滴タイトルセルのカプセル化

私の名前はハン・ムーンです。私はコンドームの教授と一緒に働いています。彼と私はXYJステージを使って細胞の3次元構造を作ります。

こんにちは、私はPEとLynnで、細胞カプセル化とメディアとゲルを使用した細胞印刷プロジェクトに取り組んでいます。これは、細胞培地上の細胞および細胞混合物のarosの放出のためのソレノイドである。SOバルブは2つの信号線によって作動します。

信号線はここのドライボードから来ています。ここから信号が来ました。その行からその行を通し、その行が関数優先ジェネレータです。

したがって、最初にプログラムは方法によって生成されます。したがって、必要に応じて、財布を変更したい場合は、そのスイッチラインでプログラムを変更したり、そのプロセスジェネレーターをコンピューターに制御したりできます。セルラーバルブは電気信号によって開閉されますが、セルはそのラインを介して供給されます。

細胞および培地またはアグロゲルは、シリンジシリンジを介して供給される。シリンジは水の中、シリンジの内側は空気によるプレスライトです。加圧された空気は、ここラインのようなタンクから供給されます。

したがって、小さなラインと化された空気はエアフィルターを通って飛んでいます。エアフィルターは、ほこりやその他の種類の汚れを識別できます。それは、私たちがそれを呼ぶ圧力発生器であり、ソーラーエアベルを開くか、ソーラーエアバルブコンピュータを閉じるために使用される信号を生成しています。

そのため、USBポートは、コンピューターであるラップトップコンピューターで直接使用できます。つまり、こちらはこちら側につながっています。そして、ここでコントロールラップトップを介して制御できます。

ですから、ステージの動きを同期させたい場合やベルを開くのは、ノートパソコンと同じコントローラーで制御できるんです。だから、開くタイミング、閉じるタイミング、動くタイミング、止まるタイミングをコントロールできるんです。そして、モーションとオープニングベルを同期させることができます。

そのステージが電動ステージです。死亡信号線とモーターを介して自動的に移動します。したがって、モータリゼーションは0.1マイクロメートルです。

そのため、理想的には100ミリメートルまでの線を引くことができます。つまり、ジェット軸はそのように上下に動いているのです。そのため、基板とソーラーベルトの間のキャップを制御します。

そのため、射出高さを制御できます。その基板は、ここはXYステージ、ここはX、あちらはYです。つまり、XYプランというプランで動いているのです。

そこで、いくつかの機能デモの右ステージは、X、X、Yの3つで、ジェットコンのジェット軸またはXY軸はここで信号によって制御され G.So。そこで、モーションコントローラーに信号線が接続されています。そのモーションコントローラーは、手動で制御できないため、手動スイッチはまったくありません。

ラップトップコンピュータを介して制御されます。つまり、ラップトップコンピュータが接続されています。コントローラーの裏側には、印刷セルXYジェット用のxが3つあります。

したがって、3つの異なる種類の信号を独立して作成します。そして、モーションコントローラーはrf 2、3、2コネクタを介して通信され、USVに直接接続されています。そして、USVはラップトップコンピューターに接続されます。

だからラップトップは借り手を制御しました。AutoCADプログラムを使用して、そのようにgenAパスを作成します。そして、そのように機械語に変わります。

だから、機械語は単純な文字や数字のようなものに転用されるんだ。X、Y、Zステージに関連する各位置があり、ここではファイルを選択し、その種類のプログラムを含んでから、そのようにダウンロードプログラムを開きます。そして、まったく同じように、テキストファイルから選択します。

テキストファイルがダウンロードされ、テキストファイルを選択すると、ラップトップからcomモーションコントローラーエグゼクティブに自動的にダウンロードされ、前に述べたようにBAMキャラクター、BAMになります。このフラスコには、N IH 3Gのマウスファイバーブラスト細胞が3個入っています。そして、私はまず古いメディアを熱望するつもりです。

このプロセスは、細胞を継代し、細胞をフラスコの底に接着することです。そこで、培地を吸引した後、酵素であるRYSを6つ入れます。大丈夫です。したがって、トリプシンがフラスコに入れられた後、細胞がフラスコの底から分離するまで3〜5分待つ必要があります。

これで、培地を入れて細胞を遠心チューブに継代する準備が整いました。これは 1 対 1 の希釈です。ですから、私はこのメディアを6ミリリットル入れて、のこぎりを少し洗い流して、すべてが通過していることを確認します。

そして今、細胞はこのチューブ内で遠心分離する準備ができています。次に、これらの細胞を1000RPMで3〜5分遠心分離します。細胞をスピンダウンしてペレット状にしたので、上清を吸引します。

次に、PBSで細胞を洗い流します。そして、これは細胞を染色するためのものです。私たちが使用している汚れはエステラーゼ基質です。

さて、今度は再び遠心分離機を動かし、細胞をスピンダウンして口蓋にします。そして、PBSを吸引し、細胞を樹脂化します。私は数えられるためにメディアにいます。

細胞を混合して、サンプルを採取するときに、濃度がチューブ全体に均一になるようにしています。次に、100マイクロリットルの細胞を採取して、細胞密度を測定します。今、私は100マイクロリットルのタイプと、汚れである青を入れています。

染色が死んだ細胞膜に浸透するまで3〜5分待ちます。セルを数えるとき、青いセルは数えません。細胞をヘモサイトメーターでカウントする準備ができたら、50マイクロリットルの細胞混合物をヘモサイトメーターの両側に移します。

さて、スライドガラス面で覆います。ヘモサイトメーターには2つの側面があります。最初の辺を数え、両方の辺を数えた後、平均を取り、青のタイプで1対1の希釈があったため、2を掛けます。

したがって、基本的に、細胞密度は1ミルあたり4個の細胞の10の135倍になります。私たちの実験では、50万細胞/ミルの濃度の細胞溶液を使用します。そして、1,350万個の細胞があるので、27ミルの培地で細胞を懸濁

2種類のステインを使用しています。これは、分子プローブからのライブデッドアッセイです。私たちの最初の染色はカルシウムアムと呼ばれます。

2つ目の染色はAUMホモダイマーと呼ばれます。死んだ細胞を染色します。青色の励起を使用して緑色の蛍光を取得し、緑色の励起を使用して赤色の蛍光を取得しますこれら2つの汚れの場合、イメージングしているとき、サイコロ溶液はPBSで調製されます。

そこで、まず、5ミルのPBSをチューブリン酸緩衝生理食塩水に移します。それが生理食塩水です。次に、ミルあたりのカルシウムを半マイクロリットル追加します。

今、私はチューブにカルシウムアムの2.5マイクロリットルとPBSのミルあたり2マイクロリットルのアホモダイマーを追加しています。これがbtexマシンです。これにより、細胞と培地が全ボリュームによく分布します。

次に、セルを200マイクロリットルにロードします。そして、キャップをかぶると、このようにしっかりと密閉された状態で、ここでバルブを開けると、圧力がかかり、軽い空気が入ってきて、ベルトをそのように調整します。そして、圧力が変わります。

だから私は調整します。圧力は5PSIです。チューブの内側の圧力は5PSIです。

ここからここまで、この穴の内側を通して繋がりました。ですから、ここでベルを開けて、細胞に5PSIの圧力を注入し、開いてから始めます。そして、ソナバルブの始動が作動します。

そして、基板を転がします。基板はただのシンプルなスライドガラスです。そして、適切な部分をロードし、スケッチテープを貼って基板を固定しますよね?

そして、単純に私はそれを修正します。そのため、細胞とアリーバルブと基質を移動しながら作業を開始し、作業を開始します。だから、私たちは全体を設定し、その後、アリーバルブのスタートを開きます。

そして、そのようにステージを動かしますよね?そして、基板上にパターンを作成し、基板上にパターンを作成し、文字をバムします。先ほど作ったこの染料溶液に印刷したこれらの液滴を浸します。

そして今、液滴を10分間インキュベートしてからイメージングします。まず、接眼レンズを通して画像を調整します。最初の画像は、明視野の画像です。

ライトをオフにしてフィルターを交換して、青色の励起が緑色の蛍光を示すようにします。そして、3枚目の画像は死んだ細胞で、これはThm Homodimer染色です。そして、緑色の光で、赤い蛍光が得られます。