתא המטען של הצליאק לסרעפת, ערער את אבי העורקים קרוב לסרעפת וחצה אותו בנקודה זו. לאחר מכן, זהה וקרש את כל ענפי המותניים והעביר אותם.
כעת חצו את אבי העורקים מתחת לקשירה שהוגדרה קודם לכן. כעת חלחלו את הלבלב דרך כתם אבי העורקים בתמיסת זלוף קרה כקרח עד שתראו שפכים יוצאים מווריד הפורטל. בחלק העליון אתה יכול לראות את וריד הפורטל המועבר ומתחת לאבי העורקים המעוותים.
כעת החליפו את הקרביים לחלל הצפק והפרידו את הלבלב מהמעי בהדרגה, באמצעות 8-0 קשירה משי. החל מהאזור הפוסטפילורי מערער את התריסריון פעמיים ומושך 8-0 קשירת משי דרכו. ואז לקשור אותו ולהפריד בחדות את הלבלב מהתריסריון.
גישה זו מבוצעת שוב ושוב עד שמגיעה לרצועה של טרייץ. חיוני לא לפגוע בתריסריון מכיוון שהוא לא יכלול את השתל מהניסויים עקב זיהום אפשרי. לאחר שהלבלב הופרד לחלוטין מהתריסריון, עברו אל המזנטריום, ערערו אותו וקשרו אותו ואז חתכו אותו.
באנלוגיה לשלבים הקודמים, הפרד את הלבלב מהמעי הגס הרוחבי על ידי ערעורו, קשירתו ולבסוף העברתו. כעת באותה גישה, הפרד את הלבלב מאזור המרה על ידי ניתוחו בחדות לאחר הקשירה. לאחר מכן, נתחו את הלבלב מהקיבה.
זהה את עורק הקיבה השמאלי, קשר אותו וחצה אותו. בסוף, הסר את הלבלב עם הטחול המצורף והכניס אותו לתמיסת רפרפוזיה קרה כקרח עד להשתלה נוספת. השתמש בטחול כידית.
באנלוגיה לתורם, יש להרדים את בעל החיים המקבל בהזרקה תוך-צפקית של קטמין וקסילזין ולגלח את אזור צוואר הרחם. לאחר מכן הניחו את החיה התורמת על השדה הניתוחי במצב שכיבה ושפשפו את אזור צוואר הרחם שלוש פעמים עם כלורהקסידין. לאחר מכן, בצע חתך בעור מהחתך הצווארי לזווית הלסת התחתונה הימנית.
לאחר מכן, זהה את כל הענפים הרוחביים של וריד הצוואר החיצוני הימני, גייס אותם, ערער אותם וחלק אותם לאחר קרישה דו קוטבית. לאחר מכן, אחזו בקוטב התחתון של הבלוטה התת-לסתית הימנית, הרימו אותה בגולגולת ונתחו אותה לאחר קרישה דו קוטבית של כלי ההזנה שלה. כעת יש לחצות את כל הענפים המדיאליים של וריד הצוואר החיצוני הימני לאחר קרישה דו קוטבית.
קשרו את וריד הצוואר החיצוני פעמיים בגולגולת ככל האפשר וחלקו אותו בין קשירה. העבירו את הקצה הפרוקסימלי של וריד הצוואר החיצוני דרך שרוול פוליאתילן. כאן חשוב שידית השרוול תפנה למנתח המנתח.
כשלב הבא, הנח את המהדק הוורידי המיקרו-וסקולרי המגיע מהצד הרוחבי. כעת הרטיבו את הווריד בהפרין, הסירו את הקשירה ומשכו בעדינות את הווריד מעל שרוול הפוליאתילן. בסוף, תקן את הווריד מעל השרוול בעזרת מעגל 8-0 קשירת משי עם קשר אחד מאחור ושלושה מלפנים.
כדי לקבל גישה לעורק הצוואר המשותף הימני, גייס וחצה את שריר הסטרנוקלידומסטואיד הימני לאחר קרישה פרוקסימלית ודיסטלית. לאחר מכן, גייסו בעדינות את עורק הצוואר המשותף, והקפידו לא לפגוע במבנים הסמוכים כמו עצב הנרתיק. באנלוגיה לווריד, קשרו את עורק הצוואר המשותף פעמיים, בצורה גולגולתית ככל האפשר, וחלקו אותו בין קשירה.
כעת העבירו את הכלי דרך השרוול העורקי. לבסוף, תקן את השרוול העורקי עם המהדק המיקרו-וסקולרי, המגיע מהצד המדיאלי. לאחר מכן, הסר את הקשירה והרחיב את לומן העורק באמצעות מרחיבי כלי דם.
לאחר הרחבה מספקת של הלומן, משוך את העורק מעל השרוול העורקי. בסוף, באנלוגיה לווריד, תקן את העורק עם 8-0 קשירת משי. כאן ניתן לראות את הווריד והעורק מתוקנים עבור אנסטומוזיס ורידי עורקי.
לצורך ההשתלה, הנח את השתל על אס לח באזור צוואר הרחם. לאחר מכן, משוך את וריד הפורטל דרך 8-0 לולאת קשירה משי, קצר את הווריד לאנסטומוזה נטולת מתח ולאחר מכן משוך את וריד הפורטל מעל השרוול הוורידי. לבסוף, תקן את הווריד במעגל 8-0 קשירת משי.
באנלוגיה לווריד, העבירו את גדם אבי העורקים דרך לולאת קשירה וקצרו את אבי העורקים. לאחר מכן, משוך את אבי העורקים מעל השרוול העורקי ולבסוף תקן אותו בסיבוב 8-0 קשירת משי. לפני הזלוף יש לזהות את כלי הטחול ולקשור אותם ולבסוף לנתח אותם בחדות ולהסיר את הטחול.
לצורך זלוף מחדש, הסר תחילה את המהדק הוורידי, ואחריו את המהדק העורקי. רפרפוזיה נאותה של השתל מראה פעימה גלויה של העורק וצבע ורדרד של השתל כולו. הרטיבו את השתל בתמיסת מלח נורמותרמית.
לפני סגירת הפצע, הסר את ידית השרוול הוורידי כדי למנוע כיווץ של הכלי. בסוף, סגרו את הפצע בתפר ריצה 6-0 והזריקו 0.5 מיליליטר מי מלח נורמותרמיים תת עורית. כדי לאמת את המודל, בדקנו את התפקוד האנדוקריני של הלבלב המושתל.
עכברים הפכו להיפוגליקמיה על ידי טיפול מקדים בסטרפטוזוטוצין ארבעה ימים לפני הניתוח ונחשבו להיפוגליקמיה אם רמות הגלוקוז בדם היו מעל 300 מיליגרם אחוז. צילום קו זה מראה את רמות הגלוקוז בדם של עכברי ביקורת חיים שלא הושתלו באדום, כמו גם של מושתלים שלא נחשפו לזמן איסכמיה קרה ממושך בכחול. בנוסף, רמות הגלוקוז בדם של מושתלי שתלי לבלב שנחשפו לזמן איסכמיה קרה של 16 שעות מוצגות בירוק.
עכברים חיים נותרו עם היפוגליקמיה לאורך כל תקופת התצפית. לעומת זאת, השתלת שתלי לבלב שלא נחשפו לזמן איסכמיה קרה ממושך הביאה לגליקמיה תקינה תוך 24 שעות, מה שאישר את התפקוד האנדוקריני של השתל. השתלת שתלים שנחשפו לזמן איסכמיה קרה של 16 שעות לא החזירה את הגליקמיה התקינה למושתלים.
יתרה מכך, בקבוצה זו היה צורך להקריב את כל העכברים תוך 48 שעות עקב פגיעה באיסכמיה רפרפוזיה הקשורה לנזק מוקדם להשתלה. בסרטון זה הצגנו שיטה להשתלת לבלב בעכברים בטכניקת שרוול ללא תפרים. זה אפשרי מבחינה טכנית ומיקרוכירורגית עם שיעורי הצלחה מצוינים.
עם זאת, בהתחשב בפיברוזיס הפרוגרדינטי של הלבלב, עקב חסימת הצינורות, אנו סבורים כי מודל זה מתאים ביותר לתחומי מחקר המתמקדים בנזק השתל הקשור לפגיעה באיסכמיה מוקדמת יותר.
מאמר זה מציג פרוטוקול מפורט למודל של השתקת לבלב בעכברים, המשתמש בטכניקת cuff ללא תפרים. שיטה זו שימושית במיוחד לחקר פגיעת איסכמיה-reperfusion והשפעתה על חיוניות הש transplanted graft.
פרוטוקול זה מאפשר השתלה הדירה של לבלב עכברי בשיעורי הצלחה גבוהים, התומכת במחקרים מכניסטיים של פגיעה מרפיונה-פרפוזיה (ischemia-reperfusion injury) בכשל של הש transplanted. טכניקת ה-cuff ללא תפרים מפחיתה סיבוכים תרומבוגניים, ובכך משפרת את הפתוחות ואת המהימנות להערכה פרה-קלינית של אסטרטגיות לשימור הש transplanted. היא מספקת פלטפורמה ניתנת להרחבה לתיקוף יעדים בביולוגיה של השתלות, ובמיוחד עבור מנגנוני פגיעה מוקדמים בש transplanted.
שיטה זו משתלבת ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה ועד לזיקוק מודלים פרה-קליניים, ומאפשרת באופן ספציפי הערכה של אסטרטגיות לשימור שתלים כלי דם לפני זיהוי המולקולה המובילה.