Tomografia fotoacustica per l'immagine di sangue e lipidi nell'aorta infrarenale
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La seguente procedura descrive i metodi necessari per impostare VPAT per l'imaging ematico e lipidico dell'aorta infrarenale in topi con deficit di apolipoproteina-E (apoE-/-).
1. Accoppiamento laser-ultrasuoni
Ottenere un laser a oscillatore ottico parametrico pulsato Nd:YAG e un sistema ad ultrasuoni. Acquisire un generatore di impulsi, 1 cavo BNC e un connettore D collegato a due cavi BNC.
Utilizzando la configurazione del connettore D, collegare il cavo BNC "Fire" alla porta A del generatore di impulsi e "Q-switch" alla porta B del generatore di impulsi. Infine, collegare un cavo BNC dalla porta C per "innescare" sul retro del sistema a ultrasuoni.
Allineare il cavo in fibra ottica con il laser e collegare le estremità della fibra ai lati del trasduttore a ultrasuoni a 40 MHz.
Regolare il ritardo delle porte A, B e C in funzione dei valori elencati qui (Porta A: 0,00000000, porta B: 0,00021440, porta C: 0,00000910). Impostare le porte A e B sul segnale invertito e la porta C sul segnale normale.
2. Preparazione degli animali e acquisizione di immagini
Anestetizzare un mouse apoE-/- usando il 3% di isoflurano in una camera di induzione dell'anestesia. Una volta che l'animale è anestetizzato, spostare il mouse su un cono nasale per fornire l'1-2% di isoflurano.
Applicare la lubrificazione oculare agli occhi degli animali per prevenire l'essiccazione corneale. Fissare le zampe del topo agli elettrodi integrati nello stadio riscaldato per monitorare la respirazione e la frequenza cardiaca dell'animale. Infine, inserire la sonda rettale per monitorare la temperatura corporea.
Applicare la crema depilatoria per rimuovere i peli dall'addome dell'animale. Pulire dopo 30 s con una garza.
Posizionare il trasduttore ad ultrasuoni sull'addome dell'animale e individuare l'aorta infrarenale. La vena renale sinistra e la triforcazione aortica nell'arteria della coda sono due punti di riferimento che aiuteranno l'utente a localizzare quest'area.
Eseguire il laser per emettere luce a 1100 nm per indirizzare il sangue seguito da una luce a 1210 nm per indirizzare il lipide. Utilizzare occhiali di sicurezza laser appropriati quando il laser è in uso.
Fonte: Gurneet S. Sangha e Craig J. Goergen,Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, West Lafayette, Indiana