PETトレーサー製造のための固^相11C-メチル化、精製および製剤

Carbon-11は、有機分子の豊富さと20分の短い半減期のために、陽電子放出断層撮影で最も広く使用されている放射性同位体の1つです。このビデオでは、固相抽出カートリッジを用いた効率的なカーボン11放射標識技術を紹介します。従来の方法と比較して、カートリッジベースの技術はHPLCの使用を取り消し、放射合成時間を短縮し、合成の信頼性を向上させ、自動化プロセスを簡素化し、グッド製造プラクティス、GMPへの準拠を容易にします。

このカートリッジベースの技術は、アルツハイマー病に罹患している患者の脳内アミロイドプラークのインビボイメージングに使用されるPETトレーサーであるC11 PiBの放射線合成でここで実証されています。最近では、代謝性グルタミン酸受容体タイプ5の画像化のためのPETトレーサーであるC11 ABP688の放射線合成に3対1の技術を適用し、他のカーボン11標識トレーサーを用いた。酢酸の0.2モル溶液の450ミリリットルを酢酸ナトリウムの0.2モル溶液の50ミリリットルと組み合わせて、pH 3.7で酢酸緩衝液をバッファー1として調製します。

pHストリップまたはpHメーターでバッファのpHを確認します。その後、12.5ミリリットルの絶対エタノールと87.5ミリリットルの酢酸バッファーを100ミリリットルのボトルに組み合わせて、12.5%の水性エタノール溶液を洗浄物として作ります。100ミリリットルのボトルに85ミリリットルの酢酸バッファーと絶対エタノールの15ミリリットルを組み合わせて、15%水性エタノール溶液を洗浄2として作ります。

5ミリリットルの絶対エタノールと5ミリリットルの酢酸バッファーを組み合わせて、50%水性エタノール溶液を最終的な溶出液として作り、この溶液の2.5ミリリットルを10ミリリットルのシリンジに引き出します。tC18カートリッジを予条件にするには、メスの端から、注射器を使用して10ミリリットルの水を通過し、その後5ミリリットルのアセトンをカートリッジに通します。1分間、毎分50ミリリットルの窒素の流れでカートリッジを乾燥させます。

エペンドルフ管で、前駆体6-OH-BTA-0の2ミリグラムを無水アセトンの1ミリリットルに溶解する。Luerチップ、250マイクロリットル、精密ガラスシリンジを下向きに保持し、前駆体溶液の100マイクロリットルを引き出し、次いで50マイクロリットルのエアクッションを引き出します。針を取り出し、注射器をタップして、エアクッションが注射器の溶液の上にあることを確認します。

プランジャをゆっくりと押し下げて、メスの端からtC18カートリッジに前駆体溶液を塗布します。これ以上空気を押し込んではいないでください。合成モジュール上の標準5ポートの使い捨てマニホールドを固定し、組み立てます。

ポート 1 には 2 つの位置があります。水平入口を20ミリリットルのシリンジを取り付けた自動ディスペンサーに接続します。垂直インレットをボトルに洗浄1つで接続します。

C11メチルトリフレートを生成するモジュールの出力をマニホールドのポート2に接続します。ポート 3 とポート 4 の間に、前駆体 6-OH-BTA-0 を搭載した tC18 カートリッジを取り付けます。ポート 5 には 2 つの位置があります。

水平出口を廃棄物ボトルに接続し、垂直出口を無菌フィルターを介してトレーサーを収集するために滅菌バイアルに接続します。リードシールドホットセルでは、テフロンラインを使用して、C11メチルトリフラートをポート2を介してマニホールドに送り込み、ロードされたtC18カートリッジを毎分20ミリリットルの出力フローで通過させます。C11メチルトリフレートモジュールは、ポート3と4を介して、廃棄物ボトルに流れを調節します。

すべての放射能が転送され、放射能検出器によって監視されるようにtC18カートリッジに閉じ込められたら、ポート2を閉じることによってガスの流れを止める。カートリッジを2分間座らせて反応を完了します。その後、ポート1を介して、100ミリリットルのボトルから1分あたり100ミリリットルのディスペンサーシリンジに19ミリリットルの洗浄1液を引き出します。

18.5ミリリットルの洗浄剤をtC18カートリッジを通してtC18カートリッジを通り、ポート3と4を介して1溶液を洗浄し、1分間に50ミリリットルで廃棄物ボトルに入れます。分離効率を低下させる可能性があるため、多様体に気泡がないことを確認してください。18.5ミリリットルの洗浄を毎回1溶液、合計92.5ミリリットルでtC18を通過して4回引き出し、分配します。

ポート1の入力ラインを洗浄1から2本の洗浄に切り替えます。18.5ミリリットルの洗浄2液を毎回2回洗浄し、tC18を通過する55.5ミリリットルの総容量で3回、引き出しと分配を繰り返します。最終バイアルに向けてバルブ5を切り替えます。

ディスペンサーからラインを外し、最終的な溶離液の2.5ミリリットルと空気の7.5ミリリットルを含む10ミリリットルのシリンジに接続します。シリンジを下方に保持し、最終的な溶出液を手動で押し込み、その後にtC18カートリッジを通してポート3と4を介して空気を押し込み、滅菌フィルターを介してトレーサーコレクションのために無菌バイアルに入れます。注射器を10ミリリットルの無菌リン酸バッファーを含むものに切り替え、tC18カートリッジを通して滅菌バイアルにボリューム全体を押し込みます。

シリンジを外し、同じシリンジを使用して10ミリリットルの空気でラインを洗い流します。1ミリリットルのシリンジを使用して、プレリリース品質管理手順、細菌内毒素試験、および滅菌試験のためのサンプルを引き出す。事前放出品質管理手順を実行するには、まず、UV放射能検出器と逆相カラムを搭載した分析HPLCシステムにより、トレーサーの放射化学的アイデンティティ、放射化学的純度、化学的純度、およびモル活性を決定します。

6-OH-BTA-0および6-OH-BTA-1の保持時間を決定し、各化合物の含有量を定量化するために装置を較正する。キャピラリーカラムを搭載した分析ガスクロマトグラフィーシステムにより残留溶媒含有量を決定します。アセトンおよびエタノールの保持時間を決定し、各溶媒の含有量を定量化するために器具を較正する。

本研究では、C11メチルトリフレートによる6-OH-BTA-0前駆体のC11-メチル化によるC11 PiBの放射合成を行った。C11 PiBの品質管理分析用HPLCは、放射化学的純度が98%であったと、UVクロマトグラム上の6-OH-BTA-0前駆体および6-OH-BTA-1トレーサーピークの保持時間をそれぞれ3.6分および5.9分と示す。UVトレースの分析は、他の非放射性不純物がない場合の許容限界1.3マイクログラムを下回る残留前駆体濃度を示す。

これは、トレーサーの放射性化学的および化学的純度が臨床PET研究に許容されていることを示す。6-OH-BTA-0前駆体量を0.1ミリグラムから0.3ミリグラムに増やすことで、最終製品の前駆体のわずかに高い量を犠牲にして、放射性化学物質の収量が18.1%から32.1%に改善されました。この技術は、前駆体と放射性標識製品の間の極性の適切な違いを持つ多くの異なるシステムに適用可能である必要があります。

放射性同位体を含むすべての操作は、放射性物質を処理するための十分な訓練を受けた人員によって鉛遮蔽ホットセルで行われなければなりません。