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DOI: 10.3791/52576-v
Angela Rossi*1, Antje Appelt-Menzel*1, Szymon Kurdyn1, Heike Walles1,2, Florian Groeber2
1Department for Tissue Engineering and Regenerative Medicine,University Hospital Würzburg, 2Translational Center Würzburg, Regenerative Therapies in Oncology and Musculoskelettal Disease,Würzburg Branch of the Fraunhofer-Institute Interfacial Engineering and Biotechnology, IGB
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L'obiettivo di questo protocollo è quello di costruire un equivalente tridimensionale a tutto spessore della pelle, che assomiglia alla pelle naturale. Con un dispositivo di ferimento automatizzato appositamente costruito, è possibile generare ferite precise e riproducibili in caso di mantenimento della sterilità.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di costruire un equivalente cutaneo tridimensionale a tutto spessore, che assomigli alla pelle naturale e di generare ferite precise e riproducibili in condizioni sterili utilizzando un dispositivo di ferita automatizzato. Ciò si ottiene incorporando prima i fibroblasti dermici umani primari in un idrogel di collagene. Successivamente, i cheratinociti epidermici umani primari sono posizionati sulla parte superiore dell'idrogel rivestito di fibronectina.
Quindi il modello viene coltivato in condizioni sommerse e quindi sotto un'interfaccia aria-liquido, si forma un equivalente cutaneo tridimensionale a tutto spessore, composto da una componente dermica e da un'epidermide multistrato. Infine, una ferita standardizzata viene generata in un ambiente sterile. Infine, la colorazione immunoistochimica e la microscopia vengono utilizzate per valutare la struttura istologica dell'equivalente cutaneo a tutto spessore ferito.
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