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DOI: 10.3791/59214-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol presents a method for controlling the initial shape of cell clusters in a 3D extracellular matrix, facilitating repeatable pattern formation. Utilizing a cubic device with two different hydrogels, the technique allows for multi-directional imaging in tissue pattern formation.
反復可能なパターン形成を取得する 3 D 細胞外マトリックスの初期細胞クラスター形状を制御するための手順を紹介します。組織パターン形成のための多方向の画像を達成するために 2 つの異なるゲルを含む立方デバイスを採用します。
このプロトコルは、特別な装置を使用せずに3D細胞培養モデルの信頼性を高める簡単な方法を使用します。この技術の主な利点は、立方体装置内の初期培養条件を制御することによって、再現可能な3D培養実験を行うことができる点である。5ミリメートルポリカーボネート立方体フレームを準備した後、事前に冷却されたスライドとアイスボックスにフレームを置き、ピペットを使用して、立方体フレームの上面から下面に予熱された1.5%アガロースの12マイクロリットルを追加します。
アガロースを広げて平らな表面を得て、ポリマーを治癒させます。ピンセットを使用してフレームをガラスの端までスライドさせ、開いた側がスライドに戻す前にフレームを下向きにするようにフレームを回転させます。フレームの次の2つの表面をより多くのアガロースで満たした後、ちょうど示したように、アガロースを開いた面から容器に落とし、第4および第5の側面にアガロース壁を形成する。
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