Name: מודל עכבר כריתה אורתוטופי של סרטן הלבלב (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-24T14:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 17 s
Description: חקור מודל כירורגי אורתוטופי לכריתת סרטן הלבלב בעכברים. שיטה זו משלבת השתלה אורתוטופית עם טכניקת כריתה בטוחה לבדיקת טיפולים אדג'ובנטיים וניאו-אדג'ובנטיים במחקר אונקולוגי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים קיבלו תמיכה מהקרן לסרטן הלבלב אבנר.

כל ההליכים אושרו על ידי ועדת האתיקה והטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת ניו סאות' ויילס (17/109A). עכברי עירום אתמיים נקבה Balb / c, בגילאי 8-10 שבועות במשקל 16-19 גרם, שימשו עבור פרוטוקול זה. עכברים שוכנו בכלובי מיקרו מבודדים והאכילו מזון כדורי זמין מסחרית וליביטום מודעתמים .
1. השתלת סרטן הלבלב אורתוטופי
<ol><li>הכינו את התאים להשתלה. ראשית, לחשב את מספר התאים הדרושים עבור ההליך (1 x 106 לוציפראז מתויג AsPC-1 תאים ו 1 x 10 6 תאים כוכביהלבלב האנושי הקשורים לסרטן [CAhPSCs] נדרשים עבור כל בעל חיים).<ol>
<li>לשמור על תאים אלה באינקובטור CO2 מבוקר טמפרטורה לחות ולבצע בדיקות מיקופלסמה שגרתיות. מדיום התרבות המשמש עבור AsPC-1 ו- CAhPSCs הם RPMI 1640 (עם 300 מ"ג / L-גלוטמין, סרום שור עוברי 20% v/v, 1% v/v פניצילין/סטרפטומיצין) ו- IMDM (עם 4 מ"מ L-גלוטמין, סרום שור עוברי 10% v/v, 1% v/v פניצילין/סטרפטומיצין).</li>
		<li>השתמש בטכניקות סטנדרטיות של תרבית תאים כדי לנסות להפוך את התאים להשעיית תאים. לנטרל את טריפסין באמצעות מדיום התרבות המלאה בהתאמה בנפח כפול מזה של פתרון טריפסין בשימוש.</li>
		<li>לשטוף תאים אלה פעמיים עם מלוחים אגירה פוספט (PBS) ו resuspend לתוך תערובת המכילה 1 x 106 AsPC-1 תאים ו 1 x 106 CAhPSCs בהשעיית תא 50 μL.</li>
		<li>שמור את ההשעיה על הקרח עד לשימוש.</li>
	</ol></li>
	<li>הכינו ארון ביו-רווי מדרגה 2 להליך. השתמש מחצלת חימום מכוסה וילון פלסטיק סטרילי. להגדלה במהלך ההליך, השתמש בזוג זכוכית מגדלת כירורגית 2.5x עד 3.5x.</li>
	<li>הכן ספוגיות ארנק-מחרוזת על ידי חיתוך חור, 1 ס"מ קוטר, לתוך ספוגית גזה. אבטחו את החור הזה עם תפר ארנק-מחרוזת. כל תפר קלוע עדין יכול לשמש לכך (למשל, 5/0 תפר חומצה פוליגליקולית). חומר תפר קלוע מומלץ כפי שהוא מאפשר את הקשר רופף להישאר במקום לאחר הידוק. כך מתואר באיור 1א.</li>
	<li>הרדמה את העכבר עם 80 מ"ג/ק"ג קטמין ו 10 מ"ג/ קילוגרם של xylazine על ידי הזרקה תוך-אישית.</li>
	<li>ניהול 5 מ"ג/ק"ג טיפול מונע אנטיביוטי enrofloxacin, 2.5 מ"ג /ק"ג משככי כאבים flunixin ו 1 מ"ל של 0.9% מלוחים תת עורית.</li>
	<li>לאחר הרדמה, מניחים את העכבר על השדה סטרילי במצב סופי ולהחיל povidone-יוד ואחריו 70% אתנול להכנת העור.</li>
	<li>בצע חתך אורך בעור של הרביע הגולגולתי השמאלי של הבטן, ולאחר מכן להיכנס לבטן על ידי חרפה של שכבת השרירים בין מלקחיים.</li>
	<li>טען מזרק אינסולין 29 G עם 50 μL של השעיית תאים–זה משווה 1 x 106 CAhPSCs ו 1 x 106 לוציפראז מתויג AsPC-1 תאים לכל הזרקה. תארגן את זה על מכשיר ההזרקה. העיצוב והתפקוד של התקן הזרקה זה מוסברים בפירוט באיור 1b ובמקרא שלו.</li>
	<li>מניחים את ספוגית ארנק מחרוזת מעל החתך לפרוטומי ולאחר מכן החיצוניים את הטחול וזנב הלבלב דרך הפתיחה של ספוגית זו. הדקו את מחרוזת הארנק כדי להקיף בעדינות את גוף הלבלב, וחשפו את זנב הלבלב להזרקה. חשוב להיות הדוק מספיק כי גזה יוצר קשר עם הלבלב בהיקף בעת ובעונה אחת לא מכווץ אותו.</li>
	<li>באמצעות זוג מלקחיים, לתפוס את הזנב של הלבלב בעדינות למקם מתח לרוחב על זה. לנקב את פני השטח הצפק הגחוני עם המחט בזווית רדודה ולאחר מכן להזריק את המתלה התא לתוך הלבלב בצורה איטית ומבוקרת (מעל 10-15 s) עם מכשיר ההזרקה.</li>
	<li>במהלך תהליך ההזרקה, יש להקפיד על דליפה – הן סביב אתר ההזרקה (מרפלוקס) והן בצד השני של הלבלב (במקרה של חדירה דרך ודרך). אם מתרחשת דליפה גלויה, לעצור את ההזרקה ולשים לב לנפח הדליפה על ידי בדיקת נפח של הזרקה שנותרה במזרק. אם הדליפה היא של נפח קטן (<10 μL), ולאחר מכן לספוג כל דליפה עם גזה למקם מחדש את המחט לתוך lobule הלבלב שונה כדי להשלים את הזריקה.</li>
	<li>החלף את הטחול והלבלב וסגור את דופן הבטן בתפר חומצה פוליגליקולית 5/0 באופן רציף. סגור את העור עם קליפים.</li>
	<li>לפקח על העכבר בכלוב מחומם עד התאושש מן ההרדמה. ברגע ער וערני, להזיז את העכבר בחזרה לכלוב שלה.</li>
</ol>2. ניתוח כריתת סרטן: כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור
<ol><li>עיתוי כריתה ביחס להשתלה יכול להשתנות בהתאם לפרוטוקול הניסוי. באופן כללי, לאפשר את הגידולים לגדול לפחות במשך 3 שבועות לפני כריתה, אבל לייעל את זה באופן אמפירי עבור קו תאים סרטניים מושתלים מסוימים.</li>
	<li>ביום שלפני ניתוח כריתה, לבצע הדמיה bioluminescence על בעלי החיים כדי לאשר את נוכחותו של גידול ראשוני מקומי. שים לב כי מחקר הדמיה זה משמש פשוט כדי לא לכלול עכברים עם מחלת חוץ לבלב ברורה כריתה. אין להשתמש בגודל או בשטף קורן כסף לקביעת הזכאות לכריתה.<ol>
<li>שוקלים עכברים ומזריקים D-לוציפרין תוך-פיטריטוני (150 מ"ג/ק"ג).</li>
		<li>לקבוע את התזמון של שלב ההדמיה ביחס להזרקת לוציפרין עבור כל ניסוי על ידי ביצועים של עקומה קינטית לוציפרין. פרק הזמן שבו השטף הקורן הוא מעל 90% מהמקסימום שלו מייצג את הזמן האופטימלי להדמיית ביולומינציה (בניסוי זה, 18 עד 26 דקות לאחר ההזרקה)</li>
		<li>לגרום להרדמה ולשמור באמצעות isoflurane (4% ו 3% עם חמצן, בהתאמה) ולבצע הדמיה באמצעות מכשיר הדמיה bioluminescent (למשל, IVIS Lumina II). השתמש בהגדרות חשיפה ואיתור אוטומטיות (עם זאת, ניתן למטב זאת עבור השטף הקורן הצפוי).</li>
	</ol>
</li>
	<li>הכינו את ארון הביו-רוויה מדרגה 2 להליך. השתמש מחצלת חימום מכוסה וילון פלסטיק סטרילי. להגדלה במהלך הניתוח, יש להשתמש בזוג זכוכית מגדלת של 2.5 עד 3.5x.</li>
	<li>הרדמה את העכבר עם 80 מ"ג/ק"ג קטמין ו 10 מ"ג/ קילוגרם של xylazine על ידי הזרקה תוך-אישית.</li>
	<li>ניהול 5 מ"ג/ק"ג טיפול מונע אנטיביוטי enrofloxacin, 2.5 מ"ג /ק"ג משככי כאבים flunixin ו 1 מ"ל של 0.9% מלוחים תת עורית.</li>
	<li>מניחים את העכבר על השדה סטרילי בתנוחה סופית ולהחיל povidone-יוד ואחריו 70% אתנול להכנת העור.</li>
	<li>בצע חתך אורך בעור של הרבע הגולגולתי השמאלי של הבטן, רצוי דרך אתר החתך הקודם.</li>
	<li>לנתח בבוטות את העור את דופן הבטן השרירית הבסיסית, ולאחר מכן למקם רקטור שמירה עצמית Alm להחזיק את פצע העור פתוח.</li>
	<li>להסית את שכבת השרירים בין מלקחיים רק לצד אחד של קו התפר של הפעולה הקודמת, ולאחר מכן להאריך את החתך כדי excise את קו התפירה הקודם כולו.</li>
	<li>החיצוניים את הטחול ואת הלבלב דיסטלי ולחזור בו בגולגולת. בהיבט הקאודאלי של הלבלב, המעי הגס עשוי להימצא מחובר על ידי הידבקויות פילם. אם זה נמצא, לנתח בבוטות את המעי הגס.</li>
	<li>בזהירות להעביר זוג מלקחיים הגב לגוף הלבלב וכלי טחול ולפתוח את החלל הזה. פעולה זו מפנה קטע של הלבלב עבור קשירה לאחר מכן.</li>
	<li>Ligate הגוף של הלבלב proximal לגידול עם קליפ קשירה טיטניום, ולאחר מכן לחתוך את הלבלב distal לזה עם צריבה. דרך חלופית לשלוט על גדם הלבלב היא ligate אותו בהמשכיות עם 5/0 תפר חומצה פוליגליקולית לפני transection.</li>
	<li>לסגת הלבלב caudally לצרוב את כלי gastrosplenic בין מוט הגולגולת של הטחול ואת הבטן.</li>
	<li>הסר את הדגימה ולאשר haemostasis.</li>
	<li>סגור את דופן הבטן עם תפר חומצה פוליגליקולית 5/0 באופן רציף. סגור את העור עם קליפים.</li>
</ol>3. ניהול לאחר הניתוח
<ol><li>בתקופה המיידית שלאחר ההרדמה (עבור שני ההליכים לעיל), לפקח על העכבר בכלוב מחומם עד התאושש מן ההרדמה. ברגע ער וערני, להזיז את העכבר בחזרה לכלוב שלה. בתקופה שלאחר הניתוח, לפקח על בעלי החיים עבור כאב וסימני מצוקה. לנהל 0.05 מ"ג /ק"ג buprenorphine על ידי הזרקה תת עורית מקרוב לצפות בבעלי החיים במשך 12 שעות.</li>
	<li>לאחר מכן, לפקח על עכברים מדי יום עבור משקל, צריכת מזון ופעילות. בדוק אתרי חתך ומ מוחשי לגודל הגידול. הסר קליפי עור ביום שלאחר הניתוח השביעי.</li>
	<li>המתת חסד לעכבר אם מגיעים לנקודות קצה אנושיות. נקודות קצה אנושיות אלה כוללות: אובדן משקל גוף >20%, תכונות של מצוקה בלתי ניתנת לטיפול (כולל יציבה רכון, חוסר תנועה או טיפוח) וגודל הגידול גדול מ 1 ס"מ3 כפי שהוערך על ידי מישוש חיצוני.</li>
</ol>

<ol><li>Noone, A. M., et al. SEER Cancer Statistics Review, 1975-2015, National Cancer Institute. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://seer.cancer.gov/csr/1975_2015/">https://seer.cancer.gov/csr/1975_2015/</a> (2018).</li>
<li>Sugiura, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Margin+status%2C+recurrence+pattern%2C+and+prognosis+after+resection+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Margin status, recurrence pattern, and prognosis after resection of pancreatic cancer.</a> Surgery. 154 (5), 1078-1086 (2013).</li>
<li>Hishinuma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+recurrence+after+curative+resection+of+pancreatic+cancer%2C+based+on+autopsy+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Gastrointestinal+Surgery%22%5BJournal%5D)">Patterns of recurrence after curative resection of pancreatic cancer, based on autopsy findings.</a> Journal of Gastrointestinal Surgery. 10 (4), 511-518 (2006).</li>
<li>NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology - Pancreatic Adenocarcinoma (Version 3.2019). National Comprehensive Cancer Network. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf">https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf</a> (2019).</li>
<li>Breslin, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neoadjuvant+chemoradiotherapy+for+adenocarcinoma+of+the+pancreas%3A+treatment+variables+and+survival+duration%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Neoadjuvant chemoradiotherapy for adenocarcinoma of the pancreas: treatment variables and survival duration.</a> Annals of Surgical Oncology. 8 (2), 123-132 (2001).</li>
<li>Mokdad, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neoadjuvant+Therapy+Followed+by+Resection+Versus+Upfront+Resection+for+Resectable+Pancreatic+Cancer%3A+A+Propensity+Score+Matched+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Neoadjuvant Therapy Followed by Resection Versus Upfront Resection for Resectable Pancreatic Cancer: A Propensity Score Matched Analysis.</a> Journal of Clinical Oncology. 35 (5), 515-522 (2017).</li>
<li>Tachezy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+neoadjuvant+chemoradiotherapy+%28CRT%29+followed+by+curative+surgery+vs.+primary+surgery+alone+for+resectable%2C+non-metastasized+pancreatic+adenocarcinoma%3A+NEOPA-+a+randomized+multicenter+phase+III+study+%28NCT01900327%2C+DRKS00003893%2C+ISRCTN82191749%29%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Sequential neoadjuvant chemoradiotherapy (CRT) followed by curative surgery vs. primary surgery alone for resectable, non-metastasized pancreatic adenocarcinoma: NEOPA- a randomized multicenter phase III study (NCT01900327, DRKS00003893, ISRCTN82191749).</a> BMC Cancer. 14, 411(2014).</li>
<li>Barbour, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+AGITG+GAP+Study%3A+A+Phase+II+Study+of+Perioperative+Gemcitabine+and+Nab-Paclitaxel+for+Resectable+Pancreas+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">The AGITG GAP Study: A Phase II Study of Perioperative Gemcitabine and Nab-Paclitaxel for Resectable Pancreas Cancer.</a> Annals of Surgical Oncology. , (2020).</li>
<li>Fu, X., Guadagni, F., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+metastatic+nude-mouse+model+of+human+pancreatic+cancer+constructed+orthotopically+with+histologically+intact+patient+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A metastatic nude-mouse model of human pancreatic cancer constructed orthotopically with histologically intact patient specimens.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 89 (12), 5645-5649 (1992).</li>
<li>Marincola, F., Taylor-Edwards, C., Drucker, B., Holder, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+and+heterotopic+xenotransplantation+of+human+pancreatic+cancer+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Surgery%22%5BJournal%5D)">Orthotopic and heterotopic xenotransplantation of human pancreatic cancer in nude mice.</a> Current Surgery. 44 (4), 294-297 (1987).</li>
<li>Vonlaufen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+stellate+cells%3A+partners+in+crime+with+pancreatic+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Pancreatic stellate cells: partners in crime with pancreatic cancer cells.</a> Cancer Research. 68 (7), 2085-2093 (2008).</li>
<li>Xu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+pancreatic+stellate+cells+in+pancreatic+cancer+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Role of pancreatic stellate cells in pancreatic cancer metastasis.</a> American Journal of Pathology. 177 (5), 2585-2596 (2010).</li>
<li>Tepel, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjuvant+treatment+of+pancreatic+carcinoma+in+a+clinically+adapted+mouse+resection+model%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreatology%22%5BJournal%5D)">Adjuvant treatment of pancreatic carcinoma in a clinically adapted mouse resection model.</a> Pancreatology. 6 (3), 240-247 (2006).</li>
<li>Torgenson, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+pancreatic+cancer+recurrence+following+%22curative%22+resection+in+athymic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Natural history of pancreatic cancer recurrence following "curative" resection in athymic mice.</a> Journal Surgical Research. 149 (1), 57-61 (2008).</li>
<li>Metildi, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence-guided+surgery+allows+for+more+complete+resection+of+pancreatic+cancer%2C+resulting+in+longer+disease-free+survival+compared+with+standard+surgery+in+orthotopic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Fluorescence-guided surgery allows for more complete resection of pancreatic cancer, resulting in longer disease-free survival compared with standard surgery in orthotopic mouse models.</a> Journal of the American College of Surgeons. 215 (1), 126-135 (2012).</li>
<li>Ni, X., Yang, J., Li, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging-guided+curative+surgical+resection+of+pancreatic+cancer+in+a+xenograft+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Letters%22%5BJournal%5D)">Imaging-guided curative surgical resection of pancreatic cancer in a xenograft mouse model.</a> Cancer Letters. 324 (2), 179-185 (2012).</li>
<li>Hiroshima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hand-held+high-resolution+fluorescence+imaging+system+for+fluorescence-guided+surgery+of+patient+and+cell-line+pancreatic+tumors+growing+orthotopically+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Hand-held high-resolution fluorescence imaging system for fluorescence-guided surgery of patient and cell-line pancreatic tumors growing orthotopically in nude mice.</a> Journal of Surgical Research. 187 (2), 510-517 (2014).</li>
<li>Hiroshima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+recurrence+in+a+pancreatic+cancer+patient+derived+orthotopic+xenograft+%28PDOX%29+nude+mouse+model+is+inhibited+by+neoadjuvant+chemotherapy+in+combination+with+fluorescence-guided+surgery+with+an+anti-CA+19-9-conjugated+fluorophore%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Metastatic recurrence in a pancreatic cancer patient derived orthotopic xenograft (PDOX) nude mouse model is inhibited by neoadjuvant chemotherapy in combination with fluorescence-guided surgery with an anti-CA 19-9-conjugated fluorophore.</a> PLoS One. 9 (12), 114310(2014).</li>
<li>Hiroshima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence-guided+surgery+in+combination+with+UVC+irradiation+cures+metastatic+human+pancreatic+cancer+in+orthotopic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Fluorescence-guided surgery in combination with UVC irradiation cures metastatic human pancreatic cancer in orthotopic mouse models.</a> PLoS One. 9 (6), 99977(2014).</li>
<li>Metildi, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ratiometric+activatable+cell-penetrating+peptides+label+pancreatic+cancer%2C+enabling+fluorescence-guided+surgery%2C+which+reduces+metastases+and+recurrence+in+orthotopic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Ratiometric activatable cell-penetrating peptides label pancreatic cancer, enabling fluorescence-guided surgery, which reduces metastases and recurrence in orthotopic mouse models.</a> Annals of Surgical Oncology. 22 (6), 2082-2087 (2015).</li>
<li>Metildi, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence-guided+surgery+with+a+fluorophore-conjugated+antibody+to+carcinoembryonic+antigen+%28CEA%29%2C+that+highlights+the+tumor%2C+improves+surgical+resection+and+increases+survival+in+orthotopic+mouse+models+of+human+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Fluorescence-guided surgery with a fluorophore-conjugated antibody to carcinoembryonic antigen (CEA), that highlights the tumor, improves surgical resection and increases survival in orthotopic mouse models of human pancreatic cancer.</a> Annals of Surgical Oncology. 21 (4), 1405-1411 (2014).</li>
<li>NCCN Guidelines: Pancreatic Adenocarcinoma. National Comprehensive Cancer Network. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf">https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/pancreatic.pdf</a> (2019).</li>
<li>Maithel, S. K., Allen, P. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMaithel%2C+SK+%22Blumgart%27s+Surgery+of+the+Liver%2C+Biliary+Tract+and+Pancreas%2C+2-Volume+Set+%28Sixth+Edition%29%22">Blumgart's Surgery of the Liver, Biliary Tract and Pancreas, 2-Volume Set (Sixth Edition)</a>. Jarnagin, W. R. , Content Repository Only 1007-1023 (2017).</li>
<li>Egberts, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dexamethasone+reduces+tumor+recurrence+and+metastasis+after+pancreatic+tumor+resection+in+SCID+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Dexamethasone reduces tumor recurrence and metastasis after pancreatic tumor resection in SCID mice.</a> Cancer Biology & Therapy. 7 (7), 1044-1050 (2008).</li>
<li>Xu, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+HGF%2Fc-MET+pathway+in+advanced+pancreatic+cancer%3A+a+key+element+of+treatment+that+limits+primary+tumor+growth+and+eliminates+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Targeting the HGF/c-MET pathway in advanced pancreatic cancer: a key element of treatment that limits primary tumor growth and eliminates metastasis.</a> British Journal of Cancer. , (2020).</li>
<li>Pothula, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+HGF%2Fc-MET+pathway%3A+stromal+remodelling+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Targeting the HGF/c-MET pathway: stromal remodelling in pancreatic cancer.</a> Oncotarget. 8 (44), 76722-76739 (2017).</li>
<li>Pothula, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte+growth+factor+inhibition%3A+a+novel+therapeutic+approach+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte growth factor inhibition: a novel therapeutic approach in pancreatic cancer.</a> British Journal of Cancer. 114 (3), 269-280 (2016).</li>
<li>Giri, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Immunocompetent+Model+of+Pancreatic+Cancer+Resection+and+Recurrence%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Gastrointestinal+Surgery%22%5BJournal%5D)">An Immunocompetent Model of Pancreatic Cancer Resection and Recurrence.</a> Journal of Gastrointestinal Surgery. , (2020).</li>
<li>Allen, V. B., Gurusamy, K. S., Takwoingi, Y., Kalia, A., Davidson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+accuracy+of+laparoscopy+following+computed+tomography+%28CT%29+scanning+for+assessing+the+resectability+with+curative+intent+in+pancreatic+and+periampullary+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+of+Systematic+Reviews%22%5BJournal%5D)">Diagnostic accuracy of laparoscopy following computed tomography (CT) scanning for assessing the resectability with curative intent in pancreatic and periampullary cancer.</a> Cochrane Database of Systematic Reviews. (11), 009323(2013).</li>
<li>Vaillant, F., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Jekyll+or+Hyde%3A+does+Matrigel+provide+a+more+or+less+physiological+environment+in+mammary+repopulating+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Jekyll or Hyde: does Matrigel provide a more or less physiological environment in mammary repopulating assays.</a> Breast Cancer Research. 13 (3), 108(2011).</li>
<li>Jesnowski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immortalization+of+pancreatic+stellate+cells+as+an+in+vitro+model+of+pancreatic+fibrosis%3A+deactivation+is+induced+by+matrigel+and+N-acetylcysteine%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Investigation%22%5BJournal%5D)">Immortalization of pancreatic stellate cells as an in vitro model of pancreatic fibrosis: deactivation is induced by matrigel and N-acetylcysteine.</a> Laboratory Investigation. 85 (10), 1276-1291 (2005).</li>
<li>Phillips, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration%3A+a+novel+aspect+of+pancreatic+stellate+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Cell migration: a novel aspect of pancreatic stellate cell biology.</a> Gut. 52 (5), 677-682 (2003).</li>
<li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li>
<li>Egberts, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superiority+of+extended+neoadjuvant+chemotherapy+with+gemcitabine+in+pancreatic+cancer%3A+a+comparative+analysis+in+a+clinically+adapted+orthotopic+xenotransplantation+model+in+SCID+beige+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Superiority of extended neoadjuvant chemotherapy with gemcitabine in pancreatic cancer: a comparative analysis in a clinically adapted orthotopic xenotransplantation model in SCID beige mice.</a> Cancer Biology & Therapy. 6 (8), 1227-1232 (2007).</li>
</ol>

המחברים אין מה לחשוף ביחס לפרויקט זה.

דגם עכבר אורתוטופי כריתה של סרטן הלבלב חשוב כי זה מאפשר בדיקה של טיפולים אדג'ובנטיים neoadjuvant. זה חשוב במיוחד בסרטן הלבלב שבו הניתוח נשאר הטיפול היעיל ביותר, אבל קשורה לסיכון גבוה להישנות. מאמר זה מתאר שיטה אשר תייצר באופן אמין סרטן הלבלב אשר פוטנציאל לריפוי עם כריתה, שכפול התרחיש הקליני שבו neoadjuvant / טיפול אדג'ובנטי נדרש.
משמעות ביחס לשיטות קיימות למרות החשיבות של טיפולים אדג'ובנטיים ניאו-ג'ובנטיים בסרטן הלבלב, יש מעט מודלים של עכברים אורתוטופיים מתוארים היטב בספרות...

אדנוקרצינומה צינורית הלבלב (סרטן הלבלב [PC]) קשורה פרוגנוזה עניים1. כריתה כירורגית נשאר הטיפול רק פוטנציאל מרפא עבור PC ויש לשקול עבור חולים המציגים עם מחלה בשלב מוקדם. למרבה הצער, אפילו עם כריתת R0 (כלומר, שולי כריתה ללא גידול), שיעור הישנות (מקומי או ממחלה גרורתית שלא זוהתה) הוא גבוה2,3. לכן, טיפול אדג'ובנטי מערכתי מצוין כמעט בכל החולים שעוברים כריתה4. יתר על כן, בעוד טיפול neoadjuvant מומלץ כעת רק עבור סרטן גבולי resectable, האינדיקציות שלה מתרחבים כך השימוש השגרתי שלה הוא המוקד של מחקר קליני רב5,6,7,8. על מנת לפתח גישות טיפוליות חדשניות עבור מחשב מעורב כריתה, גישות אלה צריך להיות מוערך תחילה במודלים פרה קליניים כי במדויק recapitulate הגדרות קליניות.
דגמי עכבר אורתוטופיים של PC שימשו לעתיםקרובותבעבר כדי לבדוק טיפולים תרופתיים 9,10. רבים מהם יוצרו על ידי הזרקת תאים סרטניים לבד לתוך הלבלב העכבר, וכתוצאה מכך גידולים חסרים סטרומה בולטת האופיינית למחשב. לאחרונה, מודלים אורתוטופיים בהזרקה משותפת, כגון זה שפיתחנו לראשונה על ידי הזרקת תערובת של מחשב אנושי ותאי כוכבי לבלב אנושיים (PSCs, היצרנים העיקריים של סטרומה קולגנית במחשב), נכנסו לשימוש קבוע11,12. הגידולים המיוצרים על ידי הזרקה משותפת כזו של סרטן ותאי סטרומה מציגים (i) הן את האלמנטים הסרטניים והן את המרכיב הסטרומלי האופייני (desmoplastic) של המחשב, ו - (ii) התפשטות תאים סרטניים משופרת גרורות11. לכן, מודל זה דומה מאוד למחשב אנושי. בעוד מספר מודלים כריתה של מחשב אורתוטופי תוארו13,14,15,16, אף אחד לא שיקף את המציאות הקלינית של כריתת הלבלב בבני אדם מדויק כמו מודל זה, ולכן היו suboptimal לבדיקת טיפולים אדג'ובנטי או neoadjuvant.
המטרות של מודל העכבר שהוצגו היו להדגים כיצד: (i) בהצלחה להשתיל סרטן הלבלב אורתוטופי תוך מזעור הפצה צפק בשוגג ו (ii) לאחר מכן לחלוטין resect הסרטן. הנייר מדגיש טיפים ומלכודות פוטנציאליות של טכניקה זו.

<table><tbody><tr><td>Animals, חומרים וציוד להליך השתלה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>AsPC-1 קו תאי סרטן לבלב אנושי, luciferase tagged (luc+ gene from Promega PGL3 Basic plasmid)</td> <td>American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA</td><td></td><td>מסופק על ידי פרופסור טקאשי מורקמי, האוניברסיטה הרפואית סאיטאמה, סאיטאמה, יפן</td></tr><tr><td>קליפס פצע אוטוקליפ, 9 מ"מ</td><td>Becton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW, אוסטרליה</td><td>500346</td><td></td></tr><tr><td>חבילת חבישה בסיסית</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תאי כוכב לבלב אנושיים הקשורים לסרטן</td><td>בנק</td><td></td> תאים של קבוצת מחקר הלבלב <td>בבית בנק תאים צינורות</td></tr><tr><td>קריוגניים, 1.0 מ"ל</td><td>תרמו פישר סיינטיפיק אוסטרליה Pty Ltd, Scoresby, VIC, אוסטרליה</td><td>366656</td><td></td></tr><tr><td>להב אזמל חד פעמי מנירוסטה עם ידית, גודל 15</td><td>ליווינגסטון אינטרנשיונל, קמע, NSW,</td> <td>SCP15</td><td></td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי (FBS)</td> <td>Life Technologies Corporation, טולמרין, ויקטוריה, אוסטרליה</td><td>16000044</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים לשיניים עדינות של ז'יל 12 ס"מ</td><td></td><td></td><td>סט</td></tr> <tr><td>מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטהמחצלות מחוממות לשמירה על טמפרטורת הגוף במהלך הניתוח והתאוששות לאחר הניתוח</td> עכברים עירומים אתימיים <td>הומוזיגוטיים גנריים</td><td></td><td></td></tr><tr><td>: זן BALB/c-Fox1nu/Ausb, נקבת</td><td>משאבים ביולוגיים אוסטרליים, מוס וייל, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מדיום דולבקו המותאם של Iscove (IMDM) עם 4 מ"מ L-גלוטמין וללא פנול אדום</td><td>Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, אוסטרליה</td><td>21056023</td><td></td></tr><tr><td>תכשיטים מלקחיים 11.5 ס"מ</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו (ידית עגולה) 15 ס"מ ישר</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>מספריים מיקרו (ידית עגולה) 15 ס"מ ישר</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>פניצילין 10,000 U/mL, סטרפטומיצין 10,000 &mu; g/mL</td><td>Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, אוסטרליה</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>תפר חומצה פוליגליקולית, גודל USP 5/0 על מחט עגולה חצי עיגול 13 מ"מ</td><td>Braun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, Australia</td><td>C1049407</td><td></td></tr><tr><td>משקל שקילה נייד</td><td>מאזנים מדויקים, ברדפורד, MA, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכשיר קליפ רפלקס ומסיר קליפים</td><td>World Precision Instruments, סרסוטה, FL, ארה"ב</td><td>500345</td><td></td></tr><tr><td>מכון הזיכרון רוזוול פארק (RPMI) 1640 עם פנול אדום ו-300 מ"ג/ליטר Lglutamine</td><td>Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia</td><td>11875085</td><td></td></tr><tr><td>מרחיב כלי בעל גוף עגול 15 ס"מ, קצה</td><td></td><td></td> 0.1 מ"מ <td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>טריפסין 0.05%, EDTA 0.02%</td> <td>Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, אוסטרליה</td><td>25300054</td><td>לתאי כוכב הלבלב</td></tr><tr><td>טריפסין 0.25%, EDTA 0.02%</td> <td>Life Technologies Corporation, Tullamarine, VIC, Australia</td><td>25200056</td><td>לתאי ASPC-1</td></tr><tr><td>U-100 מזרקי אינסולין, 0.5 מ"ל עם 29 גרם (0.33 מ"מ) ופעמים; מחט 13 מ"מ</td><td>Terumo Medical Corporation, Elkton, MD, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><<tr><td>strong>ציוד להליך כריתה</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alm מפסק</td><td></td><td></td> שמירה עצמית <td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>קליפים פצע Autoclip 9 מ"מ</td><td>Becton Dickson Pty Ltd, North Ryde, NSW</td><td>500346</td><td></td></tr><tr><td>חבילת חבישה בסיסית</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd, Villawood, NSW, אוסטרליה</td><td>08-559NP</td><td></td></tr><tr><td>להב אזמל חד פעמי מנירוסטה עם ידית, גודל 15</td><td>ליווינגסטון אינטרנשיונל, קמע, NSW,</td> <td>SCP15</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים עדינים של ז'יל 12 ס"מ</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>כף יד צריבה בטמפרטורה גבוהה עם קצה עדין</td><td>Bovie Medical Corporation, מלוויל, ניו יורק, ארה"ב</td><td>AA01</td><td></td></tr><tr><td>מחצלות מחוממות לשמירה על טמפרטורת הגוף במהלך הניתוח והתאוששות לאחר הניתוח</td><td>גנרי</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IVIS Lumina II Bioluminescent Imaging</td> Device <td>קליפר מדעי החיים, הופקינטון, MA, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים תכשיטים 11.5 ס"מ</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו (ידית עגולה) 15 ס"מ ישר</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>מספריים מיקרו (ידית עגולה) 15 ס"מ ישר</td><td></td><td></td><td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>תפר חומצה פוליגליקולית, גודל USP 5/0 על מחט עגולה חצי עיגול 13 מ"מ</td><td>בראון אוסטרליה Pty בע"מ, בלה ויסטה, NSW, אוסטרליה</td><td>C1049407</td><td></td></tr><tr><td>סולם שקילה נייד</td><td>איזונים מדויקים, ברדפורד, MA, ארה"ב</td><td></td><td></td></tr><tr><td>רפלקס פצע קליפ אפליקציה ומסיר קליפ</td><td>World Precision Instruments, סרסוטה, פלורידה, ארה"ב</td><td>500345</td><td></td></tr><tr><td>מרחיב כלי בעל גוף עגול 15 ס"מ, קצה</td><td></td><td></td> 0.1 מ"מ <td>סט מכשירים מיקרוכירורגיים גנרי מנירוסטה</td></tr><tr><td>טיטניום " סגנון ווק" Ligaclip, HZMIM קטן</td><td>, האנגג'ואו, סין</td><td></td><td></td></tr><tr><td>טיטניום Ligaclip applier לניתוח פתוח,</td><td>HZMIM קטן, האנגג'ואו, סין</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכונת הרדמה נדיפה, כולל vapourizer ותא אינדוקציה</td><td>גנרי</td><td></td><td>vapourizer גנרי ותא</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> אינדוקציה <tr><td>תרופות להליכים </חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>70% w/w תמיסת אתנול</td><td>Sigma-Aldrich Pty Ltd, Castle Hill, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מיושם באופן מקומי כתכשיר עור כירורגי</td></tr><tr><td>בופרנורפין 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון: 0.05 מ"ג/ק"ג s.c.</td></tr><tr><td>D-לוציפרין (1 U/g)</td><td>PerkinElmer, Inc., Waltham, MA, USA</td><td>122799</td><td>מדולל ב-PBS ל-15 מ"ג/מ"ל. מינון: 150 מ"ג/ק"ג i.p</td></tr><tr><td>אנרופלוקסצין 50 מ"ג/מ"ל</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון: 5 מ"ג/ק"ג s.c.</td></tr><tr><td>פלוניקסין 50 מ"ג/מ"ל</td><td>מעבדות נורברוק אוסטרליה, טולמרין, ויקטוריה, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון: 2.5 מ"ג/ק"ג לחודש</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Zoetis Australia Pty Ltd., רודוס, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון (אדים עם חמצן): 4% אינדוקציה, 3% תחזוקה</td></tr><tr><td>קטמין 100 מ"ג/מ"ל</td><td>Maylab, Slacks Creek, QLD, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון: 80 מ"ג/ק"ג i.p.</td></tr><tr><td>פובידון-יוד 10% w/v תמיסה</td><td>פריגו אוסטרליה, בלקטה, וושינגטון, אוסטרליה</td><td>RIO00802F</td><td>נמרח באופן מקומי על הבטן הקדמית כהכנה כירורגית</td></tr><tr><td>לעור משחת עיניים מרעננת (פרפין נוזלי 42.5% w/w, פרפין לבן רך 57.3% w/w)</td><td>Allergan Australia Pty Ltd, גורדון, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מיושם על שתי העיניים</td></tr><tr><td>נתרן כלורי 0.9% w/v</td><td>Braun Australia Pty Ltd, Bella Vista, NSW, אוסטרליה</td><td>9481P</td><td>מינון: 900 &mu; ל.ס.ק.</td></tr><tr><td>מים לזריקות BP</td><td>Pfizer אוסטרליה, סידני, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>לדילול תרופות</td></tr><tr><td>קסילזין 20 מ"ג/מ"ל</td><td>Troy Laboratories Pty Ltd, Glendenning, NSW, אוסטרליה</td><td></td><td>מינון: 10 מ"ג/ק"ג i.p.</td></tr></tbody></table>

מודל עכבר כריתה אורתוטופי של סרטן הלבלב

An Orthotopic Resectional Mouse Model of Pancreatic Cancer

קיים מחסור במודלים משביעי רצון של בעלי חיים לחקר טיפול אדג'ובנטי ו/או ניאו-ג'ובנטי בחולים הנחשבים לניתוח של סרטן הלבלב (PC). כדי לטפל במחסור זה, אנו מתארים מודל העכבר מעורבים השתלה אורתוטופית של המחשב ואחריו כריתת לבלב דיסטלי ו splenectomy. המודל הוכח כבטוח וגמיש כראוי לחקר גישות טיפוליות שונות בהגדרות אדג'ובנטיות וניאו-אדג'ובנטיות.
במודל זה, גידול בלבלב נוצר לראשונה על ידי השתלת תערובת של תאים סרטניים בלבלב האנושי (לוציפראז מתויג AsPC-1) וסרטן האדם הקשורים תאים כוכבי הלבלב לתוך הלבלב הדיסטלי של עכברי עירום Balb/c אתימי. לאחר שלושה שבועות, הסרטן הוא resected על ידי לפרוטומיה מחדש, כריתת לבלב דיסטלי ו splenectomy. במודל זה, הדמיה bioluminescence ניתן להשתמש כדי לעקוב אחר ההתקדמות של התפתחות סרטן והשפעות של כריתה / טיפולים. לאחר כריתה, ניתן לתת טיפול אדג'ובנטי. לחלופין, ניתן לתת טיפול ניאואדג'ובנטי לפני כריתה.
מוצגים נתונים מייצגים מ-45 עכברים. כל העכברים עברו כריתת לבלב דיסטלית מוצלחת / כריתת טבור ללא בעיות של עצירת דימום. שולי לבלב פרוקסימליים מקרוסקופיים הגדולים מ- 5 מ"מ הושגו ב- 43 (96%) עכברים. שיעור ההצלחה הטכנית של כריתת הלבלב היה 100%, עם 0% תמותה מוקדמת ותחלואה. אף אחת מהחיות לא מתה במהלך השבוע שלאחר כריתה.
לסיכום, אנו מתארים טכניקה חזקה הניתנת לשחזור עבור מודל כריתה כירורגית של סרטן הלבלב בעכברים המחקה את התרחיש הקליני. המודל עשוי להיות שימושי עבור בדיקות של טיפולים אדג'ובנטיים ו neoadjuvant.

חמישים ותשעה עכברים רצופים עברו ניתוח השתלה. דליפת ברוטו התרחשה בשמונה (14%) עכברים. מידת הדליפה בזמן ההזרקה מוערכת כמתואר לעיל בסעיף הפרוטוקול. לאחר שלושה שבועות כדי לאפשר לגידולים מושתלים אלה לגדול, הדמיה ביולומינציה לפני כריתה בוצעה כדי לא לכלול עכברים עם מחלה גרורתית ברוטו לפני כריתה. ארבעים וחמש (76%) עכברים עברו כריתה כירורגית.
כל ה-45 (100%) עכברים עברו כריתת לבלב דיסטלית מוצלחת / כריתת טבור ללא בעיות של haemostasis. שולי לבלב פרוקסימליים מקרוסקופיים הגדולים מ- 5 מ"מ הושגו ב- 43 (96%) ע...

בהקשר הקליני, חולים עם סרטן הלבלב מקומי יעברו כריתת לבלב ואחריו טיפול אדג'ובנטי. פרוטוקול זה שדווח כאן נועד לבסס שיטה בטוחה ויעילה של מידול תרחיש קליני זה בעכברים עירומים, באמצעות השתלה אורתוטופית של סרטן הלבלב ואחריו כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור.

There is a lack of satisfactory animal models to study adjuvant and/or neoadjuvant therapy in patients being considered for surgery of pancreatic cancer ...

פרוטוקול זה מתאר מודל כריתה כירורגי חזק וניתן לשחזור של סרטן הלבלב בעכברים, שעשוי לשמש לבדיקת טיפול אדג'ובנטי וניאו-אדג'ובנטי. טכניקה זו משלבת מודל אורתוטופי של זיהום משותף, היעיל בסיכום סרטן הלבלב האנושי עם טכניקת כריתת לבלב בטוחה ויעילה. בעוד שמודל חסר חיסון מתואר בפרוטוקול זה, ניתן לבצע מודל חיסוני חלופי, באמצעות תאי גידול KPC שהושתלו בשישה עכברים שחורים C57.חלופה זו תהיה שימושית לבדיקת טיפולים חיסוניים. כדי להתחיל, הניחו את העכבר המורדם על שדה סטרילי במצב שכיבה ומרחו יוד פובידון, ואחריו 70% אתנול להכנת העור. לנתח את העור על ידי ביצוע חתך אורכי ברבע הגולגולת השמאלי של הבטן ולחתוך את שכבות השרירים בין המלקחיים.לאחר הרכבת המזרק עם מתלה התא על מכשיר ההזרקה, הנח את ספוגית חוט הארנק מעל חתך הלפרוטומיה והוציא את הטחול וזנב הלבלב החוצה דרך פתח המקלון. הדק את חוטי הארנק בעדינות וחשוף את זנב הלבלב להזרקה, וודא שהגזה נוגעת בלבלב בצורה היקפית, אך אינה מכווצת אותו. אחזו בזנב הלבלב, בעזרת מלקחיים והניחו עליו בעדינות מתח לרוחב.לנקב את הלבלב בעזרת המחט, לשפוע ולקדם אותו בזמן שקצה המחט מורם מעט כלפי מעלה עד שהשיפוע נכנס לחלוטין לצפק. הזרקו את הפרנכימה של הלבלב עם תרחיף התאים בצורה איטית ומבוקרת. לאחר ההזרקה, החזק את המחט במקומה למשך מספר שניות לפני הנסיגה כדי למזער את הדליפה.השתמש במקלון ספוג יוד פובידון כדי לטפוח בזהירות את המקום כדי לספוג כל תרחיף תאים שדלף בטעות. החזר את הטחול והלבלב למקומם האורתוטופי וסגור את דופן הבטן בתפר חומצה פוליגליקולית 5-0. סגור את העור בעזרת קליפסים.בצע חתך אורכי בעור של רבע הגולגולת השמאלי של הבטן. רצוי דרך אתר החתך הקודם. נתחו בבוטות את העור מדופן הבטן השרירית התחתונה והניחו מפסק ששומר על עצמו כדי להחזיק את הפצע פתוח.לחתוך את שכבת השרירים בין מלקחיים, רק לצד אחד של קו התפרים של הניתוח הקודם. ואז להאריך את החתך כדי לכרות את כל קו התפרים הקודם. הוצא את הטחול והלבלב על ידי נסיגתו בגולגולת.במקרה זה, נמצאו כמה הידבקויות מחוברות להיבט התחתון של הגידול. זה חולק על ידי צריבה. ניתן למצוא את המעי הגס מחובר להיבט הזנב של הלבלב על ידי הידבקויות פילמיות.אם זה נמצא, נתח את המעי הגס בצורה בוטה. חשוף את קטע הלבלב לקשירה על ידי העברת זוג מלקחיים גב לכלי הטחול בגוף הלבלב. קשרו את הלבלב הפרוקסימלי לגידול בעזרת קליפ צירוף טיטניום ולאחר מכן העבירו את הלבלב הדיסטלי לזה עם צריבה.לחלופין, יש לקשור את הלבלב ברצף עם תפר חומצה פוליגליקולית 5-0 לפני החתך, על מנת לשלוט בגדם הלבלב. משוך בזהירות את הלבלב בזנב וצרוב את כלי הגסטרו טחול בין קוטב הגולגולת של הטחול לקיבה. יש לזכור כי כלי הדם קטנים ועלולים לדמם בקלות אם הם נשרפים או לא נצרבים כראוי.כלי דם כאלה עלולים לסגת לחלל הבטן ולגרום לדימום, שעלול להיות קשה לשליטה. הסר את הדגימה ובדוק את אתר הניתוח כדי לאשר המוסטזיס. סגור את דופן הבטן בתפר חומצה פוליגליקולית 5-0 בצורה רציפה וסגור את העור בעזרת קליפסים.מתוך 59 עכברים רצופים שעברו ניתוח השתלה, דליפה גסה התרחשה בשמונה עכברים. לאחר שלושה שבועות של צמיחת הגידול, ההדמיה הביולוגית לפני הכריתה אפשרה להוציא עכברים עם מחלה גרורתית גסה מכריתה כירורגית. זה השאיר 45 עכברים שהמשיכו לכריתת לבלב.ההליך בוצע בהצלחה ב-100% מהעכברים. שולי לבלב פרוקסימליים מקרוסקופיים, גדולים מחמישה מילימטרים הושגו ב -43 מהעכברים הללו. בזמן הכריתה נמצאה גרורות מקומיות בתשעה מתוך 45 עכברים.בנוסף לגרורות לקו התפר, גושים גרורתיים מבודדים על העקומה הגדולה יותר של הקיבה נצפו בשלושה עכברים וגוש תת-קפסולרי על הכבד בעכבר אחד. פלישה מקומית נוספת ללבלב התרחשה בשישה עכברים עם פלישה ישירה לקו התפרים בחמישה עכברים ולכבד בעכבר אחד. שבוע לאחר הכריתה, ל-32 עכברים היה יחס קרינה מקסימלי של פחות מ-10, מה שמצביע על מחלה מינימלית או ללא מחלה שיורית.זמן הניתוח הממוצע מזירוז ההרדמה ועד הסגירה היה 22 דקות. שלב המפתח בהליך הכריתה הוא זיהוי המישור העוברי חסר הדם הגבי לכלי הטחול וללבלב. ניתוח מישור זה משחרר קטע מהלבלב לקשירה שלאחר מכן.לאחר הכריתה, ניתן לטפל בעכברים בטיפולים משלימים. לאחר מכן ניתן להעריך את התקדמות המחלה, באמצעות הדמיה ביולומינסנציה בשילוב עם ממצאי נקרופסיה והישרדות בעלי חיים, בהתאם לפרוטוקולי האתיקה המקומיים של בעלי חיים.

an-orthotopic-resectional-mouse-model-of-pancreatic-cancer

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

שתי טכניקות שניתן להשתמש בהם כדי לבסס את המודל הזה: הזרקה של השעיה תא סרטני בקיר cecal או השתלה של פיסת גידול תת עורי על cecum. מודל זה שימושי לחקר התפתחות טבעית של סרטן המעי הגס בדיקות סוכני טיפולית חדשה נגד סרטן המעי הגס.

עכבר דגם orthotopic של סרטן המעי הגס

הסרטון מסביר שיטה כירורגית מדורגת להשתלה אורתוטופית של קטע גידול מתורם סרטני ללבלב של עכברים מושתלים שאינם סרטניים לצורך התפתחות סרטן הלבלב. PDAC מושתל אורתוטופית יכול ללכוד מחדש את המיקרו-סביבה הרקמתית של סרטן הלבלב האנושי מאשר מודלים תת-עוריים קונבנציונליים (SC) בצורה מדויקת יותר.

השתלת גידול הומוגרפט אורתוטופית: טכניקה ליצירת מודלים של עכברי גידול בלבלב

סרטון זה מדגים מודל אורתוטופי של סרטן הלבלב המשתמש במטריג'ל להעברת תאים מקומית והדמיית ביולומינסנציה in vivo לניטור לא פולשני של התקדמות הגידול. המודל האורתוטופי מתאים הן למודלים סינגניים והן למודלים של קסנוגרפט, וניתן להשתמש בו בניסויים פרה-קליניים כדי לחקור את ההשפעה של טיפולים אנטי-סרטניים חדשניים על צמיחת הגידול הראשוני בלבלב וגרורות.

מודל עכבר סרטן לבלב אורתוטופי ביולומינסנטי: טכניקה לא פולשנית למעקב אחר התקדמות סרטן בעכברים

הבנה משופרת של ביולוגיה של סרטן הלבלב היא צורך קריטי כדי לאפשר הפיתוח של אפשרויות טיפוליות טובות יותר לטיפול בסרטן הלבלב. כדי לענות על צורך זה, אנו מדגימים מודל orthotopic של סרטן הלבלב המאפשר ניטור בלתי פולשני של התקדמות הסרטן...

דגם orthotopic bioluminescent של התקדמות סרטן הלבלב

מודל פרה קליני, עכברי של גרורות בכבד מבוצע באמצעות טכניקת הזרקת hemispleen.

דגם Murine פרה של גרורות כבדית

מטרת פרוטוקול זה היא ליישם הדמיית תהודה מגנטית משופרת בניגודיות דינמית (DCE-MRI) עבור השתלות גידול לבלב אורתוטופי בעכברים. DCE-MRI היא שיטה לא פולשנית לניתוח מיקרו-כלי דם ברקמת מטרה, ושימושית להערכת תגובת כלי הדם בגידול לאחר טיפול חדשני.

הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר

הליך להשתלת תאי סרטן לבלב פלואורסצנטיים ירוקים המבטאים חלבון פלואורסצנטי (PANC-1 GFP) באופן אורתוטופי לתוך הלבלב של עכברי Balb-c Ola Hsd-Fox1nu כדי להעריך את התקדמות הגידול והגרורות מוצג כאן.

דגם פלורסנט Orthotopic עכבר של סרטן הלבלב

אלקטרופורציה בלתי הפיך (חמתו) היא טכניקה-thermal אבלציה המשמשת לטיפול של סרטן לבלב מקומי מתקדם. להיות טכניקה חדשה יחסית, ההשפעות של חמתו על הגידול הם הבינו כהלכה. פיתחנו מודל העכבר syngeneic המאפשרת לימוד השפעת חמתו על סרטן הלבלב.

דגם העכבר סרטן הלבלב Syngeneic ללמוד את השפעות בלתי הפיכות אלקטרופורציה

אנו מתארים פרוטוקול עבור אולטרסאונד השרשה המודרכת של הלבלב הנגזר מוראן של דוטל לבלב שורות תאים ישירות לתוך אתר הגידול הטבעי. גישה זו הביא לגידולים בלבלב לגילוי על ידי סריקת אולטרסאונד בתוך 2-4 שבועות של הזרקה, והקטינה באופן משמעותי את הגידול בפרופורציה של תאים בקיר הצפק לעומת השרשה כירורגית אורתודפית.

אולטרה סאונד-הדרכה אורתודפית של הלבלב מורלין אדנוקרצינומה

פרוטוקול זה מתאר את הדור כירורגי של גידולים הלבלב אורתודפית ואת העיכול המהיר של גידולים מבודדים מבודד מורטין הלבלב. לאחר העיכול, אוכלוסיות קיימא תאים החיסונית יכול לשמש ניתוח נוסף במורד הזרם, כולל לשעבר גירוי vivo של תאים T לאיתור ציטוקינים תאיים ידי הזרימה cy, try.

הדור של הלבלב אורתוטואט גידולים ואפיון Vivo Ex של תאים הסתננות של הגידול תא T

אלושתלים אורתוטופיים סינגניים של אדנוקרצינומה צינורית הלבלב (PDAC) משחזרים את הביולוגיה, הפנוטיפים והתגובות הטיפוליות של תת-סוגי מחלות. בשל התקדמות הגידול המהירה והניתנת לשחזור, הם נמצאים בשימוש נרחב במחקרים פרה-קליניים. כאן, אנו מראים שיטות עבודה נפוצות ליצירת מודלים אלה, הזרקת תרביות PDAC מורין סינגני לתוך הלבלב.

Syngeneic Mouse Orthotopic Allografts למודל סרטן הלבלב

חקור מודל כירורגי אורתוטופי לכריתת סרטן הלבלב בעכברים. שיטה זו משלבת השתלה אורתוטופית עם טכניקת כריתה בטוחה לבדיקת טיפולים אדג'ובנטיים וניאו-אדג'ובנטיים במחקר אונקולוגי.

מודל עכבר כריתה אורתוטופי של סרטן הלבלב

גלה סרטונים נוספים