Name: 微小粒子状物質に曝露されたゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素を検出するための修正QuEChERS-HPLC法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 39 s
Description: 学ぶ 修正QuEChERS-HPLC法によるゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素（PAHs）の定量分析。蛍光検出器を用いて感度を向上させ、環境毒性学における発生学的影響評価に貢献します。

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<ol><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+maternal+exposure+to+ambient+particulate+pollution+with+incident+spontaneous+pregnancy+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicol+Environ+Saf%22%5BJournal%5D)">Association of maternal exposure to ambient particulate pollution with incident spontaneous pregnancy loss.</a> Ecotoxicol Environ Saf. 224, 112653(2021).</li>
<li>Grippo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air+pollution+exposure+during+pregnancy+and+spontaneous+abortion+and+stillbirth%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Environ+Health%22%5BJournal%5D)">Air pollution exposure during pregnancy and spontaneous abortion and stillbirth.</a> Rev Environ Health. 33 (3), 247-264 (2018).</li>
<li>Tanner, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+between+exposure+to+ambient+benzene+and+pm2.+5+during+pregnancy+and+the+risk+of+selected+birth+defects+in+offspring%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Res%22%5BJournal%5D)">Associations between exposure to ambient benzene and pm2. 5 during pregnancy and the risk of selected birth defects in offspring.</a> Environ Res. 142, 345-353 (2015).</li>
<li>Feng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+air+pollution+exposure+and+congenital+anomalies%3A+An+updated+systematic+review+and+meta-analysis+of+epidemiological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Health+Res%22%5BJournal%5D)">Global air pollution exposure and congenital anomalies: An updated systematic review and meta-analysis of epidemiological studies.</a> Int J Environ Health Res. 34 (5), 2333-2352 (2024).</li>
<li>Lin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sources%2C+transformation%2C+and+health+implications+of+pahs+and+their+nitrated%2C+hydroxylated%2C+and+oxygenated+derivatives+in+PM2.5+in+Beijing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Geophys+Res-Atmos%22%5BJournal%5D)">Sources, transformation, and health implications of pahs and their nitrated, hydroxylated, and oxygenated derivatives in PM2.5 in Beijing.</a> J Geophys Res-Atmos. 120 (14), 7219-7228 (2015).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+priority+sources+of+PM2.5-bound+polycyclic+aromatic+hydrocarbons+by+their+contribution+to+disability+adjusted+life+years%5BTitle%5D)+AND+%22Atmos+Environ%22%5BJournal%5D)">Determining priority sources of PM2.5-bound polycyclic aromatic hydrocarbons by their contribution to disability adjusted life years.</a> Atmos Environ. 248, 118202(2021).</li>
<li>Carls, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fish+embryos+are+damaged+by+dissolved+pahs%2C+not+oil+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Fish embryos are damaged by dissolved pahs, not oil particles.</a> Aquat Toxicol. 88 (2), 121-127 (2008).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+of+the+organic+fraction+from+hydraulic+fracturing+flowback+and+produced+waters+to+early+life+stages+of+zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity of the organic fraction from hydraulic fracturing flowback and produced waters to early life stages of zebrafish (Danio rerio).</a> Environ Sci Technol. 52 (6), 3820-3830 (2018).</li>
<li>Ren, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+ROS+production+contributes+to+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated ROS production contributes to the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Sci Total Environ. 719, 135097(2020).</li>
<li>Manjunatha, B., Deekshitha, B., Seo, E., Kim, J., Lee, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+toxicity+induced+by+particulate+matter+%28PM2.5%29+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+model%5BTitle%5D)+AND+%22Aquat+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Developmental toxicity induced by particulate matter (PM2.5) in zebrafish (Danio rerio) model.</a> Aquat Toxicol. 238, 105928(2021).</li>
<li>Chen, J., Zhang, M., Aniagu, S., Jiang, Y., Chen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PM2.5+induces+cardiac+defects+via+AHR-SIRT1-PGC-1%CE%B1+mediated+mitochondrial+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Toxicol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">PM2.5 induces cardiac defects via AHR-SIRT1-PGC-1α mediated mitochondrial damage.</a> Environ Toxicol Pharmacol. 106, 104393(2024).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crosstalk+between+AHR+and+Wnt%2F%CE%B2-catenin+signal+pathways+in+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Crosstalk between AHR and Wnt/β-catenin signal pathways in the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> Toxicology. 355, 31-38 (2016).</li>
<li>González-Curbelo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+and+applications+of+the+QuECHERS+method%5BTitle%5D)+AND+%22TrAC+Trends+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Evolution and applications of the QuECHERS method.</a> TrAC Trends Anal Chem. 71, 169-185 (2015).</li>
<li>Wilkowska, A., Biziuk, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+pesticide+residues+in+food+matrices+using+the+qQuECHERS+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Determination of pesticide residues in food matrices using the qQuECHERS methodology.</a> Food Chem. 125 (3), 803-812 (2011).</li>
<li>Zhao, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+bioconcentration+of+pyrimorph+in+zebrafish%2C+Brachydanio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Manag+Sci%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and bioconcentration of pyrimorph in zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Pest Manag Sci. 67 (9), 1178-1183 (2011).</li>
<li>Aleström, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%3A+Housing+and+husbandry+recommendations%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Zebrafish: Housing and husbandry recommendations.</a> Lab Anim. 54 (3), 213-224 (2019).</li>
<li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> ILAR J. 53 (2), 192-204 (2012).</li>
<li>Ji, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AHR-mediated+m6A+RNA+methylation+contributes+to+PM2.5-induced+cardiac+malformations+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hazard+Mater%22%5BJournal%5D)">AHR-mediated m6A RNA methylation contributes to PM2.5-induced cardiac malformations in zebrafish larvae.</a> J Hazard Mater. 457, 131749(2023).</li>
<li>Alegbeleye, O. O., Opeolu, B. O., Jackson, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polycyclic+aromatic+hydrocarbons%3A+A+critical+review+of+environmental+occurrence+and+bioremediation%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Manage%22%5BJournal%5D)">Polycyclic aromatic hydrocarbons: A critical review of environmental occurrence and bioremediation.</a> Environ Manage. 60 (4), 758-783 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16 PAH 混合標準溶液 &nbsp;</td><td>o2si Smart Solutions (米国サウスカロライナ州)</td><td>110124-06</td><td>16 PAH 混合標準溶液 &nbsp; ナフタレン (Nap)、アセナフチレン (Acy)、アセナフテン (Ace)、フルオレン (Flo)、フェナントレン (Phe)、アントラセン (Ant)、フルオランテン (Flu)、ピレン (Pyr)、ベンゾ [a] アントラセン (BaA)、クリセン (Chr)、ベンゾ [b] フルオランテン (BbF)、ベンゾ [k] フルオランテン (BkF)、ベンゾ [a] ピレン (BaP)、インデノ [1,2,3-cd] ピレン (IcdP)、ジベンツ [a、h]アントラセン(DahA)、ベンゾ[g,h,i]ペリレン(BghiP)。</td></tr><tr><td>1260 Infinity II LC System</td><td>Agilent Technologies (米国サンタクララ)</td><td></td><td>FLD(G1321A);DAD SL (G1315C)</td></tr><tr><td>アセトニトリル</td><td>Scharlab (スペイン、バルセロナ)</td><td>AC03661000</td><td>溶媒</td></tr><tr><td>CNWBOND HC-C18 SPE&nbsp;</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.(中国、上海)</td><td>SBEQ-CA0801</td><td>C18 パッキンは、親水性と疎水性のバランスが取れた逆相パッキンで、極性有機化合物と非極性有機化合物をよく吸着して分離できます。</td></tr><tr><td>珪藻土</td><td>Agilent Technologies, Inc (米国サンタクララ)</td><td>12214013</td><td>有機不純物の分離、精製、除去用 &zwnj;</td></tr><tr><td>分散型 SPE 15 mL、EN</td><td>Agilent Technologies, Inc (サンタクララ、米国)</td><td>5982-5056</td><td>サンプル精製</td></tr><tr><td>フィルター</td><td>ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc.(上海、中国)</td><td>SCAA-104</td><td>有機相ニードルフィルター (ナイロン)、0.22&マイクロ;m</td></tr><tr><td>Hexane</td><td>Scharlab (スペイン、バルセロナ)</td><td>HE02481000</td><td>溶媒</td></tr><tr><td>Millipore</td><td>Merck (米国ニュージャージー州)</td><td></td><td>超純水の調製</td></tr><tr><td>有機化 - N-EVAP 窒素蒸発器</td><td>有機化 (米国マサチューセッツ州)</td><td></td><td>溶媒の蒸発</td></tr><tr><td>Sorvall ST4 Plus</td><td>Thermo Fisher Scientific (ウォルサム、米国)</td><td></td><td>遠心分離</td></tr><tr><td>&nbsp;Vortex- Genie 2 (G560E)</td><td>Scientific Industries (ニューヨーク、米国)</td><td></td><td>Vortex</td></tr><tr><td>ZORBAX Eclipse PAH</td><td>Agilent Technologies, Inc (Santa Clara, USA)</td><td>959990-918</td>この<td>カラムは、PAH の正確で信頼性の高い分析を実現するために HPLC システムで一般的に使用されます。</td></tr></tbody></table>

微小粒子状物質に曝露されたゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素を検出するための修正quechers-hplc法

A Modified QuEChERS-HPLC Method for Detection of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Zebrafish Embryos Exposed to Fine Particulate Matter

EOM曝露、サンプル調製、およびPAH検出の全手順を 図1に示します。HPLC-FLU/DADでは、シグナル対ノイズ比が3:1、検出範囲が0.3〜5.0 ng/mLであれば許容できると考えられました。分析法の検出限界は、3.0 × 10-4 から 5.0 × 10-3 ng/生物の範囲でした。すべての検量線は高い直線性を示しました(r2 &gt; 0.999)。マトリックスサンプルから得られた抽出物を用いて決定された精度値は5%未満でした。急上昇した回復率は82.0%から96.3%の範囲でした(表1)。
表2および補足図S2に示すように、EOMに曝露されたゼブラフィッシュの胚において、フェナントレン(Phe)、アントラセン(Ant)、フルオレン(Flu)、アセナフテン(Acp)、フルオランテン(Fla)、およびピレン(Pyr)の6つのPAHが検出されました。...

微小粒子状物質に曝露されたゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素を検出するための修正QuEChERS-HPLC法

Maternal exposure to fine particulate matter (PM2.5), with an aerodynamic diameter of 2.5 &#181;m or less, has been linked to spontaneous abortion and ...

a-modified-quechers-hplc-method-for-detection-polycyclic-aromatic

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

発生生物学

このビデオでは、ゼブラフィッシュの胚のエタノール濃度を測定するためのヘッドスペースガスクロマトグラフィーの使用を実演しています。この方法は、揮発性有機化合物の定性的および定量的分析に有用なツールを提供します。...

ヘッドスペースガスクロマトグラフィー:ゼブラフィッシュ胚のエタノール濃度を評価する技術

このビデオは、ゼブラフィッシュの胚の心臓におけるPM2.5による酸化的損傷を検出するための高感度免疫蛍光法に基づくアッセイを、DNA損傷と二本鎖DNA切断を示す8-OHdGとγH2AXのレベルを測定する方法を示しています。...

魚の胚におけるPM2.5媒介性DNA損傷を検出するための免疫蛍光アッセイ

ここで説明するには、ゼブラフィッシュ胚における組織特異的な蛍光の半自動イメージングのためのプロトコルです。...

ゼブラフィッシュ胚における組織特異的蛍光の半自動イメージング

催奇形への曝露は、先天性欠損症を引き起こす可能性があります。ゼブラフィッシュは、化学物質の催奇形性を決定するのに有用です。私たちは、亜硝酸塩のも露出の異なる時点で様々なレベルに胚を暴露することによって、ゼブラフィッシュの有用性を実証しています。私たちは、亜硝酸塩は毒性があると重度の発達障害を引き起こす可能性があることを示しています。...

亜硝酸塩の催奇形性を評価するためのモデルとしてのゼブラフィッシュ

ゼブラフィッシュ胚は、化学化合物の毒性を評価するために使用されます。それらは外部で発達し、化学物質に敏感であり、微妙な形知らずの変化の検出を可能にする。実験は少量の化合物しか必要としないが、これは胚を含むプレートに直接添加され、試験システムを効率的かつ費用対効果の高い方法にする。...

ゼブラフィッシュ胚を用いる化学化合物の毒性の迅速評価

この論文では、ゼブラフィッシュ幼虫モデルを用いた環境汚染物質の神経行動毒性の評価について、暴露プロセスや神経行動指標の検査を含む詳細な実験プロトコルを提示する。...

ゼブラフィッシュ幼虫に対する環境汚染物質の神経行動効果の研究

このプロトコルは、免疫蛍光アッセイを使用して、ゼブラフィッシュ胚の解剖された心臓におけるPM2.5誘発DNA損傷を検出する。...

免疫蛍光を使用して、ゼブラフィッシュ胚の心臓におけるPM2.5誘導DNA損傷を検出する

ゼブラフィッシュ胚/幼虫は外部に発達し、光学的に透明である。初期段階における魚のマイクロプラスチックの生物蓄積は、蛍光標識されたマイクロビーズで容易に評価される。...

ゼブラフィッシュ初期期における蛍光マイクロプラスチックの蓄積と分布

ゼブラフィッシュ中の金属および金属ベースの化合物の薬物療法および毒物動態分析の増加率は、環境および臨床翻訳研究に有利であり得る。未知の水媒介曝露取り込みの限界は、誘導結合プラズマ質量分析法を用いて消化されたゼブラフィッシュ組織に対して微量金属分析を行うことによって克服された。...

ゼブラフィッシュにおけるプラチナおよびルテニウム系化合物曝露の線量取り込みは、より広い用途の誘導結合プラズマ質量分析法による

この論文では、無傷のゼブラフィッシュ胚内の正常および異常なシトシンメチル化の迅速かつ効率的な時空間モニタリングのためのプロトコルについて説明します。...

無傷ゼブラフィッシュ胚における正常および異常なシトシンメチル化の迅速かつ効率的な時空間モニタリング

このプロトコルは、受精後3〜7日のゼブラフィッシュの幼生における薬物スクリーニング手順と、それに続く形態学的評価を説明しています。...

初期ゼブラフィッシュ幼生における低分子スクリーニングと毒性試験

学ぶ 修正QuEChERS-HPLC法によるゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素（PAHs）の定量分析。蛍光検出器を用いて感度を向上させ、環境毒性学における発生学的影響評価に貢献します。

微小粒子状物質に曝露されたゼブラフィッシュ胚中の多環芳香族炭化水素を検出するための修正QuEChERS-HPLC法

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