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Un protocollo di estrazione del DNA delle zanzare a base di perline magnetiche per il sequenziame...
Un protocollo di estrazione del DNA delle zanzare a base di perline magnetiche per il sequenziame...
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JoVE Journal Biology
A Magnetic-Bead-Based Mosquito DNA Extraction Protocol for Next-Generation Sequencing

Un protocollo di estrazione del DNA delle zanzare a base di perline magnetiche per il sequenziamento di nuova generazione

Full Text
7,178 Views
05:34 min
April 15, 2021

DOI: 10.3791/62354-v

Tse-Yu Chen1, Adam E. Vorsino2, Kyle J. Kosinski1, Ana L. Romero-Weaver1, Eva A. Buckner1, Joanna C. Chiu3, Yoosook Lee1

1Florida Medical Entomology Laboratory, Department of Entomology and Nematology, Institute of Food and Agricultural Sciences,University of Florida, 2U. S. Fish and Wildlife Service, Pacific Islands Fish and Wildlife Office, 3Department of Entomology and Nematology,University of California Davis

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Qui descritto è un protocollo di estrazione del DNA che utilizza perline magnetiche per produrre estrazioni di DNA di alta qualità dalle zanzare. Queste estrazioni sono adatte per un approccio di sequenziamento di nuova generazione a valle.

Questo protocollo di estrazione del DNA basato su perline magnetiche a basso budget rende il sequenziamento ad alta produttività accessibile a laboratori e studi limitati alle risorse. Questo protocollo non richiede apparecchiature costose per l'estrazione del DNA di alta qualità e può essere utile in determinate situazioni diagnostiche o di ricerca in cui ottenere una quantità sufficiente di DNA con una qualità per il sequenziamento ad alta produttività è impegnativo. Questo protocollo è facile da replicare con una dimostrazione una sola volta.

Dovrebbe essere provato prima con un piccolo numero di campioni per familiarizzare con il flusso di lavoro. Per iniziare, idratare i campioni di tessuto di zanzara conservati in più del 70% di alcol aggiungendo 100 microlitri di acqua di grado PCR e incubando per un'ora a quattro gradi Celsius per ammorbidire il tessuto. Dopo l'incubazione, scartare l'acqua e aggiungere 100 microlitri di miscela enzimatica tampone Proteinasi K.

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