Vena interposizione Modello: un modello adatto per studiare Bypass Graft pervietà

L'obiettivo generale di questa procedura è studiare la pervietà dell'innesto di bypass in un modello di interposizione venosa di ratto. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della chirurgia di bypass, come il percorso sottostante dei processi biologici e fisiologici durante l'occlusione di bypass. Il vantaggio principale di questa tecnica è che la procedura chirurgica è facile e veloce, che può essere utilizzata per studiare nuove terapie e tratti in vivo.

A dimostrare la tecnica sarà Grigol Tediashvili, un microchirurgo del nostro laboratorio. Prima dell'intervento, verificare la presenza di una profondità sufficiente di anestesia pizzicando le zampe posteriori del ratto e verificando l'assenza di riflessi. Quindi, applica un unguento veterinario sugli occhi per prevenire la secchezza durante l'anestesia.

Quindi, allarga le zampe posteriori e fissa la loro posizione con del nastro adesivo. Quindi, radere i peli inguinali con un tagliacapelli, quindi disinfettare ampiamente l'area con iodio povidone seguito da alcol all'80%. Ripeti questi scrub alternati per un totale di tre volte.

Ora al microscopio, eseguire un'incisione verticale lungo la linea inguinale. Quindi, utilizzare due pinze per separare delicatamente i tessuti sottocutanei ed esporre la vena epigastrica superficiale fino alla sua origine sulla vena femorale. Fallo con molta attenzione, poiché la vena è fragile.

Successivamente, arrestare il flusso sanguigno attraverso la vena epigastrica superficiale utilizzando due pinze. Ora, raccogli un segmento della vena. Sollevare con cautela la vena isolata e tagliare il recipiente usando le microforbici.

Quindi, posizionare il segmento di vena su una garza sterile. Lì, fai scorrere con cautela un ago calibro 30 in un'estremità e lava la vena con l'eparina. Quindi, trasferisci la vena in lidocaina all'1% e tienila sul ghiaccio per evitare spasmi.

Ora, sopprimere il ratto donatore aumentando l'anestesia al 5% di isoflurano. Successivamente, in preparazione per le anastamosi, preparare il ratto ricevente allo stesso modo del ratto donatore fino alla fase di rasatura. Dopo due o tre minuti di isoflurano al 5%, aprire l'addome del ratto donatore lungo la linea alba, tagliare il diaframma e rimuovere il cuore per fermare la circolazione.

Continua a preparare il ratto ricevente per l'intervento chirurgico. Radere il lato mediale delle gambe con un tagliacapelli e disinfettare la pelle con tre scrub alternati di iodio povidone ed etanolo all'80%. Prima di procedere ulteriormente, eseguire un altro pizzicamento delle dita dei piedi per monitorare l'anestesia.

Ora, eseguire un'incisione femorale mediana dal ginocchio alla piega inguinale. Al microscopio, utilizzare due pinze per separare l'arteria femorale dall'ambiente circostante. Quindi, utilizzare due micro morsetti per fermare il flusso sanguigno, posizionando prima il morsetto prossimale.

Quindi, ritaglia un breve segmento dell'arteria femorale bloccata e scartalo. Accorciare il moncone arterioso rimanente per lasciare uno spazio da uno a due millimetri più grande dell'innesto venoso. Quindi, sciacquare il moncone arterioso con eparina da un ago calibro 30.

Se l'avventizia sporge leggermente oltre il moncone del vaso, usa una pinza per tirare leggermente l'avventizia oltre l'estremità del vaso, quindi rimuovi un pezzo di avventizia. Ora, posiziona il segmento di vena prelevato tra i monconi arteriosi con l'orientamento corretto e regola la dimensione dello spazio per una buona vestibilità. Ora, eseguire prima l'anastomosi prossimale utilizzando la sutura in prolene 10-0.

Inizia con la sutura di ciascun lato laterale, quindi aggiungi altre tre suture al lato ventrale. Terminare con tre maglie sul lato dorsale. Successivamente, collega i vasi distali utilizzando la stessa tecnica, iniziando con una sutura su ciascun lato laterale, seguita da tre suture sul lato ventrale e quindi terminando sul lato dorsale.

Dopo aver completato le anastomosi, caricare due siringhe da un millilitro con i componenti della colla di fibrina. Quindi, sollevare con cautela l'innesto con una pinza e applicare circa 100 microlitri del componente uno sotto l'innesto, seguiti da 100 microlitri del componente due. I due componenti devono essere sempre aggiunti negli stessi volumi.

Ora, riposiziona l'innesto nella sua posizione e applica 100 microlitri di ciascun componente sull'innesto per coprire completamente l'innesto e l'anastomosi. Ciò previene l'insufficienza anastomotica e la sovradistensione dell'innesto venoso. Ora, apri con cautela i morsetti iniziando dal morsetto distale.

Quindi, confermare l'esito positivo dell'intervento chirurgico verificando la presenza di un polso visibile nella vena trapiantata e nell'arteria distale dell'innesto. Prima di chiudere la pelle, rimuovere l'eventuale eccesso di colla che potrebbe ostacolare la chiusura. Quindi, chiudere gli strati cutanei utilizzando suture di prolene 5-0.

Prima che il ratto si svegli, iniettare da quattro a cinque milligrammi di carprofene per chilogrammo per via sottocutanea. Tenere d'occhio l'animale fino a quando non ha riacquistato sufficiente coscienza per mantenere la decubito sternale. Quindi, dai al topo una gabbia domestica senza altri animali.

Per i prossimi tre giorni, fornire metamizolo nell'acqua potabile e controllare quotidianamente il recupero del ratto. Una volta completamente recuperato, il ratto può essere alloggiato con altri ratti. Gli animali si riprendono bene dall'intervento chirurgico e hanno mostrato eccellenti condizioni fisiche dopo l'operazione.

Il successo dell'integrazione della vena nell'arteria femorale e la pervietà dell'innesto dopo il trapianto sono stati confermati in modo non invasivo utilizzando l'ecografia duplex. Trapiantando la vena di un ratto luke-positivo in un ratto luke-negativo, è stata utilizzata l'imaging a bioluminescenza per monitorare la presenza dell'innesto. È stato riscontrato che l'iperplasia miointimale si sviluppa progressivamente nell'innesto nel tempo.

La colorazione istologica con la tricromica di Masson dimostra la formazione di miointima all'interno della lamina elastica interna. Per confermare che il modello riproduce la dinamica dell'iperplasia miointimale, è stata misurata l'obliterazione luminale. È stata osservata una graduale perdita di pervietà dell'innesto da sette giorni a 28 giorni dopo l'intervento, che si adatta perfettamente al modello.

Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 20 minuti se eseguita correttamente. Grazie per aver guardato e buona fortuna con i tuoi esperimenti.