Coltivare e manipolare geneticamente i nematodi entomopatogeni

Un protocollo efficace per mantenere e amplificare il nematode entomopatogeno è essenziale per comprendere le basi molecolari della patogenicità dei nematodi e dell'immunità anti-nematodi dell'ospite. Questo protocollo ci consente di produrre un elevato numero di Heterorhabditis bacteriophora simbiotici e ascinici e Steinernema carpocapsae IJ utilizzando l'ospite insetto, Galleria mellonella. Iniziate coprendo la capsula di Petri con un pezzo di carta da filtro e aggiungete circa 10-15 larve di Galleria mellonella.

Usando una pipetta, erogare due millilitri di acqua contenenti circa 25-50 giovani infettivi per 10 microlitri di sospensione sui vermi di cera. E conservare la capsula di Petri in un armadietto a temperatura ambiente. A seconda dell'umidità della carta da filtro, aggiungere uno o due millilitri di acqua ogni due giorni.