Quantificazione della formazione di increspature della membrana mediante microscopia elettronica a scansione

Gli stimolatori esterni attivano le cellule e inducono la protrusione tridimensionale circolare della membrana, o formazione di increspature della membrana, essenziali per varie attività cellulari.

Per visualizzare la formazione di increspature della membrana, iniziare con una piastra a più pozzetti contenente un vetrino coprioggetti alla base. La parte superiore del vetrino coprioggetto ha macrofagi coltivati.

Trattare questi macrofagi con molecole stimolatrici che attivano le cellule, facilitando la riorganizzazione del citoscheletro e la formazione della protrusione della membrana. Sovrapporre le cellule con una soluzione fissativa, reticolando le proteine e preservando la struttura cellulare.

Trattare i macrofagi fissi con concentrazioni crescenti di alcol per una completa disidratazione. Essiccare questi macrofagi utilizzando un essiccatore a punto critico, eliminando qualsiasi traccia di acqua per un migliore imaging.

Montare il vetrino coprioggetti su un supporto per microscopia elettronica a scansione, o SEM, utilizzando nastro conduttivo. Rivestire il vetrino coprioggetti contenente macrofagi con un sottile strato di metallo, garantendo una buona conduttività elettronica d