Name: Analisi specifica del sottotipo cellulare del proteasoma della membrana neuronale nei neuroni somatosensoriali (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-10T13:20:00.000+00:00
Duration: 9 min 27 s
Description: Scopri un protocollo specifico per neuroni per analizzare il proteasoma della membrana neuronale nei gangli della radice dorsale. Questo metodo consente di isolare popolazioni cellulari vitali per studiare la modulazione del tatto e del dolore.

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<ol><li>Cartelli, D., Cavaletti, G., Lauria, G., Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ubiquitin+proteasome+system+and+microtubules+are+master+regulators+of+central+and+peripheral+nervous+system+axon+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Ubiquitin proteasome system and microtubules are master regulators of central and peripheral nervous system axon degeneration.</a> Cells. 11 (8), 1358(2022).</li>
<li>Fortun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+proteasome+activity+and+accumulation+of+ubiquitinated+substrates+in+a+hereditary+neuropathy+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Impaired proteasome activity and accumulation of ubiquitinated substrates in a hereditary neuropathy model.</a> J Neurochem. 92 (6), 1531-1541 (2005).</li>
<li>Thibaudeau, T. A., Smith, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+review+of+proteasome+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">A practical review of proteasome pharmacology.</a> Pharmacol Rev. 71 (2), 170-197 (2019).</li>
<li>Türker, F., Cook, E. K., Margolis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+proteasome+and+its+role+in+the+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">The proteasome and its role in the nervous system.</a> Cell Chem Biol. 28 (7), 903-917 (2021).</li>
<li>VerPlank, J. J. S., Lokireddy, S., Feltri, M. L., Goldberg, A. L., Wrabetz, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+protein+degradation+and+proteasome+function+in+hereditary+neuropathies%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Impairment of protein degradation and proteasome function in hereditary neuropathies.</a> Glia. 66 (2), 379-395 (2018).</li>
<li>Moss, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+of+the+ubiquitin-proteasome+system+in+neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A role of the ubiquitin-proteasome system in neuropathic pain.</a> J Neurosci. 22 (4), 1363-1372 (2002).</li>
<li>Meregalli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+painful+neuropathy+in+rats%3A+a+behavioral%2C+neurophysiological+and+pathological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pain%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced painful neuropathy in rats: a behavioral, neurophysiological and pathological study.</a> Eur J Pain. 14 (4), 343-350 (2010).</li>
<li>Meregalli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+bortezomib-induced+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxics%22%5BJournal%5D)">An overview of bortezomib-induced neurotoxicity.</a> Toxics. 3 (3), 294-303 (2015).</li>
<li>Velasco, R., Alberti, P., Bruna, J., Psimaras, D., Argyriou, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib+and+other+proteosome+inhibitors-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+from+pathogenesis+to+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Peripher+Nerv+Syst%22%5BJournal%5D)">Bortezomib and other proteosome inhibitors-induced peripheral neurotoxicity: from pathogenesis to treatment.</a> J Peripher Nerv Syst. 24 (Suppl 2), S52-S62 (2019).</li>
<li>Cavaletti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bortezomib-induced+peripheral+neurotoxicity%3A+a+neurophysiological+and+pathological+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Bortezomib-induced peripheral neurotoxicity: a neurophysiological and pathological study in the rat.</a> Exp Neurol. 204 (1), 317-325 (2007).</li>
<li>Cata, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+sensory+findings+in+patients+with+bortezomib-induced+pain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Quantitative sensory findings in patients with bortezomib-induced pain.</a> J Pain. 8 (4), 296-306 (2007).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+neuropathy+during+concomitant+administration+of+proteasome+inhibitors+and+factor+Xa+inhibitors%3A+identifying+the+likelihood+of+drug-drug+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Peripheral neuropathy during concomitant administration of proteasome inhibitors and factor Xa inhibitors: identifying the likelihood of drug-drug interactions.</a> Front Pharmacol. 13, 757415(2022).</li>
<li>Mina, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-marketing+analysis+of+peripheral+neuropathy+burden+with+new-generation+proteasome+inhibitors+using+the+FDA+adverse+event+reporting+system%5BTitle%5D)+AND+%22Turk+J+Hematol%22%5BJournal%5D)">Post-marketing analysis of peripheral neuropathy burden with new-generation proteasome inhibitors using the FDA adverse event reporting system.</a> Turk J Hematol. 38 (3), 218-221 (2021).</li>
<li>Holzer, A. -K., Suciu, I., Karreman, C., Goj, T., Leist, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+attenuation+of+purinergic+signaling+during+bortezomib-induced+peripheral+neuropathy+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Specific attenuation of purinergic signaling during bortezomib-induced peripheral neuropathy in vitro.</a> Int J Mol Sci. 23 (7), 3734(2022).</li>
<li>Meng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((a+potent+and+selective+proteasome+inhibitor%2C+exhibits+in+vivo+antiinflammatory+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">a potent and selective proteasome inhibitor, exhibits in vivo antiinflammatory activity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (18), 10403-10408 (1999).</li>
<li>Maupin-Furlow, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteasomes+and+protein+conjugation+across+domains+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Proteasomes and protein conjugation across domains of life.</a> Nat Rev Microbiol. 10 (2), 73-82 (2012).</li>
<li>Coux, O., Tanaka, K., Goldberg, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+functions+of+the+20S+and+26S+proteasomes%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Structure and functions of the 20S and 26S proteasomes.</a> Annu Rev Biochem. 65 (1), 801-847 (1996).</li>
<li>Groll, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+of+20S+proteasome+from+yeast+at+2.4+%C3%85+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structure of 20S proteasome from yeast at 2.4 Å resolution.</a> Nature. 386 (6624), 463-471 (1997).</li>
<li>Pines, J., Lindon, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteolysis%3A+anytime%2C+any+place%2C+anywhere%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Proteolysis: anytime, any place, anywhere.</a> Nat Cell Biol. 7 (8), 731-735 (2005).</li>
<li>Landeros, E. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nociceptive+activity+of+peripheral+sensory+neurons+is+modulated+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">The nociceptive activity of peripheral sensory neurons is modulated by the neuronal membrane proteasome.</a> Cell Rep. 43 (4), 114058(2024).</li>
<li>Qi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+DRG+genetic+toolkit+reveals+morphological+and+physiological+diversity+of+somatosensory+neuron+subtypes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A mouse DRG genetic toolkit reveals morphological and physiological diversity of somatosensory neuron subtypes.</a> Cell. 187 (6), 1508-1526.e16 (2024).</li>
<li>Sharif, B., Ase, A. R., Ribeiro-da-Silva, A., Séguéla, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+coding+of+itch+and+pain+by+a+subpopulation+of+primary+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Differential coding of itch and pain by a subpopulation of primary afferent neurons.</a> Neuron. 106 (6), 940-951.e4 (2020).</li>
<li>Krueger, E. R., Church, T. R., Brennan, A., Türker, F., Landeros, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+study+neuronal+membrane+proteasome+function+in+mouse+peripheral+sensory+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to study neuronal membrane proteasome function in mouse peripheral sensory neurons.</a> STAR Protoc. 6 (1), 103552(2025).</li>
<li>Chiu, M. L., Goulet, D. R., Teplyakov, A., Gilliland, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+structure+and+function%3A+the+basis+for+engineering+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Antibodies%22%5BJournal%5D)">Antibody structure and function: the basis for engineering therapeutics.</a> Antibodies. 8 (4), 55(2019).</li>
<li>Ramachandran, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity-dependent+degradation+of+the+nascentome+by+the+neuronal+membrane+proteasome%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell%22%5BJournal%5D)">Activity-dependent degradation of the nascentome by the neuronal membrane proteasome.</a> Mol Cell. 71 (1), 169-177.e6 (2018).</li>
<li>He, H. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+membrane+proteasomes+regulate+neuronal+circuit+activity+in+vivo+and+are+required+for+learning-induced+behavioral+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Neuronal membrane proteasomes regulate neuronal circuit activity in vivo and are required for learning-induced behavioral plasticity.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 120 (3), e2216537120(2023).</li>
<li>Paradise, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ApoE+isoforms+differentially+regulate+neuronal+membrane+proteasomes+to+shift+the+threshold+for+pathological+aggregation+of+endogenous+tau%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">ApoE isoforms differentially regulate neuronal membrane proteasomes to shift the threshold for pathological aggregation of endogenous tau.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Banker, G., Goslin, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBanker%2C+G+%22Culturing+nerve+cells%22">Culturing nerve cells</a>. , 2nd edn, MIT Press. (1998).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Soluzione tampone HEPES 1 M, pH 7,3</td><td>Qualità Biologica</td><td>118-089-721</td><td>Tampone FACS</td></tr><tr><td>10x PBS</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>70011-044</td><td>Tampone FACS</td></tr><tr><td>Soluzione madre di paraformaldeide (PFA) al 16%; Grado EM</td><td>EMS</td><td>15710</td><td>soluzione fissativa</td></tr><tr><td>1x soluzione salina tamponata con fosfato (PBS)</td><td>Fisher Scientifico</td><td>10-010-023</td><td>Lavaggi FACS</td></tr><tr><td>Provetta da 5 mL in polistirene a fondo tondo</td><td>Fisher Scientifico</td><td>14-959-6</td><td>Tubi FACS</td></tr><tr><td>7-amminoattinomicina D (7-AAD)</td><td>Invitrogen</td><td>Codice: A1310</td><td>Etichetta le celle morte</td></tr><tr><td>Supplemento B27</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>17504044</td><td>terreno di coltura</td></tr><tr><td>Albumina sierica bovina</td><td>MilliporeSigma</td><td>A9647; CAS: 9048-46-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Il cloruro di calcio diidrato (CaCl?-2H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Visualizzazione del materiale C7902</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Catena pesante anti-neurofilamento di pollo (NF-H)</td><td>MilliporeSigma</td><td>AB5539</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>11320033</td><td>terreno di coltura; BSA/TI/DMEM</td></tr><tr><td>Asino anti-capra IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 555</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>Codice: A32816</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Asino anti-coniglio IgG (H+L) Alexa Fluor Plus 488</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>A32790</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>DyLight 405 asino anti-pollo</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>703-475-155</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>MilliporeSigma</td><td>E5134; CAS: 6381-92-6</td><td>Soluzioni di lavoro Liberase TM/Liberase TL-papain</td></tr><tr><td>Siero fetale bovino (FBS)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Codice: A9647</td><td>terreno di coltura/tampone FACS/soluzione bloccante</td></tr><tr><td>Pipetta pasteur in vetro, 9 pollici</td><td>Fisher Scientifico</td><td>Codice 1367820D</td><td>Titolazione</td></tr><tr><td>Capra anti-PSMA2</td><td>Fatto in casa</td><td>NA</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>HEPES in polvere</td><td>MilliporeSigma</td><td>H4034</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>H21492</td><td>colorante nucleare</td></tr><tr><td>Siero per cavalli</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>26050070</td><td>soluzione bloccante</td></tr><tr><td>IB4, coniugato di biotina</td><td>MilliporeSigma</td><td>L2140</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Laminina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L2020-1MG</td><td>piatto di coltura</td></tr><tr><td>L-glutammina</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>25030081</td><td>terreno di coltura</td></tr><tr><td>Triturazione di Liberase bassa (TL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>54010200001</td><td>Soluzione stock Liberase TL</td></tr><tr><td>Liberase triturazione moderata (TM)</td><td>MilliporeSigma</td><td>5401119001</td><td>Soluzione stock Liberase TM</td></tr><tr><td>Il cloruro di magnesio esaidrato (MgCl?-6H? O)</td><td>MilliporeSigma</td><td>Codice: M2393</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Supporti di montaggio</td><td>Biotecnologie meridionali</td><td>0100-01</td><td>Fluoromount-G</td></tr><tr><td>Papaina</td><td>Worthington</td><td>Gatto#: 9001-73-4</td><td>Soluzione di lavoro Liberate TL-papain</td></tr><tr><td>Penicillina/streptomicina</td><td>MilliporeSigma</td><td>15140122</td><td>terreno di coltura/tampone FACS</td></tr><tr><td>Bromidrato di poli-L-lisina (PLL)</td><td>MilliporeSigma</td><td>P4707</td><td>piatto di coltura</td></tr><tr><td>Cloruro di potassio (KCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>P5405</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Coniglio anti-CGRP</td><td>Immunostar</td><td>24112</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>cloruro di sodio (NaCl)</td><td>MilliporeSigma</td><td>S9888; CAS: 7647-14-5</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Sorbitolo</td><td>MilliporeSigma</td><td>56755-M</td><td>Soluzione salina completa</td></tr><tr><td>Streptavidina Alexa Fluor 647 coniugato</td><td>Thermo Fisher Scientifico</td><td>S21374</td><td>anticorpo</td></tr><tr><td>Saccarosio</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S0389-500G</td><td>soluzione fissativa</td></tr><tr><td>Inibitore della tripsina</td><td>MilliporeSigma</td><td>T9253; CAS: 9035-91-8</td><td>BSA/TI/DMEM</td></tr></tbody></table>

analisi specifica del sottotipo cellulare del proteasoma della membrana neuronale nei neuroni somatosensoriali

Cell Subtype-specific Analysis of Neuronal Membrane Proteasome in Somatosensory Neurons

La capacità di distinguere tra NMP e proteasomi intracellulari si basa su approcci di marcatura impermeabili alla membrana. L'alimentazione degli anticorpi consente l'uso di anticorpi specifici per le subunità del proteasoma sui neuroni vivi per marcare i proteasomi accessibili solo dall'esterno della cellula. A causa delle loro dimensioni e idrofilia, gli anticorpi non sono in grado di attraversare le membrane cellulari intatte24. I neuroni vivi mantengono l'integ...

Analisi specifica del sottotipo cellulare del proteasoma della membrana neuronale nei neuroni somatosensoriali

Sensory neuron signaling depends on functional proteasomes, and their subcellular localization influences function. A specialized proteasome complex, the ...

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Un metodo per preparare traduzionali attivo, synaptoneurosomes intatto (SN) da topo corteccia cerebrale è descritto. Il metodo utilizza un discontinuo di Percoll-saccarosio gradiente di densità che permette per la preparazione veloce di SN attivo.

Preparazione di Synaptoneurosomes da mouse Cortex con un discontinuo di Percoll-Saccarosio gradiente di densità

Descriviamo un metodo per etichettare proteina sulla superficie dei neuroni viventi utilizzando un anticorpo policlonale specifico per epitopi extracellulari. Proteina legata per l'anticorpo sulla superficie cellulare e successivamente internalizzato tramite endocitosi può essere distinta dalla proteina rimanente, o trafficate, la superficie durante l'incubazione.

Etichettatura differenziale di Cell-superficie e interiorizzato Proteine ​​dopo Antibody Alimentazione dal vivo colture di neuroni

Questo articolo descrive l'arricchimento di proteine ​​associate con la membrana plasmatica sinaptica da ultracentrifugazione su gradiente di saccarosio discontinuo. La successiva preparazione di proteine ​​di densità post-sinaptica è anche descritto. Preparati proteici sono adatti per western blotting o l'analisi 2D DIGE.

Preparazione di Synaptic membrana plasmatica e Proteine ​​densità postsinaptica Utilizzo di un gradiente di saccarosio discontinuo

Le tecniche di microscopia ottica abbinate a saggi biochimici chiariscono il coinvolgimento dell'esocitosi mediata da SNARE nella ramificazione degli assoni netrina-dipendente. Questa combinazione di tecniche consente l'identificazione dei meccanismi molecolari che controllano la ramificazione degli assoni e il cambiamento della forma cellulare.

Utilizzando metodologie combinati per definire il ruolo della membrana plasmatica di consegna Durante Axon ramificazione e neuronale morfogenesi

Qui presentiamo un protocollo di frazionamento della membrana cerebrale che rappresenta una procedura robusta per isolare le proteine ​​appartenenti a diversi compartimenti sinaptici.

Frazione di membrana del cervello: An<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Approccio per valutare la localizzazione della proteina subsynaptica

Questo protocollo descrive le fasi critiche e le precauzioni necessarie per eseguire la singola cella multisala trascrizione d'inversione della polimerasi reazione a catena dopo patch clamp. Questa tecnica è un metodo semplice ed efficace per analizzare il profilo di espressione di un insieme predeterminato di geni da una singola cellula caratterizzata da registrazioni di patch-clamp.

Singola cella multisala trascrizione inversa Polymerase Chain Reaction dopo Patch-clamp

Questo protocollo è progettato per quantificare in modo efficiente l'attività del sistema upS (Ubiquitin-proteasome System) in diversi compartimenti cellulari del cervello dei roditori. Gli utenti sono in grado di esaminare il funzionamento dell'UPS nelle frazioni nucleari, citoplasmatiche e sinaptiche nello stesso animale, riducendo il tempo e il numero di animali necessari per eseguire queste complesse analisi.

Quantificare l'attività subcellulare ubiquitina-proteasoma nel cervello del roditore

La dissezione della crio-sezione consente la preparazione fresca e congelata della più grande nicchia neurogena nel cervello murino per l'analisi quantitativa profonda del proteoma. Il metodo è preciso, efficiente e provoca una minima perturbazione tissutale. Pertanto, è ideale per studiare il microambiente molecolare di questa nicchia, così come altri organi, regioni e specie.

Dissezione crio-sezione della zona subependimale adulta per un'analisi quantitativa accurata e profonda del proteoma

Un protocollo di proteomica di marcatura di prossimità del lisosoma neuronale è descritto qui per caratterizzare il microambiente lisosomiale dinamico nei neuroni derivati da cellule staminali pluripotenti indotte dall'uomo. Le proteine lisosomiali di membrana e le proteine che interagiscono con i lisosomi (stabilmente o transitoriamente) possono essere quantificate con precisione in questo metodo con un'eccellente risoluzione spaziale intracellulare nei neuroni umani vivi.

Caratterizzazione dell'interattoma del lisosoma neuronale con proteomica di marcatura di prossimità

Questo protocollo presenta un metodo robusto e dettagliato per ottenere sinaptosomi altamente puri, vescicole sinaptiche e altre frazioni sinaptiche dal cervello del topo. Questo metodo consente la valutazione dei processi sinaptici, compresa l'analisi biochimica della localizzazione e della funzione delle proteine con risoluzione compartimentale.

Frazionamento subcellulare per l'isolamento di componenti sinaptici dal cervello murino

Scopri un protocollo specifico per neuroni per analizzare il proteasoma della membrana neuronale nei gangli della radice dorsale. Questo metodo consente di isolare popolazioni cellulari vitali per studiare la modulazione del tatto e del dolore.

Analisi specifica del sottotipo cellulare del proteasoma della membrana neuronale nei neuroni somatosensoriali

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