実験的転移性黒色腫マウスモデル:肺の黒色腫細胞の転移能を研究するためのプラットフォーム

- 実験的転移モデルは、血管内注射後に特定の部位で腫瘍細胞が血管外漏出および増殖する可能性を評価するのに役立ちます。まず、適切な培地を使用して、目的の濃度で黒色腫細胞の単一細胞懸濁液を調製します。サスペンションをシリンジに入れます。

次に、マウスをチャンバー内で拘束し、尻尾にアクセスできるように固定します。マウスを90度回転させて、その側静脈を視覚化します。ヒートランプを使用して周囲温度を上げ、尾静脈を拡張します。次に、針を尾の遠位端に向かって挿入し、準備した黒色腫細胞懸濁液を拡張した静脈に注入します。

注入された転移性腫瘍細胞は、循環器系を通って移動します。最終的に、これらの細胞の一部は、循環から肺などの離れた臓器に血管外漏出します。これらの腫瘍細胞は、新しい微小環境に適応して増殖し、実験的転移巣を確立します。

次のプロトコルでは、B16-BL6 メラノーマ細胞の尾静脈注射をマウス モデルに示して、その転移可能性を研究します。

- すべてのB16-BL6細胞懸濁液を調製した後、マウスを選択します。尻尾を持って、動物を最初に後部に誘導し、拘束具に入れます。マウスの胴体がメインチャンバーにあり、その尾が装置の外側にあるときは、動物を拘束具の端に向かって引っ張ります。

次に、レストレインプランジャーを挿入し、マウスが固定されるまでプランジャーを押し続けます。動物が所定の位置に配置されたら、側尾静脈の1つが上を向くようにマウスを90度回転させます。次に、アルコールパッドを使用して、静脈が最も見えるマウスの尾の側面を精力的に清掃します。

注射の準備をするには、まず、1ミリリットルあたり50万個の細胞懸濁液のうち300マイクロリットルを注射器に集めます。その後、シリンジを反転させ、側面をはじき、プランジャーを押して、シリンジから気泡を排出します。気泡が除去されたら、細胞培養物を排出して、シリンジ内で最終容量250マイクロリットルを生成します。

利き手ではない手でマウスの尻尾を伸ばします。人差し指が尾の近位端を持ち上げ、親指が遠位部分を押し下げるように持ちます。利き手で、針を尾の遠位端に向かって静脈に、分の下向きの角度で挿入します。次に、針をさらに挿入し、尾静脈の角度と一致するように調整します。

針を針が挿入した後、尾静脈に約1センチメートル入ったところで、シリンジをしっかりと保持しながらプランジャーを押し始めます。エントリーサイトにガーゼをかざして出血を止めます。細胞懸濁液が排出されたら、静脈から針を取り外して廃棄します。次に、プランジャーを拘束装置から取り外し、マウスをレシーバーケージに入れます。

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