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反復可能なパターン形成のためのハイブリッド ゲル キューブ デバイスで初期の 3 D 細胞クラスター制御
反復可能なパターン形成のためのハイブリッド ゲル キューブ デバイスで初期の 3 D 細胞クラスター制御
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JoVE Journal Bioengineering
Initial 3D Cell Cluster Control in a Hybrid Gel Cube Device for Repeatable Pattern Formations

反復可能なパターン形成のためのハイブリッド ゲル キューブ デバイスで初期の 3 D 細胞クラスター制御

Full Text
6,147 Views
05:22 min
March 21, 2019

DOI: 10.3791/59214-v

Masaya Hagiwara1, Rina Nobata2, Tomohiro Kawahara3

1NanoSquare Research Institute,Osaka Prefecture University, 2Department of Bioscience and Informatics,Osaka Prefecture University, 3Department of Biological Functions Engineering,Kyushu Institute of Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol presents a method for controlling the initial shape of cell clusters in a 3D extracellular matrix, facilitating repeatable pattern formation. Utilizing a cubic device with two different hydrogels, the technique allows for multi-directional imaging in tissue pattern formation.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Tissue Engineering

Background

  • 3D cell culture models are essential for studying tissue development.
  • Controlling initial culture conditions can enhance experimental reliability.
  • Hydrogels are commonly used in tissue engineering for their biocompatibility.
  • Multi-directional imaging provides comprehensive insights into tissue formation.

Purpose of Study

  • To develop a reliable method for 3D cell culture without specialized equipment.
  • To achieve consistent pattern formation in cell clusters.
  • To utilize a cubic device for enhanced imaging capabilities.

Methods Used

  • Preparation of a polycarbonate cubic frame for cell culture.
  • Application of preheated agarose to create a flat surface.
  • Sequential filling of the cubic frame with agarose to form walls.
  • Utilization of tweezers for precise manipulation of the frame.

Main Results

  • Successful creation of a stable 3D cell culture environment.
  • Repeatable pattern formation observed in cell clusters.
  • Effective use of hydrogels for multi-directional imaging.
  • Enhanced reliability of experimental outcomes in tissue studies.

Conclusions

  • The method provides a straightforward approach to 3D cell culture.
  • Controlling initial conditions is crucial for reproducibility.
  • This technique can be applied in various tissue engineering applications.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using a cubic device?
The cubic device allows for controlled initial conditions and facilitates multi-directional imaging.
Is special equipment required for this protocol?
No, the protocol can be performed without any special equipment.
What materials are used in this method?
The method primarily uses polycarbonate frames and agarose hydrogels.
How does this method enhance reliability in experiments?
By controlling the initial culture conditions, the method ensures consistent outcomes in 3D cultures.
Can this technique be applied to other types of cells?
Yes, the technique can be adapted for various cell types in tissue engineering.
What is the significance of multi-directional imaging?
Multi-directional imaging provides a comprehensive view of tissue development and pattern formation.

反復可能なパターン形成を取得する 3 D 細胞外マトリックスの初期細胞クラスター形状を制御するための手順を紹介します。組織パターン形成のための多方向の画像を達成するために 2 つの異なるゲルを含む立方デバイスを採用します。

このプロトコルは、特別な装置を使用せずに3D細胞培養モデルの信頼性を高める簡単な方法を使用します。この技術の主な利点は、立方体装置内の初期培養条件を制御することによって、再現可能な3D培養実験を行うことができる点である。5ミリメートルポリカーボネート立方体フレームを準備した後、事前に冷却されたスライドとアイスボックスにフレームを置き、ピペットを使用して、立方体フレームの上面から下面に予熱された1.5%アガロースの12マイクロリットルを追加します。

アガロースを広げて平らな表面を得て、ポリマーを治癒させます。ピンセットを使用してフレームをガラスの端までスライドさせ、開いた側がスライドに戻す前にフレームを下向きにするようにフレームを回転させます。フレームの次の2つの表面をより多くのアガロースで満たした後、ちょうど示したように、アガロースを開いた面から容器に落とし、第4および第5の側面にアガロース壁を形成する。

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