1。 皮下注射
図 1。マウス皮下注射
2。 腹腔内投与
マウスこの注入技術の
図 2。マウスの腹腔内注射用ランドマーク
3. 筋肉内注射
図 3。ラットの臀筋に筋肉内注射します
4。 尾静脈を用いた静脈注射
図 4。マウスに静脈注射を尾します
ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学
として多くの研究プロトコールでは、物質が動物に注入することを必要とする、ルートの配信と物質の量は、正確には確認する必要があります。マウスとラットで利用できる管理のいくつかのルートがあります。使用するルートは、注入する物質のいくつかの要因によって決まります: ソリューション、所望の投与量と溶液の粘性に必要なボリュームの pH。厳しい組織の損傷は、物質が適切に管理されている場合に発生します。このビデオを見て様々 な拘束方法とほとんどの技術的な詳細が一般的に使用される注入ルート
。1。 皮下注射
図 1。マウス皮下注射
2。 腹腔内投与
マウスこの注入技術の
図 2。マウスの腹腔内注射用ランドマーク
3. 筋肉内注射
図 3。ラットの臀筋に筋肉内注射します
4。 尾静脈を用いた静脈注射
図 4。マウスに静脈注射を尾します
化合物の投与は、多くの場合、動物実験の不可欠な要素であり、化合物が正しく人道的な方法で送達されることを保証するために、多くの要素を評価する必要があります。2つの主要な投与経路は、消化管を介した経腸投与と消化管外の非経口投与です。主な違いは、化合物が経腸経路を介して投与される場合、血流に入る前に肝臓代謝を受けることです。一方、静脈内や筋肉内などの非経口経路では、この最初の通過が肝臓を通過するため、通常はバイオアベイラビリティが高くなります。
化合物投与に関するシリーズのこの最初のビデオでは、まず、一般的な投与経路の選択に影響を与える要因について説明します。次に、皮下注射(SCまたはSubQ)、腹腔内注射またはIP、筋肉内注射またはIM、静脈内注射(別名IV)など、最も一般的な非経口注射方法を確認します。
まず、あらゆる種類の化合物投与手順を実行する前に留意すべきいくつかの点を確認しましょう。最初のステップは、注入する溶液または懸濁液を調製することであり、物質調製の最初の基本的な考慮事項は無菌性です。動物への病原体の導入を防ぐためには、注射材料、および使用する針と注射器が無菌であることが重要です。
2 つ目の考慮事項は、生理学的な適合性です。投与溶液は、経腸投与か非経口投与かにかかわらず、化合物が適切に吸収され、組織の損傷を防ぐために、適切なpHに生理学的に緩衝する必要があります。3つ目の要因は、注射剤の粘度で、針の選択に重要な役割を果たします。通常、マウスやラットの非経口投与手順では、20〜30ゲージの針が使用されます。これらの針のハブは通常、識別を容易にするために色分けされています。
溶液は、これらの針の少なくとも1つを通過するのに十分な流動性を持っている必要があります。ソリューションが複数のものを通過できる場合、一般に、選択可能な最小ゲージです。次の要因は、シリンジの選択に影響を与える投与量です。針と同様に、正しい目盛りで正確な投与に必要な可能な限り小さなシリンジを選択する必要があります。針ゲージと投与量は、ルート、および投与される動物の種類、サイズ、および年齢にも依存します。このビデオで説明したルートに関連する値を確認するには、以下の表 1 を参照してください。最後に重要な考慮事項は吸収率であり、これは各投与経路によって大きく異なり、最適な方法を選択する上で役割を果たす可能性があります。
それでは、日常的に採用されている注射方法の特異な特徴についてお話ししましょう。
SCまたはSubQインジェクションは、皮膚を持ち上げることによって作成される仮想空間に、皮膚層と筋肉の間に材料を配置します。これにより、大量の安全な注入が可能になりますが、吸収速度は他のルートよりも遅く、より持続的な効果が得られます。IP投与中、化合物は腹腔内に直接注入されます。これも、大量の溶液を送達するために使用される一般的な方法です。IP注射は非経口投与と見なされますが、吸収メカニズムは実際には経口投与に似ています。
IM注射は、化合物を臀筋または腓腹筋に直接送達します。IMを注入した物質は、筋肉組織内の血管の数が多いため、急速に吸収されるため、場合によっては好ましい経路になる可能性があります。筋肉への不適切な注射や繰り返しの注射は、神経損傷を引き起こし、麻痺や筋肉の壊死を引き起こす可能性があります。最後に、動物の尾静脈へのIV注射は、物質が循環器系に直接導入されるため、最も効果的な投与経路です。化合物は、尾の側面にある外側尾尾静脈の1つに注入する必要があることに注意してください。尾の腹側正中線に沿って走る血管がありますが、これは注射目的には適していません。
さて、背景を説明してきたところで、SC注射から手順を学んでいきましょう。マウスの場合は、動物の尻尾をつまんで、ワイヤーバーの蓋などの別の安全な面で休ませます。次に、首の周りの皮膚を持ち上げて動物を手動で拘束し、テントを形成します。次に、後ろ足を表面につけて動物をテーブルに置き、手のかかとをテーブルに載せて、動物に過度の体重がかかって呼吸を損なわないようにします。
注射するには、注射する溶液の入った注射器を手に取り、針を脊椎と平行にして頭から離して、頭蓋骨に穿刺する可能性を避けます。次に、斜角を上に向けて針を挿入し、肌に優しく滑り込ませます。プランジャーを引き戻して、適切な針の配置を確認します。プランジャーを後ろに引いたときに背圧がある場合、針は正しい位置にあります。プランジャーに空気が引き込まれると、針を再配置する必要があります。
針がきちんと配置されていることを確認したら、安定した動きでゆっくりと注入します。注射後は一時停止し、注射物の損失を防ぐために、針を皮膚の下でわずかに回転させます。.次に、注射部位の皮膚をつまんで針を引き抜きます。これと同じ方法は、離乳ラットにも使用できます。
成体のラットの場合、まず動物を装置を使用して拘束する必要がありますが、その手順については、このコレクションの「取り扱いと拘束の基本」ビデオで説明しています。その後、マウスで行うのと同じ方法でSC注射を行うことができます。
次に、IPインジェクションの実行方法を学びます。マウスでは、両手拘束技術を使用して動物を手動で拘束します(これも「取り扱いと拘束の基本」ビデオで説明しています)。利き手でない手が首の十分な高さに配置され、動物が向きを変えるのを防ぐことを確認してください。尻尾を3本目と4本目の指の間に挟むか、残りの指と親指の付け根の間に皮膚をしっかりと固定して、後肢を安定させます。
次に、動物を腹部を露出させるように配置します。頭を下に向けて動物を傾けますか 30?腸が前方に落ちるように角度をつけます。注射のランドマークは、次のように概説できます:脇腹から脇腹まで、体を横切って水平に伸びる架空の線を引きます。次に、反対方向に成長する髪が交わる線に沿って、内側の境界線または正中線を描きます。最後に、男性では腰の上部から包皮まで、女性の乳頭に続く線である横方向の境界線を想像してください。これにより、安全なIP注入のための三角形の領域が得られます。
次に説明する方法は、IMインジェクションです。この手法をマウスとラットの両方で拘束するには、2人または拘束チューブを使用する必要があります。ここでは、拘束装置を利用した一人用メソッドについて解説します。
まず、動物をチューブに入れ、後ろ足を出して尻尾を引っ張って動物を配置します。次に、大腿骨の頭蓋部分で脇腹の皮膚をつかんで脚を伸ばし、窒息が曲がるのを防ぎます。次に、注射部位が見えるように拘束装置を配置します。
臀筋のランドマークを特定するには、大臀筋の後方にある臀筋量を特定します。骨を触診でき、大きな筋肉が感じられやすいです。ホックのポイントからテールまで伸びる正中線に注意してください。側面と内面の毛が合わさった畝が逆方向に伸びているのをよく見かけます。通常、注入は正中線から外側の側面に向かって行われます。腓腹筋はふくらはぎの筋肉であり、この筋肉への注射も後面から行うのが最適です。
臀筋の場合、位置するランドマークで、針を最大約5mmの深さまで挿入します。筋肉の損傷を防ぐために、注射中にシリンジの位置を変えることは避けてください。次に、吸引して、配置が血管ではなく筋肉内にあることを確認します。そして最後に、急速な注入は組織の外傷を引き起こすため、ゆっくりと着実に材料を注入します。挿入と同じルートに従って、針を垂直に取り外します。腓腹筋の場合は、針を最大3mmの深さまではめ込み、臀筋と同じように注射を行います。
最後に、げっ歯類の尾静脈にIV注射を行う方法を学びましょう。同じ方法がマウスとラットの両方に適用できます。
動物を円筒形の拘束チューブに入れ、MEDIUMに設定された電気加熱パッドを使用して動物の全身を約2〜5分間温めます。血管が拡張し、それが著しく大きくなるまで、動物を温め続けます。尾側尾静脈は尾の側面にあることを忘れないでください。腹側正中線にある動脈は、注射目的には適していません。拘束装置を回転させ、側尾静脈が上を向き、張力がかかった状態で保持されるように尾を配置します。過度の張力をかけないと、血管が伸びて血流が減少する可能性があります。
針をできるだけ遠位の血管の真上に斜めに置き、わずかな圧力を加えて針を脊椎と平行に尾に滑り込ませます。ゆっくりと流れるような動きで材料を注入し、注入材料によって血液が押し出されると血管が白くなることに注意してください。針が血管内にきちんと位置付けられていないと、注入時に強い抵抗が生じ、力を入れて注入すると材料が皮下空間に埋まり、尻尾が膨らんでしまいます。静脈内注射されるように設計された材料は、周囲の組織に腐食性である可能性があるため、すぐに停止してください。針を引っ込めて、尾にもっと頭蓋をくるように別の注射を試みます。注射が成功したら、針を引き抜き、注射部位に圧力をかけて、動物をケージに戻す前に良好な止血を確保します。
一般的な注射方法に慣れてきたところで、薬物送達以外のこれらの投与経路のいくつかの応用例を見てみましょう。
いくつかの実験では、マウスに特定の病原体を注射して感染を研究しています。ここでは、研究者たちは皮下経路を使用して、病変を引き起こす抗生物質耐性菌を導入し、これらの病変のサイズが病原体の病原性を読み取るのに役立ちました。さまざまな科学者が、全身送達後の幹細胞の分布と生存の研究に関心を持っています。この研究では、研究者は多発性硬化症動物モデルで遺伝的にタグ付けされた神経幹細胞の尾静脈注射を行い、注射された細胞の分布を脊髄と脳領域に特定しました。
別の実験では、研究者は筋ジストロフィーの動物モデルに蛍光タグ付き筋芽細胞を筋肉内に注射しました。その後、幹細胞の移植成功を分析するために生物発光を行いました。最後に、注射を使用して動物モデルを生成することもできます。これらの科学者たちは、強力な肝臓毒素であるジメチルニトロソアミンを雄のWistarラットに腹腔内注射して、肝線維症の動物モデルを作成し、肝臓疾患の発症を研究するために使用しました。
JoVEの化合物投与に関する第1回では、一般的に使用されている非経口注射について解説しています。最適な送達ルートは、注入された溶液のpH、容量、粘度など、いくつかの要因に基づいていることを忘れないでください。また、各手法には長所と短所があり、実験的なニーズに関連して考慮する必要があります。いつものように、ご覧いただきありがとうございます!
物質管理は、動物を使用する実験的プロトコルの一般的なコンポーネントです。配達のルートを選択すると、管理する動物、動物の大きさ、量と、流体の粘度を投与を担当する技術者の技術的な習熟度を含む、多くの要因を審議する必要があります。これらの要因を慎重に考慮する動物の幸福と実験の全体的な結果強化されます
。Chapters in this video
0:00
Overview
1:28
General Considerations for Compound Administration
3:31
Characteristics of the Different Injection Techniques
5:11
Subcutaneous Injection
7:00
Intraperitoneal Injection
9:00
Intramuscular Injection
11:03
Intravenous Injection via the Tail Vein
12:51
Applications
14:25
Summary
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