Summary
महाधमनी लुमेन और सीवन बंधाव में कैथेटर सम्मिलन महाधमनी के hypoperfusion वासा adventitial के कारण जीर्ण हाइपोक्सिया प्रेरित । यह लेख उदर महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) के एक उपंयास पशु मॉडल मनुष्यों में एएए के समान विशेषताओं के साथ वर्णन करता है ।
Abstract
adventitial वासा vasorum (VV) महाधमनी दीवार को ऑक्सीजन और पौष्टिकता प्रदान करता है । महाधमनी दीवार में हाइपोक्सिया बढ़े हुए उदर महाधमनी aneurysms (आळे) पैदा कर सकता है. यह आलेख परिचय और वर्णन करता है कि एक मानक adventitial VV hypoperfusion महाधमनी लुमेन और बंधाव उदर infrarenal के टांका महाधमनी में कैथेटर प्रविष्टि के संयोजन के साथ बनाया के माध्यम से आळे प्रेरित करने के लिए प्रोटोकॉल का इस्तेमाल किया ।
प्रोटोकॉल 300-400 g, जो भोजन और पानी के विज्ञापन libitumप्रदान की जाती हैं वजनी पुरुष चूहों का उपयोग शामिल है । एक ventral midline उदर चीरा के साथ laparotomy के बाद, महाधमनी का छूटना प्रदर्शन किया है, जो perivascular ऊतक से रक्त के प्रवाह को रोकता है । Aortotomy एक छोटा सा गुर्दे धमनी शाखाओं के निकट चीरा शामिल किया जाता है, और एक टुकड़े कैथेटर एक 18-गेज निवास सुई का उपयोग कर डाला जाता है । चीरा की मरंमत के बाद, कैथेटर ब्लॉक पर महाधमनी के तंग बंधाव महाधमनी दीवार के माध्यम से समीपस्थ दिशा से रक्त प्रवाह VV महाधमनी रक्त के प्रवाह को परेशान किए बिना । इस तकनीक प्रगतिशील महाधमनी फैलाव के साथ एक एएए पैदा कर सकता है ।
इस मॉडल का सबसे बड़ा लाभ यह है कि VV hypoperfusion ऊतक हाइपोक्सिया और एक infrarenal एएए है, जो रूपात्मक और रोग विशेषताओं एक मानव एएए के उन लोगों के समान है के विकास का कारण बनता है ।
Introduction
उदर महाधमनी निम्नलिखित तीन परतों से बना है: भीतरी संवहनी दीवार (intima), औसत दर्जे का परत (मीडिया), और बाहरी संवहनी दीवार (adventitia), और इनमें से, adventitia एक अनूठा रक्त की आपूर्ति प्रणाली वासा vasorum (VV) के रूप में जाना जाता है । महाधमनी ऊतक महाधमनी रक्त प्रवाह1से adventitial VV छिड़काव और सरल ऑक्सीजन प्रसार के माध्यम से ऑक्सीजन के साथ आपूर्ति की है । हालांकि, भौगोलिक दृष्टि से, उदर महाधमनी ने महाधमनी के अंय भागों में, वीवीएस की तुलना में कम वितरण किया है । 2
एक पिछले अध्ययन में ऊतक हाइपोक्सिया पर सूचना दी मानव उदर महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) दीवारों के साथ मोटी intraluminal थक्का (ILT)3. इसके अतिरिक्त, यह दिखाया गया है कि aneurysmal दीवारों में एक adventitial VV एक काफी उच्च दर पर arteriosclerotic परिवर्तन के साथ occluded है, जो एएए दीवारों में ऊतक हाइपोक्सिया के साथ जुड़ा हुआ है4। इन निष्कर्षों के आधार पर, एएए के एक उपंयास कुतर मॉडल adventitial VV hypoperfusion5उत्प्रेरण द्वारा बनाया गया था । इस मॉडल में, VV hypoperfusion ऊतक हाइपोक्सिया और एक infrarenal एएए, जो रूपात्मक और रोग विशेषताओं एक मानव एएए6के उन लोगों के समान था के विकास के कारण । प्रधानमंत्री उदाहरण ILTs की उपस्थिति और hyperplastic adipocytes6के संचय थे, और क्षमता टूटना7,8पैदा करने के लिए । इन निष्कर्षों को शायद ही कभी पिछले कुतर मॉडलों में देखा गया है । इसलिए, इस मॉडल को बहुत एएए विकास और टूटना के लिए जिंमेदार तंत्र की गहरी समझ में योगदान कर सकते हैं । हम परिचय और adventitial VV hypoperfusion के माध्यम से आळे प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल एक मानक प्रोटोकॉल का वर्णन है, और हम शल्य चिकित्सा तकनीकों का उपयोग हाइपोक्सिया दीवार में महाधमनी प्रेरित करने के लिए कैसे समझाओ.
Protocol
- उपयोग नर चूहों वजनी ३००-४०० छ । चूहों को भोजन और पानी तक पहुंच की अनुमति दें ad libitum .
- Anesthetize isoflurane साँस लेना के साथ चूहे (२.०-३.० मिलीलीटर/ पैर की अंगुली चुटकी द्वारा उचित anesthetization की पुष्टि करें
- एक बिजली के रेजर के साथ पेट पर दाढ़ी बाल, और शराब और एक povidone आयोडीन समाधान के साथ पेट साफ़ ।
- को ऑपरेशन टेबल पर लापरवाह स्थिति में चूहे की जगह. चूहे पर पशु चिकित्सक मरहम का प्रयोग करें & #39; एस आंखों सूखापन को रोकने के लिए जबकि संज्ञाहरण के तहत ।
- एक कैंची का उपयोग कर एक ventral midline उदर चीरा के साथ एक laparotomy प्रदर्शन करते हैं । एक स्पष्ट शल्य क्षेत्र सुरक्षित करने के लिए, उदर गुहा के अंदर एक घाव ट्रैक्टर का उपयोग बाँझ धुंध के साथ उदर सामग्री पैक ।
- perivascular ऊतक से महाधमनी अलग करने के लिए, धीरे उठाओ और महाधमनी दीवार को बेनकाब करने के लिए चिमटी के साथ retroperitoneum फाड़ और infrarenal से महाधमनी के लिए छोड़ दिया गुर्दे की नस के स्तर से retroperitoneal में विभाजन छूटना perivascular ऊतक (< सुदृढ वर्ग = "xfig" > चित्रा 1a ).
- एक 5-0 रेशम स्ट्रिंग के साथ उदर महाधमनी से बंटी जहाजों Ligate महाधमनी है कि महाधमनी लुमेन संकीर्ण नहीं है से दूर एक बिंदु पर रक्त की आपूर्ति को ब्लॉक करने के लिए ।
- महाधमनी रक्त प्रवाह ब्लॉक करने के लिए, बस गुर्दे की धमनी के नीचे और बस महाधमनी के विभाजन के ऊपर नाड़ी क्लिप जगह.
नोट: क्लिप का आकार पूरी तरह से रक्त के प्रवाह को अवरुद्ध करने के लिए महाधमनी व्यास से बड़ा होना चाहिए । एक अस्थाई 5-0 सिल्क स्ट्रिंग संयुक्ताक्षर भी क्लिप के बजाय रक्त प्रवाह को अवरुद्ध करने के लिए पर्याप्त है । - महाधमनी दीवार की सतह पर एक डॉट नकसीर बनाने के लिए इसी तरह, एक माइक्रो-कैंची & #160 का उपयोग पूर्वकाल महाधमनी दीवार काट; 5 मिमी महाधमनी क्लिप से, गुर्दे की धमनी की शाखाओं से सटे, एक टुकड़े कैथेटर डालने के लिए.
- एक टुकड़े कैथेटर (बाहर व्यास ०.५५ mm, अंदर व्यास ०.३७ मिमी) डालने के पानी के साथ महाधमनी में दूर खून धोने के लिए चीरा के माध्यम से एक 24 गेज निवास सुई उथले का उपयोग कर । एक 1-एमएल पानी से भरे कैथेटर में सिरिंज प्रशासन, और दूर पानी के साथ महाधमनी में शेष रक्त धोने । सिंचाई के बाद, कैथेटर महाधमनी से निकालें.
- एक टुकड़े कैथेटर डालने से पहले (व्यास के अंदर १.२० mm, ०.९४ मिमी व्यास के भीतर) एक 18-गेज निवास सुई का उपयोग कर, 10 मिमी लंबे (< मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्रा 1b ) करने के लिए टुकड़े कैथेटर में कटौती ।
- चरण १.९ में किए गए चीरा से महाधमनी लुमेन में काटने का टुकड़ा कैथेटर डालें. पूरी तरह से महाधमनी लुमेन में 10 मिमी कैथेटर जगह है, और ( अर्थात , कैथेटर के साथ चीरा कवर) चीरा के स्थान से मेल करने के लिए कैथेटर की मध्यबिंदु की स्थिति ।
- मरम्मत बाधित & #160 के साथ चीरा; एक 8-0 monofilament स्ट्रिंग का उपयोग टांके (< सुदृढ वर्ग = "xfig" > चित्र 1C ).
- Ligate 5-0 रेशम स्ट्रिंग और टुकड़े कैथेटर का एक संयोजन का उपयोग उदर महाधमनी (< मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्रा 1 डी ).
नोट: महाधमनी लुमेन निवास कैथेटर द्वारा बनाए रखा जा सकता है । Ligate महाधमनी मजबूती से कैथेटर स्थिति को रोकने के लिए । सर्जन & #39; एस गांठ की सिफारिश की है, क्योंकि यह एक अतिरिक्त मोड़ जब गांठ के पहले फेंक बांधना कहते हैं, एक डबल हाथ गांठ बनाने, और एक अतिरिक्त मोड़ अधिक घर्षण प्रदान करता है और ढीला कम कर सकते हैं । - बंधाव के बाद, महाधमनी विभाजन पर नाड़ी क्लिप को हटा दें, और फिर, antegrade रक्त प्रवाह को बहाल करने के लिए गुर्दे की धमनी के नीचे संवहनी क्लिप को हटा दें । पुि सकल महाधमनी स्पंदन.
- दो परतों में उदर चीरा बंद, और अन्य परतों, एक 4-0 के साथ टांका. कसकर चीरा टांका एक फैला अंग को रोकने के लिए ।
- उदर चीरा पर सामयिक lidocaine लागू होते हैं. चेतना रिटर्न तक एक हीटिंग पैड पर चूहे प्लेस । एक चूहे को उपेक्षित मत छोड़ जब तक यह पर्याप्त चेतना को फिर से आ गया है स्टर्नल recumbency बनाए रखने के लिए । एक चूहा है कि अंय चूहों की कंपनी को आपरेशन आया है जब तक यह पूरी तरह से बरामद किया है वापस मत करो ।
- आपरेशन के बाद चूहे की बारीकी से निगरानी करते हैं । बाँझ खारा (१.०-२.० मिलीलीटर) के एक बोल्स सुई अगर एक चूहा संकट या शरीर के वजन घटाने के संकेत से पता चलता है ।
- पश्चात, एक अल्ट्रासाउंड echogram पर बढ़े हुए महाधमनी के समय-पाठ्यक्रम के विकास का निरीक्षण करें । अंदर के किनारे से अधिकतम व्यास को उदर महाधमनी के बाहरी किनारे तक मापने के रूप में वर्णित < सुप class = "xref" > 5 .
- बीस-आठ दिन पश्चात, प्रशासन सोडियम pentobarbital & #8805; १०० मिलीग्राम/intraperitoneally को चूहों euthanize ।
- कट खुला चूहा & #39; s उदर गुहास ventrally. प्रारंभिक एक स्केलपेल का उपयोग कर चीरा बनाओ । फसल धमनीविस्फार कैंची का उपयोग कर और 10% तटस्थ में काटा aortas जगह 24-48 h.
के लिए formalin बफर नोट: सर्जन जब धमनीविस्फार उजागर महाधमनी और अन्य अंगों के लिए चोट को रोकने के लिए सावधान रहना चाहिए. एक ऊंचा उदर अंग देखा जाना चाहिए, एएए गठन का संकेत है । < मजबूत वर्ग = "xfig" > चित्रा 2 vivo इमेज और ex vivo इमेज में एक दिखाता है; आळे का यह प्रतिनिधि नमूना टूटना नहीं है. - EVG दाग < सुप class = "xref" > 9
- हल वडा
- तैयार Verhoeff & #39; एस hematoxylin दिए गए आदेश में निम्नलिखित को मिलाकर: शराबी hematoxylin 20 मिलीलीटर, 10% घाट क्लोराइड ८.० मिलीलीटर, और Lugol & #39; s आयोडीन 8 मिली. एक अतिरिक्त के बीच समाधान मिश्रण । इस घोल को आवश्यकतानुसार ताजा तैयार किया जा सकता है.
- तैयार वान Gieson & #39; एस 1% एसिड fuchsin 1 मिलीलीटर और संतृप्त picric एसिड ४५ मिलीलीटर मिश्रण द्वारा समाधान । रात भर खड़े रहने की अनुमति दें और अच्छी तरह मिलाएं । यह समाधान 2 सप्ताह के लिए स्थिर है ।
- ४० मिलीलीटर आसुत पानी में 10% FeCl 3 10 मिलीलीटर मिश्रण से समाधान (2% घाट क्लोराइड) को तैयार । इस समाधान की आवश्यकता के रूप में ताजा तैयार हो सकता है ।
- १०० मिलीलीटर आसुत जल में ५.० ग्राम सोडियम thiosulfate को भंग करके 5% hypo तैयार करें । यह समाधान 1 वर्ष के लिए स्थिर है ।
- धुंधलाने सामा
नोट: देखें संदर्भ < सुप वर्ग = "xref" > 9 विवरण के लिए ।- संक्षेप में, 10 मिनट के लिए आसुत पानी में काटा aortas के फिक्स्ड आयल वर्गों हाइड्रेट । aortas को Verhoeff & #39; एस hematoxylin 25 मिनट के लिए रखें । पानी से धोएं और घोल में 10-30 बार डुबकी लगाएं (2% FeCl 3 ) । पानी में कुल्ला । 5% hypo में 1 मिनट के लिए रखें पानी में धो लें । जगह वान Gieson & #39; s समाधान के लिए 5 min. शराब में
- निर्जलीकरण निंनलिखित क्रम में: ७५%, ९०%, ९५%, १००%, और 30 के लिए १००% शराब प्रत्येक । फिर, 5 मिनट के लिए xylene में स्पष्ट है, दो बार । राल बढ़ते माध्यम के साथ एक coverslip पर प्लेस.
नोट: लोचदार फाइबर काले करने के लिए नीले काले दिखाई देते हैं; नाभिक: नीला करने के लिए ब्लॅकck; कोलेजन: लाल; और अंय ऊतक तत्व: पीला.
- हल वडा
Representative Results
वर्णित ऑपरेटिव तकनीकों चूहों में infrarenal उदर महाधमनी के एक मिश्रण कैथेटर प्रविष्टि और टांका बंधाव का एक संयोजन का उपयोग करके एक पुरानी महाधमनी हाइपोक्सिया-प्रेरित धमनीविस्फार के एक उपंयास पशु मॉडल बना । प्रोटोकॉल अनुभाग में वर्णित चूहों को प्रक्रिया के बाद 28 दिन euthanized किया गया । aortas काटा और धमनीविस्फार गठन कल्पना की छवि थे । चित्रा 2 fusiform एएए के विकास से पता चलता है. पूर्व vivo में महाधमनी के ऊपरी और निचले छोर के फैलाव के बिना एक सामान्य व्यास है । महाधमनी व्यास ने transabdominal ट्रा (figure 3) का इस् तेमाल मापा था । व्यास आम तौर पर प्रक्रिया के बाद लगभग 14 दिनों में अपने अधिकतम आकार तक पहुंचता है; इसके बाद, यह अपरिवर्तित या थोड़ा बढ़ जाता है । चित्रा 4 EVG धुंधला के बाद अपनी अधिकतम व्यास पर धमनीविस्फार की histopathological छवि से पता चलता है । 28 दिन पर ऊतक की छवि (धमनीविस्फार) लोचदार फाइबर की प्रमुख गिरावट से पता चला है कि 0 दिन पर की तुलना में ।
चित्रा 1: एक उदर महाधमनी धमनीविस्फार (एएए) प्रेरित करने के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं.
(क) infrarenal महाधमनी आसपास के ऊतकों से छूटना है । (ख) एक टुकड़े कैथेटर में कटौती 10 मिमी लंबे समय महाधमनी में एक छोटा सा चीरा के माध्यम से डाला जाता है । (ग) चीरा एक 8-0 monofilament टांका और रक्त प्रवाह के साथ सुधार हुआ है बहाल कर रहा है । (घ) महाधमनी डाला कैथेटर पर 5-0 रेशम सीवन के साथ ligated है । स्केल बार = 5 मिमी. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्रा 2: पश्चात प्रतिनिधि परिणाम ।
Macroscopic पर देखें पश्चात दिवस 28 fusiform उदर महाधमनी aneurysms का विकास दिखा । retroperitoneum का ऊंचा मार्जिन धमनीविस्फार के बाहरी छोर से मेल खाती है (टूटी लाइनें; बाएं) । महाधमनी के ऊपरी और निचले सिरों में पूर्व vivo सामांय (दाएं) हैं । स्केल बार = 3 मिमी. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें.
चित्र 3: transabdominal ट्रा का उपयोग करके मापा गया अधिकतम महाधमनी व्यास ।
महाधमनी व्यास इस चूहे मॉडल में तेजी से वृद्धि हुई । महाधमनी व्यास एक मतलब ± मानक विचलन (n = 12) के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 4: Elastica वान Gieson धुंधला के साथ aneurysmal ऊतक के प्रतिनिधि छवियां ।
EVG मीडिया और एक intraluminal थक्का के गठन में अपक्षयी लोचदार लेमिना दिखा धुंधला के साथ ऊतकीय मूल्यांकन प्रक्रिया (सही) के बाद 28 दिन । महाधमनी मीडिया में लोचदार फाइबर विखंडन और महाधमनी adventitia में विरल कोलेजन फाइबर 28 दिन पर मनाया जाता है । 0 दिन प्रक्रिया (बाएं) से पहले है । स्केल बार = ५०० µm. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.
Discussion
शारीरिक स्थितियों के तहत, महाधमनी दीवार के भीतरी परतों चमकदार रक्त प्रवाह से प्रसार द्वारा पाला है, जबकि बाहरी और मध्यम परतों VV, जो adventitia से औसत दर्जे का VV1में घुसना द्वारा पोषण कर रहे हैं । उदर महाधमनी दीवार में VV रक्त प्रवाह निम्न तीन दिशाओं से उत्पन्न कर सकते हैं: (1) महाधमनी दीवार के माध्यम से समीपस्थ दिशा, (2) महाधमनी दीवार के माध्यम से बाहर की दिशा, और (3) perivascular ऊतकों10. पहले, मानव ऊतकों के हमारे ऊतकीय विश्लेषण एएए दीवार में महत्वपूर्ण प्रकार का रोग या VV के रोड़ा की पहचान की, सुझाव है कि उदर महाधमनी दीवार में VV रक्त के प्रवाह को कम किया जा सकता है4। यह इस प्रोटोकॉल में एक अत्यंत महत्वपूर्ण मुद्दा यह है कि एक infrarenal एएए infrarenal उदर महाधमनी के एक टुकड़े कैथेटर प्रविष्टि और टांका बंधाव के संयोजन के कारण होता था । ध्यान से ऊतक परत छूटना करने के लिए, सर्जन सुचारू रूप से महाधमनी में एक टुकड़े कैथेटर डालने और दृढ़ता से महाधमनी ligate hypoperfusion adventitial और VV गठन के धमनीविस्फार के कारण जीर्ण हाइपोक्सिया का कारण होना चाहिए । इन तकनीकों का प्रयोग, महाधमनी दीवार में रक्त के प्रवाह के फलस्वरूप कमी आई है, और एक स्थानीय hypoxic वातावरण प्रेरित है । रक्त प्रवाह में कमी और हाइपोक्सिया प्रेरित धमनीविस्फार गठन इंगित करता है कि उदर महाधमनी दीवार में VV रक्त का प्रवाह एएए गठन की रोगजनन में एक भूमिका निभाता है ।
विशेष रूप से, एक महाधमनी धमनीविस्फार मॉडल निंनलिखित शर्तों को पूरा करना चाहिए: एक १.५-आधारभूत की तुलना में संवहनी व्यास में वृद्धि गुना, tunica मीडिया के पतन, और महाधमनी दीवार की सूजन । सबसे लोकप्रिय पशु मॉडल CaCl211, elastase12, और एन्जियोटेन्सिन द्वितीय13के रूप में, पदार्थों का उपयोग भड़काऊ प्रतिक्रियाओं उत्प्रेरण द्वारा निर्माण किया गया है । इन मॉडलों को एक उच्च reproducibility और स्पष्ट रूप से रोग परिवर्तन का कारण हो सकता है, और वे सामांयतः अनुसंधान अध्ययन में इस्तेमाल किया गया है । हमारे मॉडल में, प्रक्रिया के बाद 28 दिन तक कार्यविधि का प्रदर्शन करने से पहले हमने हर 7 दिन में स् ट्रा का उपयोग करते हुए महाधमनी व्यास का आकलन किया (आरेख 3) । परिणाम से पता चला कि महाधमनी व्यास मामूली 28 दिनों में वृद्धि हुई है, यह दर्शाता है कि व्यास में यह परिवर्तन पिछले कुतर मॉडलों में के समान है । संवहनी फार्म का सकल अवलोकन एक चिकनी fusiform आकार (चित्रा 2) का संकेत दिया । 28 दिन पर, हम चूहों बलिदान और महाधमनी ऊतक कि बरामद किया गया था की histopathological विश्लेषण किया । फाड़ और tunica मीडिया और adventitia के लोचदार और कोलेजन फाइबर के गायब (चित्रा 4) मनाया गया । इसके अलावा, भड़काऊ कोशिकाओं, जैसे मैक्रोफेज, tunica adventitia से tunica मीडिया के लिए मौजूद थे ।
वर्तमान में, उपचार आळे के लिए उपलब्ध विकल्प शल्य चिकित्सा की मरंमत और अंतर्वाहिकी स्टेंट, एएए टूटना के साथ रोगियों में 30-50% की मृत्यु दर के साथ भ्रष्टाचार करने के लिए सीमितहैं14 । हालांकि, आळे के इलाज के लिए कोई दवा नैदानिक उपयोग के लिए अनुमोदित किया गया है । वहां बहस है कि मनुष्यों और एएए अनुसंधान में प्रयुक्त पशु मॉडल की स्थापना के बीच रोग निष्कर्षों में विसंगति हैं । मानव एएए और पशु एएए मॉडल के बीच रोगजनन में समानताएं औषधीय उपचार के विकास के लिए आवश्यक हैं । कुतर मॉडलों की प्रभावशीलता के संबंध में, हमारा चूहा मॉडल intraluminal थक्का5 और adipogenesis8के संदर्भ में मनुष्यों के समान आकृति है । इसके अलावा, इस अध्ययन में चूहों के बारे में 20% एएए टूटना था और प्रक्रिया के बाद 28 दिनों के भीतर मर गया । हालांकि महाधमनी धमनीविस्फार टूटना इस रोग के लिए सबसे महत्वपूर्ण घटना है, टूटना स्थापित प्रयोगात्मक एएए मॉडल के साथ असामांय है, और तंत्र का आविर्भाव अभी तक नहीं किया गया है । इसलिए, इस मॉडल महाधमनी व्यास और धमनीविस्फार का टूटना के फैलाव के तंत्र को समझने के लिए उपयोगी है ।
इस मॉडल के निर्माण के लिए कुछ शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की आवश्यकता है । इसलिए, शोधकर्ताओं इस मॉडल है, जो इस मॉडल की एक सीमा है बनाने का अभ्यास करना चाहिए । भविष्य में हम एक ऐसा मूषक मॉडल बनाना चाहेंगे जिसमें हम VV की दीवारों को धीरे-से गाढ़ा करके रक्त प्रवाह में कमी कर सकें, जिसके परिणामस्वरूप सहज महाधमनी धमनीविस्फार.
Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस काम के लिए अनुदान में सहायता द्वारा समर्थित किया गया था वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए (ख) (२०२९१९५८) N.U. करने के लिए; युवा वैज्ञानिकों के लिए अनुदान में सहायता (A) (२५७१३०२४) to nz
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| rat | Japan SLC.Inc | Slc:SD rat | Sprague–Dawley ratTM |
| povidone-iodine solution | Libatape Pharmaceutical Co., Ltd. | 4987335 111457 | |
| 5-0 silk string | Akiyama Medical MFG. CO.,LTD | JIS No.1 | |
| vascular clips | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | C-42-S-2 | |
| polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle) | MEDIKIT | 24G | Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle |
| polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle) | MEDIKIT | 18G | Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle |
| 8-0 monofilament string | Ethicon Suture | c-42-S-2 | PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture |
References
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