電気刺激を用いたラットモデルにおける急性ポンス梗塞の誘導

麻酔をかけたラットを定位固定装置に固定します。

頭皮から毛を取り除き、切開部位を消毒します。正中線を切開し、皮膚を引っ込めて頭蓋骨を露出させます。

ドリルとの干渉を避けるために結合組織を取り除きます。脳幹にある構造である橋の座標を決定するための基準点としてブレグマを特定します。

頭蓋骨に穴を開けます。

穴にプローブを挿入して橋に到達します。

次に、電極を電気刺激装置に接続し、脳刺激用のプローブに陽極を取り付け、ラットの耳に陰極を取り付けて回路を完成させます。

橋に電気パルスを送り、局所的な組織損傷または梗塞を誘発します。

刺激後、刺激効果を安定させるためにプローブを短時間そのままにしてままにします。

次に、プローブをゆっくりと取り外し、手術部位を骨セメントで密閉します。

切開部を縫合し、回復と神経学的分析のためにラットをケージに戻します。

麻酔直前に加熱パッドを摂氏37度に予熱し、頭蓋骨ドリルを定位固定フレームのホルダーに取り付けます。最初に麻酔したラットのペダル反射に対する反応の欠如を確認し、ラットを加熱パッド上の腹臥位で定位固定フレームに取り付けます。耳棒を外耳道の上に配置して頭を固定し、注射の歪みを避けるために頭蓋骨が水平に保つように注意します。

動物の目に軟膏を塗り、マイクロシェーバーを使用して頭蓋骨から毛を取り除きます。マーカーを使用して、両側外眼角の線から後泉門の後ろの0.5センチメートルまで、頭蓋骨の正中線に沿って3センチメートルの線を引き、メスを使用してマークされた線に沿って正中線を切開します。綿棒を使用して血液を取り除き、皮膚皮弁の両側にサージカルテープを貼って頭蓋骨を露出させます。

0.9%塩化ナトリウムを染み込ませた新しい綿棒を使用して、頭蓋骨から結合組織をそっと取り除き、ブレグマを見つけます。先端の細いマーカーペンを使用して、ブレグマの中心点を原点として示します。ドリルを前後6ミリメートル、内側外側2ミリメートルに配置します。ドリルを使用して、直径1ミリメートルの開頭術を慎重に行います。次に、ドリルを絶縁シース付きの 22 ゲージ プローブに交換し、先端をシースの近位端から 2 mm 上に配置します。

シースを脳に7ミリメートル挿入し、プローブの上部が脳の表面から9ミリメートル下になるまでシースに沿ってプローブを前進させます。電極を電気刺激装置に接続し、陽極をプローブに接続します。次に、カソードをネズミの耳に接続します。次に、電気刺激装置の電源を入れ、単一パルス幅を 4,050 ミリ秒、電圧を 50 ボルト、電流を 4 ミリアンペアに設定します。

刺激後、脳からデバイスを取り外す前に、プローブを所定の位置に5分間置いてください。開頭術を骨セメントで覆い、セメントを乾燥させてから、4-0ポリアミド縫合糸フィラメントを使用して創傷を閉じます。3〜4針縫った後、2-1-1の標準的な外科用結び目を作ります。次に、ラットに250マイクロリットルのペニシリンを腹腔内注射し、動物をケージに戻す前に完全に目覚めるまで15分ごとにラットを監視します。