Name: 位相コントラストおよび微分干渉コントラスト（DIC）顕微鏡 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-06T17:41:00.000+00:00
Duration: 6 min 49 s
Description: 学ぶ位相コントラストおよび微分干渉コントラスト（DIC）顕微鏡法の原理と実践的応用。透明な生物試料の可視化を向上させ、生物医学研究における高解像度イメージング技術を習得できます。

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位相コントラストとDIC顕微鏡を示すいくつかのビデオクリップは、と題する、別のビデオ-の記事から採取した<a href="details.stp?ID=197">共生のレイヤーを</a> 。 Joveのは、優雅にレッドベターラボによるこの貢献を認めている。

この実験的なアプローチのための完全なテキストのプロトコルでは、利用可能です<a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0401/current/abstract ">細胞生物学におけるカレントプロトコール。</a>

著者に開示すべき事項はありません。

位相コントラストおよび微分干渉コントラスト（dic）顕微鏡

Phase Contrast and Differential Interference Contrast (DIC) Microscopy

位相差顕微鏡は、多くの場合、透明な、非光吸収、生体試料のコントラストを生成するために使用されます。技術は彼の功績に対してノーベル賞を受けた1942年のゼルニケ、、によって発見された。それは、試料の構造細部のエッジを強調組織細胞、卵、及び胚を含む厚い試料の高分解能の光学切片を提供し、位相のハロー典型的に苦しむしないため、1960年代後半に導入されたDIC顕微鏡は、生物医学研究で親しまれてきた位相コントラスト像の。このプロトコルは、これらの顕微鏡技術の原理と実用化を強調。

このプロトコルは、位相と微分干渉コントラスト（DIC）顕微鏡の原理と実用化を強調

位相コントラストおよび微分干渉コントラスト（DIC）顕微鏡

位相差顕微鏡法は、透明で光を吸収しない生物学的試料にコントラストを付けるためによく用いられます。この技術は、...によって発見されました。

光学顕微鏡は、生物医学研究の分野において最も有用な、あるいはそれに準ずるツールの一つです。用途に応じて、検体を観察するために異なる照明モードが求められます。このビデオでは、透過光照明の2つの光学モードである、位相差顕微鏡およびDIC（微分干渉）顕微鏡について解説します。こんにちは。テキサス大学ヘルスサイエンスセンター・サンアントニオ校のコア・オプティカルイメージング施設のVictoria San Frolicです。本日は、位相差顕微鏡および微分干渉顕微鏡を用いて標本を適切に観察する方法を解説します。それでは始めましょう。標準的な明視野顕微鏡では、透明で無色の検体を観察するには不十分です。光を吸収しない透明な生物学的検体にコントラストをつけるために、位相差顕微鏡がしばしば用いられます。この手法は1942年にチューリッヒによって発見され、その功績により彼はノーベル賞を受賞しました。位相差顕微鏡は、位相板またはリングを備えた特殊な位相差対物レンズと、絞りの代わりにコンデンサーアニュラス（環状絞り）を追加した明視野光学顕微鏡です。アニュラスは通常コンデンサーターレット内に配置されており、使用する対物レンズに合わせて適切なサイズのアニュラスを選択する必要があります。ケーラー照明を設定した後、適切な位相差対物レンズを選択し、コンデンサー内の対応する位相差アニュラスを回転させて位置を合わせてください。対物位相環とコンデンサー環が適切に同心円状に重なり合うように調整できたら、標本を観察し、焦点を適切に調整できます。それでは、顕微鏡で見た位相差像がどのようなものであるかを示しましょう。こちらはラット肝臓切片の観察像です。位相差顕微鏡下での観察。この手法は、コントラストをさまざまなグレーの階調から黒から白までの階調に変化させることで、生物学的材料の視認性を高めます。ただし、試料の周囲にハロー（光輪）が生じ、微細構造が不明瞭になることに注意してください。このハロー（光輪）は、位相環による照明によって生じるアーティファクトです。明視野に切り替えると、この検体は非常に観察しにくいことがわかるでしょう。再び位相差法に切り替えると、ラット肝臓組織における細胞の構造と形状が明確に観察できます。この手法は1960年代後半に導入されて以来、活用されています。微分干渉（DIC）顕微鏡は、コントラストのある界面を強調することで微細構造の高解像度画像を得られるため、生物医学研究において広く利用されてきました。得られる画像は非常に薄い光学切片となります。実際に、光学切片を作成できるDICの能力により、共焦点顕微鏡を補完する透過光照明の有用な手法となっています。DIC顕微鏡は明視野光学顕微鏡に、光源とコンデンサーの間に配置された偏光子などの以下の要素を追加したものです。コンデンサー部分にDICビーム分割プリズム、対物レンズの直後にDICビーム結合プリズム、そして2つのレンズの間の無限遠空間にアナライザーが配置されています。DIC光学系から最高のパフォーマンスを得るためには、まず光学顕微鏡をケーラー照明に合わせてから、光路にDICエレメントを配置することが重要です。光源からの光は偏光板を通過し、その後、最初のプリズムによって分割されます。これら一対のビームは互いに近接して走行します。一対のビームが共に試料内の同じ物質を通過した場合、2番目のプリズムで再結合した際に互いに干渉せず、そのため灰色に見えます。しかし、構造の端では、一対のうちの一方のビームがもう一方とは異なる物質を通過するため、変化が生じます。これらの光束が2番目のプリズムによって再結合されると、建設的干渉が起きて明るい点となるか、あるいは相殺的干渉が起きて暗い点となります。ここでは、DICコントラストで観察した珪藻を示します。珪藻の構造の微細な詳細が容易に視認できることがわかります。しかし、DIC光学系を取り除くと、これらの詳細は消失します。試料全体のコントラストは、片側が明るく、もう一側が暗くなります。これにより地形のような印象を与えますが、実際にはこれは錯視です。シャドウキャスト効果の方向は、偏光フィルターをクロスオーバーポイントまで回転させて反対側のコントラストに切り替えることで反転させることができます。ここまで、位相差顕微鏡とDIC（微分干渉）の光学モードについて説明しました。改めてお伝えすると、位相差の除去は、コントラストのある試料を黒から白へと強調するため、無色透明な試料の観察に有用です。DIC（微分干渉コントラスト法）は、試料にコントラストを付与します。これは、薄い光学的切片の高解像度画像を作成することで実現されます。以上が概要です。ご視聴ありがとうございました。顕微鏡観察の成功をお祈りいたします。

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位相コントラストおよび微分干渉コントラスト（DIC）顕微鏡

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