Name: 活性アクチンベースアセンブリの収縮性および変形モードのin vitroでのチューニング:2次元活性ネットワークから液晶滴まで (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T16:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: 学ぶアクチンアセンブリの調製法。精製タンパク質から準二次元の絡み合い、架橋、液晶アクチン構造体を作成し、ソフトバイオマテリアルの形状と組織化を制御する物理メカニズムを探索する再現性の高い実験手法を習得できます。

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<ol><li>Marchetti, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamics+of+soft+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Mod+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamics of soft active matter.</a> Rev Mod Phys. 85 (3), 1143-1189 (2013).</li>
<li>Needleman, D., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+matter+at+the+interface+between+materials+science+and+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Active matter at the interface between materials science and cell biology.</a> Nat Rev Mater. 2 (9), 17048(2017).</li>
<li>Murrell, M., Oakes, P. W., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forcing+cells+into+shape%3A+the+mechanics+of+actomyosin+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Forcing cells into shape: the mechanics of actomyosin contractility.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 16 (8), 486-498 (2015).</li>
<li>Cáceres, R., Abou-Ghali, M., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstituting+the+actin+cytoskeleton+at+or+near+surfaces+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Reconstituting the actin cytoskeleton at or near surfaces in vitro.</a> Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 1853 (11), 3006-3014 (2015).</li>
<li>Burla, F., Mulla, Y., Vos, B. E., Aufderhorst-Roberts, A., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+mechanical+resilience+to+active+material+properties+in+biopolymer+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Phys%22%5BJournal%5D)">From mechanical resilience to active material properties in biopolymer networks.</a> Nat Rev Phys. 1 (4), 249-263 (2019).</li>
<li>Bezanilla, M., Gladfelter, A. S., Kovar, D. R., Lee, W. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+dynamics%3A+a+view+from+the+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal dynamics: a view from the membrane.</a> J Cell Biol. 209 (3), 329-337 (2015).</li>
<li>Alfaro-Aco, R., Petry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+the+microtubule+cytoskeleton+piece+by+piece%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Building the microtubule cytoskeleton piece by piece.</a> J Biol Chem. 290 (28), 17154-17162 (2015).</li>
<li>Sanchez, T., Chen, D. T. N., DeCamp, S. J., Heymann, M., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+motion+in+hierarchically+assembled+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Spontaneous motion in hierarchically assembled active matter.</a> Nature. 491 (7424), 431-434 (2012).</li>
<li>Foster, P. J., Fürthauer, S., Shelley, M. J., Needleman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+contraction+of+microtubule+networks%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Active contraction of microtubule networks.</a> eLife. 4, e10837(2015).</li>
<li>Murrell, M. P., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((F-actin+buckling+coordinates+contractility+and+severing+in+a+biomimetic+actomyosin+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">F-actin buckling coordinates contractility and severing in a biomimetic actomyosin cortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (51), 20820-20825 (2012).</li>
<li>Weirich, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+behavior+of+cross-linked+actin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Liquid behavior of cross-linked actin bundles.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (9), 2131-2136 (2017).</li>
<li>Alvarado, J., Sheinman, M., Sharma, A., MacKintosh, F. C., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+motors+robustly+drive+active+gels+to+a+critically+connected+state%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Molecular motors robustly drive active gels to a critically connected state.</a> Nat Phys. 9 (9), 591-597 (2013).</li>
<li>Keber, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topology+and+dynamics+of+active+nematic+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Topology and dynamics of active nematic vesicles.</a> Science. 345 (6201), 1135-1139 (2014).</li>
<li>Zhang, R., Kumar, N., Ross, J. L., Gardel, M. L., De Pablo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplay+of+structure%2C+elasticity%2C+and+dynamics+in+actin-based+nematic+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interplay of structure, elasticity, and dynamics in actin-based nematic materials.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (2), E124-E133 (2018).</li>
<li>Schaller, V., Weber, C., Semmrich, C., Frey, E., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polar+patterns+of+driven+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Polar patterns of driven filaments.</a> Nature. 467 (7311), 73-77 (2010).</li>
<li>Blanchoin, L., Boujemaa-Paterski, R., Sykes, C., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+dynamics%2C+architecture%2C+and+mechanics+in+cell+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Actin dynamics, architecture, and mechanics in cell motility.</a> Physiol Rev. 94 (1), 235-263 (2014).</li>
<li>Bendix, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+analysis+of+contractility+in+active+cytoskeletal+protein+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">A quantitative analysis of contractility in active cytoskeletal protein networks.</a> Biophys J. 94 (8), 3126-3136 (2008).</li>
<li>Köhler, S., Schaller, V., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+formation+in+active+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Structure formation in active networks.</a> Nat Mater. 10 (6), 462-468 (2011).</li>
<li>Backouche, F., Haviv, L., Groswasser, D., Bernheim-Groswasser, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+gels%3A+dynamics+of+patterning+and+self-organization%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Biol%22%5BJournal%5D)">Active gels: dynamics of patterning and self-organization.</a> Phys Biol. 3 (4), 264-273 (2006).</li>
<li>Svitkina, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+cell+cortex%3A+structure+and+molecular+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Actin cell cortex: structure and molecular organization.</a> Trends Cell Biol. 30 (7), 556-565 (2020).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+network+architecture+can+determine+myosin+motor+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin network architecture can determine myosin motor activity.</a> Science. 336 (6086), 1310-1314 (2012).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleation+geometry+governs+ordered+actin+network+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Nucleation geometry governs ordered actin network structures.</a> Nat Mater. 9 (10), 827-832 (2010).</li>
<li>Vogel, S. K., Petrasek, Z., Heinemann, F., Schwille, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myosin+motors+fragment+and+compact+membrane-bound+actin+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Myosin motors fragment and compact membrane-bound actin filaments.</a> eLife. 2, e00116(2013).</li>
<li>Liebe, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioinspired+membrane+interfaces%3A+controlling+actomyosin+architecture+and+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Bioinspired membrane interfaces: controlling actomyosin architecture and contractility.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 15 (9), 11586-11598 (2023).</li>
<li>Thoresen, T., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thick+filament+length+and+isoform+composition+determine+self-organized+contractile+units+in+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Thick filament length and isoform composition determine self-organized contractile units in actomyosin bundles.</a> Biophys J. 104 (3), 655-665 (2013).</li>
<li>Stachowiak, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organization+of+myosin+II+in+reconstituted+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Self-organization of myosin II in reconstituted actomyosin bundles.</a> Biophys J. 103 (6), 1265-1274 (2012).</li>
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<li>Weirich, K. L., Stam, S., Munro, E., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+bundle+architecture+and+mechanics+regulate+myosin+II+force+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Actin bundle architecture and mechanics regulate myosin II force generation.</a> Biophys J. 120 (10), 1957-1970 (2021).</li>
<li>Scholz, M., Weirich, K. L., Gardel, M. L., Dinner, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+molecular+motor+transport+through+cytoskeletal+filament+network+organization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Tuning molecular motor transport through cytoskeletal filament network organization.</a> J Soft Mat. 16 (8), 2135-2140 (2020).</li>
<li>Spudich, J. A., Watt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regulation+of+rabbit+skeletal+muscle+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The regulation of rabbit skeletal muscle contraction.</a> J Biol Chem. 246 (15), 4866-4871 (1971).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+F-actin+bundler+%CE%B1actinin+Ain1+is+tailored+for+ring+assembly+and+constriction+during+cytokinesis+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">The F-actin bundler αactinin Ain1 is tailored for ring assembly and constriction during cytokinesis in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 27 (11), 1821-1833 (2016).</li>
<li>Skau, C. T., Kovar, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fimbrin+and+tropomyosin+competition+regulates+endocytosis+and+cytokinesis+kinetics+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Fimbrin and tropomyosin competition regulates endocytosis and cytokinesis kinetics in fission yeast.</a> Curr Biol. 20 (16), 1415-1422 (2010).</li>
<li>Vignjevic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+fascin+in+filopodial+protrusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of fascin in filopodial protrusion.</a> J Cell Biol. 174 (6), 863-875 (2006).</li>
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<li>Palmgren, S., Ojala, P. J., Wear, M. A., Cooper, J. A., Lappalainen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+with+PIP2%2C+ADPactin+monomers%2C+and+capping+protein+regulate+the+activity+and+localization+of+yeast+twinfilin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions with PIP2, ADPactin monomers, and capping protein regulate the activity and localization of yeast twinfilin.</a> J Cell Biol. 155 (2), 251-260 (2001).</li>
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<li>Verkhovsky, A. B., Borisy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsarcomeric+mode+of+myosin+II+organization+in+the+fibroblast+lamellum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Nonsarcomeric mode of myosin II organization in the fibroblast lamellum.</a> J Cell Biol. 123 (3), 637-652 (1993).</li>
<li>LeBel, R. G., Goring, D. A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Density%2C+viscosity%2C+refractive+index%2C+and+hygroscopicity+of+mixtures+of+water+and+dimethyl+sulfoxide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chem+Eng+Data%22%5BJournal%5D)">Density, viscosity, refractive index, and hygroscopicity of mixtures of water and dimethyl sulfoxide.</a> J Chem Eng Data. 7 (1), 100-101 (1962).</li>
<li>Lengsfeld, A. M., Lowt, I., Wielandt, T., Dancker, P., Hasselbach, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+phalloidin+with+actin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interaction of phalloidin with actin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 31, 846(1974).</li>
<li>Chowdhury, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendronized+fluorosurfactant+for+highly+stable+waterinfluorinated+oil+emulsions+with+minimal+interdroplet+transfer+of+small+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Dendronized fluorosurfactant for highly stable waterinfluorinated oil emulsions with minimal interdroplet transfer of small molecules.</a> Nat Commun. 10 (1), 4546(2019).</li>
<li>Alvarado, J., Mulder, B. M., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alignment+of+nematic+and+bundled+semiflexible+polymers+in+cellsized+confinement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Alignment of nematic and bundled semiflexible polymers in cellsized confinement.</a> J Soft Mat. 10 (14), 2354-2364 (2014).</li>
<li>Weirich, K. L., Israelachvili, J. N., Fygenson, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilayer+edges+catalyze+supported+lipid+bilayer+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Bilayer edges catalyze supported lipid bilayer formation.</a> Biophys J. 98 (1), 85-92 (2010).</li>
<li>Tan, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topological+chaos+in+active+nematics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Topological chaos in active nematics.</a> Nat Phys. 15 (10), 1033-1039 (2019).</li>
<li>Nasirimarekani, V., Strübing, T., Vilfan, A., Guido, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+the+properties+of+active+microtubule+networks+by+depletion+forces%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Tuning the properties of active microtubule networks by depletion forces.</a> Langmuir. 37 (26), 7919-7927 (2021).</li>
<li>Heymann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+solgel+transformations%3A+I.+the+inverse+solgel+transformation+of+methylcellulose+in+water%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Faraday+Soc%22%5BJournal%5D)">Studies on solgel transformations: I. the inverse solgel transformation of methylcellulose in water.</a> Trans Faraday Soc. 31, 846(1935).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6643">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/68127">10.3791/68127</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/68127">Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops</a>. The Affiliations&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

<table><tbody><tr><td>0.6 mLマイクロ遠心チューブ</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-123</td><td></td></tr><tr><td>008-フルオロ界面活性剤</td><td>RAN Biotechnologies</td><td>00115081361-6525</td><td></td></tr><tr>HFE7500 <td>RAN Biotechnologies</td><td>の予混合溶液 008-フルオロ界面活性剤</td>の代替 <td>008-フルオロ界面活性剤 008-フルオロ界面活性剤-2wtH-50G</td><td>プレミックス溶液</td></tr><tr><td>2-メルカプトエタノール (&β;-メルカプトエタノール)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>63689</td><td>CAS 番号: 60-24-2 原液: MilliQ 水中 25 mM、4 °C で保存。C</td></tr><tr><td>4-(2-ヒドロキシエチル)ピペラジン-1-エタン-スルホン酸 (HEPES)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>H3375</td><td>CAS 番号: 7365-45-9</td></tr><tr><td>5 分 エポキシ</td><td>Devcon</td><td>14250</td><td></td></tr><tr><td>アクチン</td><td>サイトスケルトン株式会社</td><td>AKL99-A</td><td>>99% 純粋なウサギ骨格筋 (精製の代替)</td></tr><tr><td>アクチン (ローダミン標識)</td><td>Cytoskeleton, Inc.</td><td>AR05-A</td><td>ウサギ骨格筋 (精製の代替)</td></tr><tr><td>アデノシン 5&プライム;-三リン酸 (ATP)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>A6419</td><td>CAS 番号: 34369-07-8 原液: MilliQ 水中で 25 mM、-20 &g で保存;C 加水分解を避けるために冷凍保存</td></tr><tr><td>塩化カルシウム (CaCl2)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>C5670</td><td>CAS 番号: 10043-52-4</td></tr><tr><td>キャッピングタンパク質 (マウス)</td><td></td><td></td><td>大腸菌 の過剰発現から精製し、HisTag ストック溶液: -80 &g のキャッピングタンパク質緩衝液中 20 mM;</td></tr><tr><td>ウシ肝臓由来の C カタラーゼ</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>C9322</td><td>CAS 番号: 9001-05-2 原液: 85 ku/mL、グルコースオキシダーゼで等分して-20°Cで保存。C</td></tr><tr><td>カバー ガラス</td><td>フィッシャーブランド</td><td>12544C</td><td>ホウケイ酸塩、#1.5、24 mm x 40 mm フィッシャーブランドではなく フィッシャー ファイネスト</td></tr><tr><td>D-(+)-グルコース</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>G8270</td><td>CAS 番号: 50-99-7 原液: MilliQ 水中で 225 mg/mL、-20 度で保管;C</td></tr><tr><td>ジチオスレイトール (DTT)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>3860-OP</td><td>CAS 番号: 3483-12-3 原液: MilliQ 水中 1 M、-20 度で保管。C</td></tr><tr><td>両面テープ</td><td>3M</td><td>3136</td><td></td></tr><tr><td>エチル アルコホール 200 プルーフ</td><td>PHARMCO</td><td>111000200</td><td>CAS 番号: 64-17-5 200 プルーフ</td></tr><tr><td>エチレングリコール-ビス (2-アミノエチルエーテル)-N,N,N&プライム;,N&prime;-テトラ酢酸 (EGTA)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>E3889</td><td>CAS 番号: 67-42-5</td></tr><tr><td>エチレンジアミン四酢酸 (EDTA)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>E9884</td><td>CAS番号:60-00-4</td></tr><tr><td>グルコースオキシダーゼ</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>345386</td><td>CAS番号:9001-37-0 原液:MilliQ水で135 mg / mL、カタラーゼで-20°Cで分注して保存します。C</td></tr><tr><td>グリセロール</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>356352M</td><td>CAS 番号: 56-81-5</td></tr><tr><td>イミダゾール</td><td>フィッシャー バイオ試薬&nbsp;</td><td>BP305-50</td><td>CAS 番号: 288-32-4</td></tr><tr><td>塩化マグネシウム (MgCl2)</td><td>フィッシャー生物試薬&nbsp;</td><td>BP214</td><td>CAS番号:7786-30-3、7791-18-6</td></tr>メ<tr><td>チルセルロース</td><td>シグマアルドリッチ</td><td>M0512</td><td>CAS番号:9004-67-5 15センチポアズ</td></tr><tr><td>顕微鏡スライドプレーン</td>電子顕微鏡科学<td>/ゴールドシール</td><td>63710-05</td><td>&nbsp;3 "x1"、厚さ 1 mm</td></tr><tr><td>MilliQ 水</td><td>Millipore</td><td>CUFBI001</td><td>超純水</td></tr><tr><td>Novec-7500 人工流体</td><td>3M</td><td>7100134816</td><td>予混合溶液の代替</td></tr><tr><td>塩化カリウム (KCl)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>P3911</td><td>CAS 番号: 7447-40-7</td></tr><tr><td>リン酸カリウム (KPO4)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>P3786</td><td>CAS 番号:7758-11-4</td></tr><tr><td>ウサギの骨格筋アセトン粉末</td><td>Pel-Freez Biologicals</td><td>41995-1</td><td>アクチンを精製するときに使用(購入の代替) -80 &gでアクチン緩衝液Gに約30 mMを保管します。C</td></tr><tr><td>アジ化ナトリウム</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>71289</td><td>CAS 番号: 26626-22-8</td></tr><tr><td>テトラメチルローダミン-C6-マレイミド</td><td>AnaSpec</td><td>AS-81445</td><td>CAS 番号: 174568-68-4 アクチンを精製するときに使用 (購入の代替) アクチンバッファー G に約 30 mM を -80 度で保存します。アクチンを標識するときに使用します (購入の代替)</td></tr><tr><td>トリス塩酸 (Tris HCl)</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>648317</td><td>CAS番号:1185-53-1</td></tr>超音波<tr><td>バス</td>エ<td>マソンブランソン&nbsp;</td><td>CPX2800H</td><td></td></tr></tbody></table>

活性アクチンベースアセンブリの収縮性および変形モードのin vitroでのチューニング:2次元活性ネットワークから液晶滴まで

Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

精製されたタンパク質を用いたモデルシステムでは、これらの方法で説明されている一般的な戦略に従うことで、アクチンをアセンブリアーキテクチャを修飾するアクセサリータンパク質の存在下でアクチンを重合してフィラメントにすることで、幅広いアクチンアセンブリを形成することができます(図1)。アクチンを架橋剤やキャッピングタンパク質なしでフィラメントに重合すると、絡み合ったフィラメントネットワークが形成されます(図1A)。絡み合ったネットワークに架橋剤を追加すると、準2Dネットワークまたはバンドルのネットワークが形成されます(図1B、C)。ネットワークが形成されるか、バンドルのネットワークが形成されるかは、アクチンネットワークに付加される架橋剤の種類と量によって異なります(例えば、ここに示すように、α-アクチニンは低濃度でネットワークを形成し、高濃度ではバンドルのネットワークを形成します)。架橋剤は、アクチンが重合している間に添加することも...

Actin cytoskeleton-based materials are widely investigated as model cellular materials to elucidate physical mechanisms of cell mechanics, such as shape ...

tuning-contractility-deformation-modes-active-actin-based-assemblies

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

シロキサンベースおよびエポキシベースの液晶エラストマー(LCE)およびLCEナノコンポジットの調製を実演します。LCEは、可逆ひずみ、液晶秩序、および剛性に関して特徴付けられます。潜在的なアプリケーションとして、活性細胞培養用のカスタムデバイスでの形状応答性基質としての使用を実証します。...

モノドメイン液晶エラストマーおよび液晶エラストマーナノコンポジットの調製

ここでは、直接レーザー描画を使用して、形状と分子の配列の両方をナノメートルスケールの精度で操作できる3D高分子マイクロ/ナノ構造を作製します。数種類の液晶エラストマーの微細構造の光誘起変形を顕微鏡スケールで制御することができます。...

自由形式のライトアクチュエータ - 顕微鏡スケールでの作製と作動の制御

この研究は、3D、生体適合性の側鎖型液晶エラストマー（種の保存法）に基づいて、生分解性、泡様細胞の足場を調製するための方法論を提示します。共焦点顕微鏡実験は泡状種の保存法は、細胞の付着、増殖、およびC2C12s筋芽細胞の自発的なアライメントを可能にすることを示しています。...

3D空間の細胞培養のための細胞骨格などの生体適合性液晶エラストマー発泡体の合成

プロトコルの目的は、連続光照射下で機械的に振動することができます液晶ポリマー フィルムを作成することです。我々...

巨視的揺動運動の光によって誘起される液晶ネットワークの準備

マイクロ プロセスと液晶エラストマーから作動粒子を準備するためのパラメーターについて説明します。このプロセスは、作動の大きさだけでなく、そのサイズと形状 (強く形を扁平コア-シェル、ヤヌス形態から)...

液晶エラストマーのアクチュエータのマイクロの準備

我々は、蛍光顕微鏡法と組み合わせて、個々のアクチンフィラメントをリアルタイムで正確に監視しながら、異なるタンパク質溶液に順次曝露することを可能にする、単純なアクチンフィラメントマイクロ流体アッセイのプロトコルを提示する。...

マイクロフルイディクスと蛍光顕微鏡を使用して、単一アクチンフィラメントおよびバンドルのアセンブリダイナミクスを研究する

このプロトコルでは、蛍光顕微鏡を使用して再構成された膜テザー細胞骨格ネットワークのダイナミクスを研究するための、支持された脂質二重層の形成、および細胞骨格フィラメントとモータータンパク質の添加について説明します。...

支持脂質二重層上の膜テザー最小アクチン皮質の再構成

本稿では、F-アクチン細胞骨格を巨大な単層脂質小胞(リポソームとも呼ばれる)に封入する実験技術と、リポソーム膜の内小葉に皮質生物模倣型F-アクチン層を形成する方法を示す。...

インビトロ 巨大単層小胞内のアクチン細胞骨格の再構成

この論文では、共絡アクチンフィラメントと微小管の調整可能な3次元複合ネットワークをエンジニアリングおよび特性評価するためのプロトコルを紹介します。複合材料は、ミオシンIIおよびキネシンモーターによって駆動される能動的再構成および弾道運動を受け、アクチン、微小管、モータータンパク質、および受動架橋剤の相対濃度によって調整される。...

調整可能なモーター駆動ダイナミクスとメカニクスによるアクチン-微小管複合材料の再構成と特性評価

ここで紹介するのは、微小管およびキネシンモーターから活性ネマティクスを調製する方法であり、タンパク質の調製および構築、ならびに活性ネマチック閉じ込めのためのウェルの使用を含む。...

微小管ベースのアクティブネマティクスの形成、閉じ込め、観察

この研究では、制御された条件下でのアクトミオシンゲルの多孔弾性を研究するために 、in vitro...

細胞骨格のモデル系としての(ポロ)弾性収縮性アクトミオシンネットワークの機構

学ぶアクチンアセンブリの調製法。精製タンパク質から準二次元の絡み合い、架橋、液晶アクチン構造体を作成し、ソフトバイオマテリアルの形状と組織化を制御する物理メカニズムを探索する再現性の高い実験手法を習得できます。

活性アクチンベースアセンブリの収縮性および変形モードのin vitroでのチューニング:2次元活性ネットワークから液晶滴まで

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