Waiting
로그인 처리 중...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

تطبيق بضع الوخز بالإبر في نموذج هشاشة العظام في الركبة في الأرانب

Published: October 20, 2023 doi: 10.3791/65584

Summary

في هذا البروتوكول ، تم إعداد نموذج هشاشة العظام في الركبة باستخدام طريقة Videman المعدلة ، وتم تفصيل إجراءات التشغيل واحتياطات بضع الإبر. تم إثبات فعالية بضع الوخز بالإبر من خلال اختبار الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ والأوتار والخصائص الميكانيكية والمورفولوجية للغضروف.

Abstract

يعد التهاب المفاصل في الركبة (KOA) أحد أكثر الأمراض التي يتم مواجهتها بشكل متكرر في قسم جراحة العظام ، مما يقلل بشكل خطير من نوعية حياة الأشخاص المصابين بالتهاب المفاصل الكركي (KOA). من بين العديد من العوامل المسببة للأمراض ، يعد الخلل الميكانيكي الحيوي لمفصل الركبة أحد الأسباب الرئيسية ل KOA. يعتقد علم الوخز بالإبر أن استعادة التوازن الميكانيكي لمفصل الركبة هو مفتاح علاج KOA. أظهرت الدراسات السريرية أن بضع الوخز بالإبر يمكن أن يقلل الألم بشكل فعال ويحسن حركة الركبة عن طريق تقليل الالتصاق وتقلص الأنسجة الرخوة ونقاط تركيز الإجهاد في العضلات والأوتار حول مفصل الركبة.

في هذا البروتوكول ، استخدمنا طريقة Videman المعدلة لإنشاء نموذج KOA عن طريق تثبيت الطرف الخلفي الأيسر في وضع مستقيم. لقد حددنا طريقة التشغيل والاحتياطات المتعلقة ببضع الوخز بالإبر بالتفصيل وقيمنا فعالية بضع الوخز بالإبر بالتزامن مع نظرية "تعديل العضلات والأوتار لعلاج اضطرابات العظام" من خلال الكشف عن الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ والأوتار ، وكذلك ميكانيكا الغضاريف والمورفولوجيا. أظهرت النتائج أن بضع الوخز بالإبر له تأثير وقائي على الغضروف عن طريق ضبط الخواص الميكانيكية للأنسجة الرخوة حول مفصل الركبة ، وتحسين بيئة إجهاد الغضروف ، وتأخير تنكس الغضروف.

Introduction

هشاشة العظام في الركبة (KOA) هو الشكل الأكثر شيوعا من هشاشة العظام ، وغالبا ما يتم التعرف عليه على أنه مرض مفصل كامل يتميز بتنكس الغضروف المفصلي ، والذي يتجلى سريريا على شكل ألم وتورم وحركة محدودة للمفاصل المصابة1. وفقا للإحصاءات الوبائية الأخيرة ، تشير التقارير إلى أن KOA قد أثرت على 654.1 مليون فرد على مستوى العالم ممن تبلغ أعمارهم 40 عاما أو أكثر بحلول عام 2020. ويزداد معدل انتشار وحدوث التهاب المفاصل الخفيف مع تقدم العمر، وهما الأعلى في البالغين في منتصف العمر وكبار السن، ويؤثران على النساء أكثر من الرجال2. من المرجح أن يزداد انتشار KOA بسبب شيخوخة السكان ووباء السمنة في جميع أنحاء العالم ، مما يشكل تهديدا متزايدا للصحة العامة العالمية. يؤثر العمر والجنس والسمنة والصدمات وعوامل الخطر المعقدة الأخرى المرتبطة ب KOA بشكل مباشر على عدم استقرار الركبة ، مما يجعل عدم التوازن الميكانيكي الحيوي في مفاصل الركبة أحد الأسباب الرئيسية ل KOA3.

في ظل الظروف الفسيولوجية العادية ، يكون مفصل الركبة في حالة توازن ميكانيكي ، مما يضمن توزيع الأحمال الميكانيكية في المفصل بالتساوي على الغضروف. يمكن أن يؤدي أي خلل ميكانيكي في مفصل الركبة إلى إجهاد غير طبيعي في الغضروف ، مما يؤدي إلى تنكس الغضروف وظهور KOA4. نظام وتر العضلات هو النظام الديناميكي الرئيسي الذي يحافظ على التوازن الميكانيكي لمفصل الركبة. يمكن للحركة المنسقة لنظام الباسطة ووتر العضلات المثنية أن توزع بالتساوي الحمل الناتج عن الحركة على سطح الغضروف ، وتجنب الخلل الأيضي لضغوط الغضروف المحلية بما يتجاوز الحمل الفسيولوجي الذي يؤدي إلى فقدان الغضروف5. انخفاض قوة العضلات هو السبب الرئيسي لاضطراب الحركة العضلية وتلف الغضروف ، والذي قد يحدث قبل ظهور أعراض KOA.

يمكن أن يؤدي KOA أيضا إلى تثبيط العضلات المفصلية (AMI) ، مما يظهر على شكل ضعف العضلات وانخفاض قوة العضلات حول الركبة6. من بين هذه العضلات ، تعمل مجموعة الفخذ الفخذي الرباعية باعتبارها الباسطة الوحيدة للركبة ، وهي بنية مهمة في الحفاظ على استقرار مفصل الركبة. أظهرت الدراسات أن الانخفاض في منطقة المقطع العرضي لعضلات الفخذ وقوة العضلات يرتبط ارتباطا كبيرا وإيجابيا بتقدم KOA7. يؤثر الانخفاض في قوة عضلات الفخذ على نمط المشي واستقرار الركبة وأنماط الحركة والعديد من الوظائف الأخرى. علاوة على ذلك ، فإن انخفاض قوة العضلات يضعف وظيفة الأوتار ، ويتجلى ذلك في انخفاض تصلب الأوتار ، ومعامل المرونة ، وغيرها من الخصائص الميكانيكية الحيوية8. في إصلاح الإجهاد على المدى الطويل ، قد تحدث تغييرات مثل الالتصاق والتقلص في عضلات وأوتار مفصل الركبة ، مما يضر بخصائصها الميكانيكية ، ويسبب عدم استقرار المفاصل ، ويشكل في النهاية حلقة مفرغة من التغيرات المرضية ل KOA. لذلك ، من الضروري لعلاج KOA تحسين الخواص الميكانيكية لنظام وتر العضلات واستعادة التوازن الميكانيكي للمفصل.

من بين أسباب KOA، الخلل الميكانيكي الحيوي هو العامل الرئيسي الذي يسبب آلام الركبة والخلل الوظيفي والآفات الالتهابية وتنكس الغضروف9. لذلك ، فإن مفتاح علاج KOA هو استعادة التوازن الميكانيكي الحيوي لمفصل الركبة. يعتقد علم الوخز بالإبر أن المسببات المرضية ل KOA هي "اختلال التوازن الميكانيكي". عندما تتغير الخصائص الميكانيكية للأنسجة الرخوة حول الركبة بشكل غير طبيعي ، يفقد مفصل الركبة توازنه الميكانيكي ، وتسرع بيئة الإجهاد الميكانيكي غير الطبيعية للمفصل من التنكس ، مما يتسبب في تحفيز التهابي يزيد من تفاقم التصاقات الأنسجة الرخوة والتقلصات والمزيد من الانخفاض في استقرار المفاصل. تتطور هذه الحلقة المفرغة في النهاية إلى KOA. من خلال تخفيف التصاقات وتقلصات الأنسجة الرخوة ، وكذلك تقليل تركيز الإجهاد في العضلات والأوتار ، فإن بضع الوخز بالإبر جنبا إلى جنب مع نظرية "تعديل العضلات والأوتار لعلاج اضطرابات العظام" يحسن ميكانيكا الأنسجة الرخوة و "يعدل العضلات والأوتار" ، مما يوازن بين الضغط الميكانيكي للمفصل ، ويخفف بشكل فعال من تنكس الغضروف و "يعالج اضطرابات العظام"10. فيما يتعلق باختيار النموذج الحيواني ، بناء على الغرض من هذه الدراسة ، قمنا بإعداد نموذج KOA بطريقة Videman المعدلة لتجميد تمديد الطرف الخلفي الأيسر.

يفصل هذا البحث إنشاء نموذج KOA باستخدام طريقة Videman المعدلة لتجميد تمديد الطرف الخلفي الأيسر وطريقة التشغيل واحتياطات بضع الإبر. نثبت فعالية بضع الوخز بالإبر من خلال اختبار الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ والأوتار والكشف عن التغيرات في إجهاد الغضروف المفصلي والتشكل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تمت مراجعة جميع التجارب على والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات بجامعة بكين للطب الصيني (No. BUCM-4-2022010101-1097). في هذا البروتوكول ، تم إيواء 24 من ذكور الأرانب النيوزيلندية البالغة من العمر 6 أسابيع في ظل ظروف معينة ، وهي 20-25 درجة مئوية ، ورطوبة 50-60٪ ، ودورة يومية مظلمة لمدة 12 ساعة / 12 ساعة ، مع حرية الوصول إلى نظام غذائي منتظم للتشاو. تم تخدير الأرانب والتضحية بها من خلال الجمع بين التخدير العميق والانصمام الهوائي. الألم هو أحد السمات المرضية النموذجية ل KOA وهو أيضا أحد المؤشرات الرئيسية المستخدمة لتقييم النماذج الحيوانية ل KOA وطرق التدخل ، لذلك لا يتم استخدام المسكنات أثناء إعداد النموذج.

1. نموذج أرنب KOA

  1. تخدير الأرانب ب 3٪ من صوديوم بنتوباربيتال (30 مجم / كجم) عن طريق الوريد عند حافة الأذن. لتأكيد المستوى المناسب من التخدير ، ابحث عن منعكس القرنية الضعيف أو الغائب بشكل كبير وغياب الألم عند تثبيت الجلد بملقط مرقئ. أثناء التخدير ، أضف 2-3 قطرات من مواد التشحيم إلى عيون الأرانب كل 15 دقيقة لمنع عيون الأرانب من الجفاف.
  2. بعد التخدير ، قم بإصلاح كل أرنب في وضع ضعيف ، وسحب الطرف الخلفي الأيسر إلى وضع ممتد بالكامل.
  3. إصلاح الطرف الخلفي الأيسر لكل أرنب في وضع ممتد.
    1. كطبقة أولى ، استخدم شريطا طبيا لتغطية جلد الأرنب من الفخذ إلى مفصل الكاحل.
    2. كطبقة ثانية ، لف شريطا رغويا على الوجهين بعرض 36 مم فوق الشريط الطبي ثم لف ضمادة بوليمر من الفخذ إلى مفصل الكاحل. تأكد من أن مفصل الركبة مستقيم 180 درجة وأن مفصل الكاحل مثني ظهريا بمقدار 60 درجة.
    3. كطبقة ثالثة ، شل حركة المفاصل بجبائر صغيرة في الجزء الأمامي والخلفي من مفاصل الركبة والكاحل ، ولف شبكة فولاذية حول الطبقة الخارجية للحماية من اللدغات. فضح أصابع الأرانب لمراقبة ما إذا كانت الدورة الدموية طبيعية.
  4. شل حركة لمدة 6 أسابيع لإنشاء نموذج KOA (الشكل 1).
    ملاحظة: 1) أثناء إعداد النموذج ، افحص القوالب كل يوم. إذا كانت أي قوالب فضفاضة أو منفصلة ، فقم بتخدير الأرانب ، وأعد تثبيت الأطراف الخلفية اليسرى في وضع ممتد. 2) ضع حصائر واقية في قاع الأقفاص لمنع أطراف الأرانب من التعلق والتسبب في الإصابة.

2. تدخل بضع الوخز بالإبر

ملاحظة: قبل بدء التدخل بالإبر ، قم بتخدير الأرانب ب 3٪ من صوديوم بنتوباربيتال (30 مجم / كجم) عن طريق الحقن الوريدي بهامش الأذن.

  1. تحديد نقاط العلاج.
    1. حلق فرو مفصل الركبة للطرف الخلفي الأيسر للأرنب.
    2. جس مفصل الركبة الأرنب إدخال وتر العضلات الفخذية الإنسية ، وإدخال وتر الفخذ المستقيم ، وإدخال وتر العضلة ذات الرأسين الفخذية ، والجراب ذو القدم الأوز. بمناسبة التصلب المرضي للعضلات المحلية مع علامة الجلد المعقمة. تطهير مفصل الركبة ثلاث مرات مع جولات متناوبة من اليودوفور الطبي و 75 ٪ من الكحول الطبي.
  2. عملية بضع الوخز بالإبر
    1. حافظ على شفرة بضع الوخز بالوازي لاتجاه السفر الموازي للوتر والمحور الطولي للطرف.
    2. استخدم إبهام اليد اليسرى للضغط لأسفل على الجلد الداخل إلى نقطة العلامة والتحرك بشكل جانبي بحيث يتم فصل الأوعية الدموية والأعصاب على الجانب البطني من الإبهام.
    3. باستخدام مقبض بضع الوخز بالإبر في اليد اليمنى ، اضغط لأسفل بسرعة بقوة صغيرة حتى تمر شفرة بضع الوخز بالإبر على الفور عبر الجلد. تقدم شفرة بضع الوخز بالإبر ببطء إلى التصلب العضلي المحلي وقم بعمل جروح طولية وتأرجح جانبي.
    4. بعد اكتمال عملية بضع الوخز بالإبر ، قم بتطهير مفصل الركبة مرة أخرى وتطبيق ضمادة.
  3. قم بإجراء هذه العملية مرة واحدة في الأسبوع لمدة 4 أسابيع (الشكل 2).
    ملاحظة: 1) إذا لم يكن هناك تصلب أو نسيج يشبه الحبل السري تم لمسه عند إدخال وتر الأسهر الإنسي أو الأسهر الجانبي أو المستقيم الفخذي أو العضلة ذات الرأسين الفخذية أو الجراب الأنسيرين ، فيجب استخدام إبرة بضع الوخز بالإبر لتحرير إدخالات الأوتار مباشرة. 2) أثناء التدخل بالإبر ، لا تشل حركة الأطراف الخلفية اليسرى للأرانب في مجموعة بضع الإبر والمجموعة النموذجية في وضع التمديد.

3. معامل مرونة عضلات الفخذ الفخذية

ملاحظة: 1) استخدمت هذه التجربة أداة التشخيص بالموجات فوق الصوتية للتصوير الإلستوجرافي بالموجات فوق الصوتية (SWE) في الوقت الفعلي لقياس معامل المرونة لعضلات الفخذ الرباعية في الجسم الحي في كل مجموعة من الأرانب. 2) يجب أن يكون المختبر أخصائي تخطيط بالموجات فوق الصوتية من ذوي الخبرة في الكشف عن الموجات فوق الصوتية. عند القياس ، يجب وضع مسبار الموجات فوق الصوتية برفق على سطح الجلد من عضلات الفخذ لتجنب توتر العضلات المحلية. يجب أخذ القياسات عندما يكون في حالة هادئة ، دون أن يكافح أو نشاط. إذا كان نشطا ، انتظر حتى يهدأ قبل إجراء الاختبار.

  1. حلق الفراء لكشف الجلد في منطقة عضلات الفخذ من الطرف الخلفي الأيسر.
  2. استخدم الموجات فوق الصوتية التقليدية ثنائية الأبعاد لتحديد موقع عضلات البطن الرباعية وتحديد منطقة الاهتمام (ROI) ، على عمق 1-2 سم.
  3. ابدأ وضع SWE للفحص.
    1. اضبط منطقة الاهتمام بشكل موحد على منطقة دائرية بقطر 2 مم ومنطقة الاهتمام بعمق ~ 0.5-1 سم من سطح الجلد.
    2. استخدم أداة التشخيص بالموجات فوق الصوتية لتوليد نبضة قوة الإشعاع الصوتي لتحفيز الأنسجة العضلية والحصول على التصوير الإلستوجرافي للأنسجة.
    3. انتظر حتى تستقر الصورة لمدة 2-3 ثوان ثم قم بتجميد الصورة. قم بتنشيط وظيفة Q-BOX للأداة لقياس معامل يونغ لعضلة الفخذ.
    4. انتظر حتى يقوم النظام تلقائيا بحساب القيم القصوى والدنيا والمتوسطة (الوحدة: KPa) لمعامل Young لعائد الاستثمار. حدد ثلاثة عائد استثمار بنفس العمق لثلاثة قياسات وخذ متوسط القيمة للتحليل الإحصائي.
      ملاحظة: يجب أن يكون المختبر أخصائي تصوير بالموجات فوق الصوتية من ذوي الخبرة في الكشف عن الموجات فوق الصوتية. عند القياس ، يجب وضع مسبار الموجات فوق الصوتية برفق على سطح الجلد من عضلات الفخذ لتجنب توتر العضلات المحلية. يجب أخذ القياسات عندما يكون في حالة هادئة ، دون أن يكافح أو نشاط. إذا كان نشطا ، انتظر حتى يهدأ قبل إجراء الاختبار.

4. قياس قوة انقباض عضلات الفخذ الفخذية

ملاحظة: بعد قياس قوة انقباض عضلات الفخذ الفخذية ، تم القتل الرحيم للأرانب عن طريق انسداد الهواء تحت التخدير.

  1. تخدير الأرانب ب 3٪ بنتوباربيتال الصوديوم (30 مجم / كجم) عن طريق الوريد عند حافة الأذن. للتأكد من الوصول إلى المستوى المناسب من التخدير ، ابحث عن منعكس القرنية الضعيف أو الغائب بشكل كبير وغياب الألم عند تثبيت الجلد بالملقط المرقئ. أثناء التخدير ، أضف 2-3 قطرات من مواد التشحيم إلى عيون الأرانب كل 15 دقيقة لمنع عيون الأرانب من الجفاف.
  2. كشف عضلات الفخذ وإرفاق محول التوتر.
    1. قطع الجلد تحت الرضفة ، على طول المحور الطولي للطرف صعودا إلى قاعدة الفخذ ، والاستمرار في قطع الجلد لأعلى بمقدار 3-4 سم. تقشر بعناية الجلد واللفافة ، وفضح العضلات. قطع الرباط الرضفي وفصل بعناية عضلات الفخذ من تقاطع الحرقفي ، والحفاظ على عضلات الفخذ في اتصال مع iliacium.
    2. ربط الغرز الجراحية عند تقاطع الوتر بين الرضفة وعضلة الفخذ. قم بتمديد العضلة إلى طولها الكامل في حالتها الطبيعية ثم قم بتوصيلها بمحول التوتر. حافظ على خط الربط على العضلة في خط مستقيم مع خط الربط على محول القوة.
    3. قم بتثبيت محول التوتر على الحامل. قم بتوصيل خط اكتساب الإشارة على محول التوتر بمعالج نظام اكتساب الإشارات الحيوية.
  3. قياس الأداء المقلص لعضلة الفخذ.
    1. أدخل الأقطاب الكهربائية الموازية لعضلات الفخذ وتجنب أي اتصال بين الأقطاب الكهربائية.
    2. اضغط على زر راسم الذبذبات. اضبط موضع محول القوة على الحامل للحفاظ على خط الأساس عند الصفر. حدد معلمات التحفيز للمحفز بعرض موجة 5 مللي ثانية وتأخير 10 مللي ثانية.
    3. استخدم محفزا واحدا أولا واضبط شدة التحفيز تدريجيا من الصفر بزيادة قدرها 0.1 فولت في كل مرة. راقب التغيرات في منحنى تقلص العضلات وسعة الانقباض حتى يتم تحديد الحد الأقصى لسعة الانقباض الفردي (Pt) لعضلات الفخذ. سجلها للإحصاءات اللاحقة.
    4. استخدم المثير العنقودي ، واستخدم سعة المثير التي تحفز أقصى سعة انكماش مفردة كخط أساس لتحفيز العضلات باستمرار وزيادة تردد المثير تدريجيا. راقب التغيرات في منحنى تقلص العضلات حتى يتم تحديد أقصى سعة تقلص (Pt) لعضلات الفخذ. سجلها للإحصاءات اللاحقة.
      ملاحظة: 1) بعد كل تقلص عضلي ، يجب إعطاء العضلات 30 ثانية للاسترخاء مع تقطير محلول العضلات العازل باستمرار على العضلات. 2) أثناء العملية ، احكم على حالة التخدير من خلال مراقبة منعكس جفن الأرانب ، وإيقاع الجهاز التنفسي ، واسترخاء العضلات واستجابة قرص الجلد.

5. الأداء الميكانيكي لوتر عضلات الفخذ

  1. المعالجة المسبقة: في يوم الاختبار ، قم بقياس طول وعرض وسمك وتر عضلات الفخذ باستخدام الفرجار الورني ، وقم بتثبيت مشبك خاص مضاد للانزلاق في آلة اختبار التعب. كرر التحميل والتفريغ 15x للمعالجة المسبقة.
  2. اختبار استرخاء الإجهاد: استخدم المستشعر الذي يتراوح من 0 نيوتن إلى 100 نيوتن ، وقم بتمديده بسرعة 5 مم / دقيقة حتى يصل إلى الطول المطلوب ، ثم ابدأ في جمع البيانات. اضبط وقت الحصول على بيانات الكمبيوتر من t (0) ، وجمع البيانات كل 0.1 ثانية ، واستمر لمدة 1800 ثانية. بعد الوصول إلى الوقت المحدد ، قم بتسجيل البيانات والمنحنيات.
  3. اختبار الشد: استخدم المستشعر الذي يتراوح من 0 نيوتن إلى 100 نيوتن وقم بتمديده بسرعة 5 مم / دقيقة إلى أقصى حمل حتى يتم سحب العينة. بعد الاختبار ، احسب الحد الأقصى للإزاحة والحمل النهائي وصلابة العينة.

6. ضغط سطح ملامسة المفصل والضغط لكل وحدة مساحة من الغضروف

  1. إصلاح عينات عظم الفخذ والساق على كلا الجانبين في وضع مستقيم على المباراة وإجراء اختبار التحميل المسبق. قم بقياس النطاق التقريبي لمفصل الركبة ، وقم بقص الورق الحساس للضغط بنفس الشكل ، وختمه بغلاف بلاستيكي.
  2. ضع الورق الحساس للضغط المختوم بين مفاصل الساق وعظم الفخذ ، وقم بإجراء اختبار ضغط على مفصل الركبة بضغط 5 مم / دقيقة وضغط أقصى 50 نيوتن. حافظ على الضغط لمدة 2 دقيقة حتى يصل إلى 50 نيوتن عندما يكون الورق الحساس للضغط ملونا بثبات.
  3. بعد 2 دقيقة ، قم بإزالة الورق الحساس للضغط ، وثبت السطح الملون على ورقة بحجم A4 ، واحصل على صور مع وضع المقياس جانبا.
  4. قم بتحميل الصورة إلى الكمبيوتر. استخدم البرنامج المرجعي لقياس المساحة والقياس متعدد الأجزاء للأرقام غير المنتظمة. قياس الضغط على داخل وخارج مفاصل عظم الفخذ والساق وتسجيل النتائج.

7. Safranin O / تلطيخ أخضر سريع لغضروف مفصل الركبة

  1. بعد نهاية التدخل بالإبر ، خذ الأنسجة المعقدة للعظام الغضروفية تحت الغضروف وقم بتضمينها في البارافين. شريحة كتل الشمع الأنسجة المعدة وإعداد الشرائح. إزالة الشرائح الورقية المحضرة بمحلول إزالة الشمع البيئي (I) ومحلول إزالة الشمع البيئي (II) لمدة 15 دقيقة لكل منهما ؛ ثم قم بغمسها على التوالي في الزيلين والإيثانول اللامائي (1: 1) ، والإيثانول اللامائي (I) ، والإيثانول 95٪ ، والإيثانول 85٪ ، والإيثانول 75٪ ، 2-5 دقائق لكل خطوة ؛ وأخيرا ، انقعها في الماء المقطر لمدة 15 دقيقة.
  2. أداء تلطيخ.
    1. تلطيخ الشرائح بمحلول Fast Green لمدة 1 دقيقة. خلال هذه العملية ، أخرج الشرائح من المحلول وراقبها تحت المجهر حتى تصبح الأنسجة ملطخة باللون الأخضر الداكن.
    2. فصل اللون: اشطف محلول Fast Green الزائد بالماء عالي النقاء. نقع الشرائح بسرعة في محلول حمض الخليك 1 ٪ لمدة 5 - 10 ثوان.  مرة أخرى ، شطف الشريحة بالماء عالي النقاء.
    3. قم بتلطيخ الشرائح في محلول Safranine O لمدة 10-15 دقيقة حتى يصبح الغضروف ملطخا باللون الأحمر.
  3. قم بتجفيف الأنسجة وتوضيحها ، وختم الشرائح الزجاجية ، ومراقبتها تحت المجهر.
    1. انقع الشرائح في 75٪ إيثانول و 85٪ إيثانول و 95٪ إيثانول و 100٪ إيثانول لمدة 3-5 ثوان متتالية.
    2. اغمس الشرائح في محلول إزالة الشمع البيئي (I) ومحلول إزالة الشمع البيئي (II) لمدة 10 دقائق متتالية. أخرج الشرائح وأسقط الوسط الراتنجي المحايد في مقدمة الشرائح ، وتجنب الأنسجة. ضع حافة غطاء الغطاء على الشريحة ثم ضعها ببطء لتغطية البلسم المحايد. قم بإزالة الهواء وتجنب فقاعات الهواء. امسح الزيلين الإضافي والبلسم المحايد ، واتركه طوال الليل في درجة حرارة الغرفة.
    3. مراقبة الشرائح تحت المجهر والحصول على الصور. لكل مجموعة ، حدد ست عينات من غضروف ركبة الأرنب وحدد عشوائيا أربعة حقول عرض مختلفة لكل عينة للتقييم. سجل أنسجة الغضروف لكل مجموعة وفقا لطريقة مانكين (الجدول 1).

8. التحليل الإحصائي

  1. التعبير عن البيانات كمتوسط ± الانحراف المعياري (Equation 1 ± ثانية).
  2. إجراء تحليل أحادي الاتجاه للتباين (ANOVA) واختبار LSD لتحديد الأهمية الإحصائية لمقارنات المجموعات المتعددة.
  3. ضع في اعتبارك الفروق ذات دلالة إحصائية عندما < P 0.05.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

النتائج التجريبية للخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ والأوتار
لتقييم تأثير علم الوخز بالإبر على الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ الفخذية في الأرانب مع KOA، استخدمنا التصوير بالموجات فوق الصوتية المرنة لموجة القص في الوقت الحقيقي ومحول توتر العضلات ، على التوالي. بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، انخفض معامل يونغ لعضلات الفخذ الرباعية في مجموعة KOA (P < 0.05). بالمقارنة مع مجموعة KOA ، تم زيادة معامل يونغ لمجموعة بضع الوخز بالإبر (P < 0.05 ، الشكل 3A). من حيث قدرة الانقباض لعضلات الفخذ الرباعية ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، انخفضت سعة الانقباض الفردي وسعة الانقباض الكزازي لعضلات الفخذ الرباعية بشكل ملحوظ في مجموعة KOA (P < 0.05 ، P < 0.01). بالمقارنة مع مجموعة KOA ، زادت سعة الانكماش الفردي وسعة الانقباض الكزازي لعضلات الفخذ الرباعية في مجموعة بضع الوخز بالإبر بشكل ملحوظ (P < 0.05 ، P < 0.01 ، الشكل 3B ، C). تظهر هذه النتائج أن بضع الوخز بالإبر يمكن أن يحسن معامل يونغ وانقباض العضلات في الفخذ الفخذي في الأرانب المصابة ب KOA.

لتقييم تأثير بضع الوخز بالإبر على الخواص الميكانيكية لوتر عضلات الفخذ في الأرانب مع KOA، أجرينا اختبار الشد واختبار استرخاء الإجهاد على وتر عضلات الفخذ. من حيث خصائص الشد لوتر عضلات الفخذ ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، انخفض الحمل النهائي والإزاحة القصوى لوتر عضلات الفخذ في مجموعة KOA بشكل ملحوظ (P < 0.01 ، P < 0.01) ، بينما أظهرت صلابة وتر عضلات الفخذ في مجموعة KOA اتجاها هبوطيا (P > 0.05). بالمقارنة مع مجموعة KOA ، انخفض الحمل النهائي والإزاحة القصوى لوتر عضلات الفخذ في مجموعة بضع الوخز بالإبر بشكل ملحوظ (P < 0.01 ، P < 0.01) ، وأظهر تصلب وتر عضلات الفخذ في مجموعة بضع الوخز بالإبر اتجاها تصاعديا (P > 0.05 ، الشكل 4A-C). من حيث معدل استرخاء الإجهاد ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، انخفض معدل استرخاء الإجهاد لوتر عضلات الفخذ في مجموعة KOA (P < 0.05). بالمقارنة مع مجموعة KOA ، زاد معدل استرخاء الإجهاد لوتر عضلات الفخذ في مجموعة بضع الوخز بالإبر (P < 0.05 ، الشكل 4D). تظهر هذه النتائج أن بضع الوخز بالإبر يمكن أن يحسن خصائص استرخاء الشد والإجهاد لوتر عضلات الفخذ في الأرانب المصابة ب KOA.

النتائج التجريبية للضغط والضغط لكل وحدة مساحة على سطح ملامسة الغضروف ومورفولوجيا الغضروف
من حيث الضغط الأقصى على سطح ملامسة الغضروف ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، لم يكن هناك فرق كبير في الضغط الأقصى على سطح ملامسة الغضروف في مجموعة KOA (P > 0.05) ، ولكن كان هناك اتجاه هبوطي. بالمقارنة مع مجموعة KOA ، لم يكن هناك فرق كبير في الضغط الأقصى على سطح ملامسة الغضروف في مجموعة بضع الوخز بالإبر (P > 0.05) ، ولكن كان هناك اتجاه تصاعدي (الشكل 5A). من حيث الضغط لكل وحدة مساحة من سطح ملامسة الغضروف ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، لم يكن هناك فرق كبير في الضغط الأقصى لكل وحدة مساحة في مجموعة KOA (P > 0.05) ، ولكن كان هناك اتجاه هبوطي. بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، لم يكن هناك فرق كبير في الضغط الأقصى لكل وحدة مساحة في مجموعة بضع الوخز بالإبر (P > 0.05) ، ولكن كان هناك اتجاه تصاعدي (الشكل 5B). تظهر هذه النتائج أن تدخل بضع الوخز بالإبر كان يميل إلى زيادة أقصى ضغط وضغط لكل وحدة مساحة من سطح ملامسة الغضروف ، مما يشير إلى تأثيرات إيجابية على بيئة إجهاد الغضروف.

لتقييم تأثير بضع الوخز بالإبر على مورفولوجيا الغضروف ، استخدمنا تلطيخ Safranin O-Fast Green. في المجموعة الضابطة ، كان سطح الغضروف أملسا. تم ترتيب الخلايا الغضروفية في جميع الطبقات بدقة ومنظمة. تم ترتيب الخلايا الغضروفية السطحية في شكل مغزل. تم ترتيب الطبقات الوسطى والعميقة من الخلايا الغضروفية في ترتيب عمودي ؛ كان خط المد واضحا وكاملا. ولم يكن هناك تكوين pannus (الشكل 6 أ). في مجموعة KOA ، كان سطح الغضروف خشنا أو كانت هناك عيوب تقشير. تم تقليل عدد الخلايا الغضروفية السطحية. تم اضطراب التسلسل الهرمي للخلايا الغضروفية وترتيبها. أظهرت الخلايا الغضروفية للطبقة الوسطى علامات الجفاف والانكماش والنخر. لوحظ تجمع الخلايا الغضروفية. كانت خطوط المد والجزر غير واضحة أو شوهد كسر مشوه ؛ ويمكن رؤية خطوط المد والجزر المتكررة في بعض المناطق؛ قد تكون الأوعية الدموية قد مرت عبر خط المد والجزر إلى غضروف الطبقة غير المتكلسة ؛ أو كان هناك تكوين pannus (الشكل 6B). في مجموعة بضع الوخز بالإبر ، كانت الطبقة السطحية للغضروف ناعمة نسبيا. كان هيكل الخلايا الغضروفية طبيعيا. كان ترتيب الخلايا الغضروفية في جميع الطبقات أنيقا نسبيا ؛ كان خط المد والجزر واضحا أو في بعض الأحيان ، كانت هناك خطوط مد وجزر متكررة. لم يكن هناك تشكيل pannus (الشكل 6C). من حيث الدرجات المورفولوجية للغضروف ، مقارنة بالمجموعة الضابطة ، زادت درجة ماركين الغضروفية لمجموعة KOA بشكل ملحوظ (P < 0.01). بالمقارنة مع مجموعة KOA ، انخفضت درجة Markin الغضروفية لمجموعة بضع الوخز بالإبر بشكل كبير (P < 0.01 ، الشكل 6D). تظهر هذه النتائج أن سلامة غضروف الأرانب المصابة ب KOA قد تضررت ، وأن التدخل بالإبر يمكن أن يؤخر تنكس الغضروف ويكون له تأثير وقائي على الغضروف.

Figure 1
الشكل 1: طريقة فيدمان المعدلة لإنشاء نموذج لالتهاب المفاصل في الركبة. (أ) المواد اللازمة لإنشاء نموذج KOA. ب: استخدم شريطا طبيا حساسا للضغط لتغطية الطرف الخلفي الأيسر للأرانب. ج: لف ضمادات البوليمر حول الطرف الخلفي الأيسر للأرانب. (د، ه) استخدم الجبائر لشل حركة مفاصل الركبة والكاحل للأرنب. (F) لف شبكة سلكية لمنع الأرانب من القضم. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: طريقة عملية التدخل في بضع الوخز بالإبر. أ: تحضير الجلد عند مفصل الركبة للطرف الخلفي الأيسر للأرنب. (ب) حدد نقاط الإدخال واستخدم علامة جلدية جراحية لتحديد المواضع. ج: استخدم اليودوفور الطبي للتطهير. د: الضغط والفصل لتجنب الأعصاب والأوعية الدموية. ه: يخترق الوخز بالإبر ويجري. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ الفخذية. (أ) تحليل معامل يونغ لعضلات الفخذ الرباعية؛ (ب) تحليل سعة الانقباض المفردة لعضلات الفخذ الرباعية؛ ج: تحليل سعة الانقباض الكزازي لعضلات الفخذ الرباعية. القيم تعني ± SD. N = 6 لكل مجموعة. مقارنة مع المجموعة الضابطة المقابلة: * P < 0.05 و ** P < 0.01 ؛ مقارنة بمجموعة النماذج المقابلة: #P < 0.05 و ##P < 0.01. اختصار: KOA = هشاشة العظام في الركبة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 4
الشكل 4: الخواص الميكانيكية لوتر عضلات الفخذ. (أ) تحليل الحمل النهائي لوتر عضلات الفخذ. (ب) تحليل أقصى إزاحة لوتر عضلات الفخذ؛ (ج) تحليل تصلب وتر العضلة رباعية الرؤوس. د: ارتخاء وتر عضلات الفخذ بالإجهاد. القيم تعني ± SD. N = 6 لكل مجموعة. مقارنة مع المجموعة الضابطة المقابلة: * P < 0.05 و ** P < 0.01 ؛ مقارنة بمجموعة النماذج المقابلة: #P < 0.05 و ##P < 0.01. اختصار: KOA = هشاشة العظام في الركبة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 5
الشكل 5: الضغط على سطح التماس للغضروف. (أ) تحليل أقصى ضغط على سطح ملامسة الغضروف؛ ب: تحليل الضغط لكل وحدة مساحة من سطح ملامسة الغضروف. القيم تعني ± SD. N = 6 لكل مجموعة. اختصار: KOA = هشاشة العظام في الركبة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 6
الشكل 6: تلطيخ الغضروف باستخدام Safranin O-Fast الأخضر ودرجة ماركين للغضروف. (أ) المجموعة الضابطة، ) المجموعة النموذجية، ) مجموعة بضع الوخز بالإبر، ) تحليل درجة ماركين للغضروف. القيم تعني ± SD. N = 6 لكل مجموعة. مقارنة مع المجموعة الضابطة المقابلة: ** P < 0.01 ؛ مقارنة بمجموعة النماذج المقابلة: ##P < 0.01. قضبان المقياس = 50 ميكرومتر (A-C). اختصار: KOA = هشاشة العظام في الركبة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

أولا. هيكل III. تلطيخ
a. عادي 0 a. عادي 0
b. مخالفات السطح 1 b. انخفاض طفيف 1
ج. البينوس والمخالفات السطحية 2 ج. تخفيض معتدل 2
د. الشقوق إلى المنطقة الانتقالية 3 د. تخفيض شديد 3
e. الشقوق إلى المنطقة الشعاعية 4 e. لم يلاحظ صبغة 4
f. الشقوق إلى المنطقة المتكلسة 5
g. الفوضى الكاملة 6
II. الخلايا IV. سلامة المد والجزر
a. عادي 0 a. سالم 0
b. فرط الخلوية المنتشر 1 b. عبرت الأوعية الدموية 1
ج-الاستنساخ 2
د. نقص الخلية 3

الجدول 1: درجة مانكين المعدلة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

يعد النموذج الحيواني المناسب أحد العوامل الرئيسية لتحقيق الأهداف التجريبية وتوضيح سؤال علمي محدد. استندت هذه الدراسة إلى نظريات "Zongjin السيطرة على العظام وتشحيم المفاصل" و "عدم التوازن الميكانيكي" في علم الوخز بالإبر ، بهدف شرح الدلالة العلمية وراء علاج KOA من خلال "تعديل العضلات والأوتار لعلاج اضطرابات العظام" في علاج بضع الوخز بالإبر. بمعنى آخر ، يحسن بضع الوخز بالإبر البيئة الميكانيكية غير الطبيعية للغضروف من خلال تنظيم الخصائص الميكانيكية للأنسجة الرخوة حول الركبة لتأخير التنكس وحماية الغضروف. تصنف النماذج الحيوانية KOA عموما إلى فئتين: النماذج العفوية والمستحثة. نماذج KOA التلقائية أقل استخداما بسبب مدة النمذجة الطويلة نسبيا والقيود الأكبر. يمكن إنشاء نماذج KOA المستحثة من خلال الأساليب الجراحية (على سبيل المثال ، طريقة Hulth المعدلة ، واستئصال الغضروف المفصلي ، وتمزق الرباط الصليبي الأمامي ، والحقن داخل المفصل ، وتثبيت المفصل). تستخدم الطرق الجراحية ، بما في ذلك قطع الرباط الجانبي الإنسي ، والرباط الصليبي الأمامي ، وإزالة الغضروف المفصلي الإنسي وغيرها من الهياكل ، لزعزعة استقرار مفصل الركبة ، مما يؤدي إلى اختلال التوازن الميكانيكي الداخلي والاحتكاك المباشر بين أسطح المفصل ، وبالتالي تحفيز KOA11. هذا النوع من النماذج هو أكثر ملاءمة لدراسة التهاب المفاصل الصدمة. يقوم الحقن داخل المفصل بتوصيل الدواء إلى تجويف مفصل الركبة للحث على الالتهاب ، والاضطرابات الأيضية للخلايا الغضروفية ، والتفاعلات السامة للخلايا الغضروفية في تجويف المفصل ، وبالتالي تطوير KOA مع تأثير ضئيل على إجهاد المفاصل12. يؤدي تثبيت المفاصل إلى تطوير وتفاقم تنكس الغضروف المفصلي عن طريق الحد من حركة مفصل الركبة مما يسبب ضمور العضلات والأربطة حول الركبة ، مما يؤدي إلى تغيرات في إجهاد المفصل ، وبالتالي إنشاء نموذج KOA12.

طريقة Videman المعدلة هي طريقة تثبيت المفاصل ، والتي تتماشى بشكل أكبر مع العملية المرضية ل KOA الناتجة عن ضعف عضلات الركبة البشرية ، كما يظهر في ضمور عضلات وأربطة الركبة عن طريق شل الركبة في وضع مفرط التمدد ، مما يؤدي إلى تغيرات في إجهاد المفاصل وتنكس الغضروف. بالمقارنة مع الطرق الجراحية التي تسبب عدم استقرار المفاصل مما يؤدي إلى KOA، فإن طريقة فيدمان المعدلة أكثر انسجاما مع التسبب الطبيعي في KOA حيث تكون إصابة الأوتار هي المرحلة الأولى، تليها أمراض الأوتار والعظام. لذلك ، فهو أكثر ملاءمة لهذه الدراسة13. نظرا لأن تأثير بضع الوخز بالإبر في علاج KOA في المرحلة المبكرة أو المتوسطة أكثر وضوحا ، فإن وقت التشكيل هو 6 أسابيع ، وهو ما يتوافق مع التغيرات المرضية في المرحلة المتوسطة KOA. في عملية تحريض النموذج ، يمكن أن يؤدي الكبح المفرط لفترات طويلة إلى ضمور العضلات حول مفصل الركبة ، وغالبا ما يؤدي الانزعاج في الطرف الخلفي الأيسر إلى نخر الأرانب في الأجهزة النموذجية. نظرا لأن الأجهزة النموذجية قد تكون فضفاضة ، فمن الضروري التحقق بانتظام من ضيق الجهاز من نوع الأرانب وتعزيزها في الوقت المناسب. بالإضافة إلى ذلك ، من الضروري الانتباه دائما إلى إمدادات دم أطراف الأرنب ، والتورم ، والآفات الجلدية ، وأعراض الجهاز الهضمي ، وإزالة الأجهزة النموذجية إذا لزم الأمر. نظرا لأن الأرانب في حالة تخدير أثناء هذه العملية ، فمن الضروري إبقاء الأرانب دافئة والانتباه إلى حالة الأرانب في الوقت الفعلي حتى تستيقظ الأرانب.

يتضمن بضع الوخز بالإبر وظيفة مشرط بالإضافة إلى إبرة الوخز بالإبر الموجودة ، باستخدام مفهوم الوخز بالإبر لاختراق الجسم ، مع تأثيرات قطع وفصل تفوق إبرة الوخز بالإبر مع إحداث صدمة أقل بكثير لجسم الإنسان من المشرط14. يعتقد علم الوخز بالإبر أن السبب الجذري ل KOA هو عدم التوازن الميكانيكي بسبب تلف الأنسجة الرخوة حول مفصل الركبة. لذلك ، فإن مفتاح علاج KOA ببضع الوخز بالإبر هو استعادة التوازن الميكانيكي لمفصل الركبة. فيما يتعلق باختيار نقاط العلاج ، من ناحية ، يعتمد بضع الوخز بالإبر على نظرية خطوط الطول والأخاديد ويأخذ موقعا مؤلما كنقطة إبر. من ناحية أخرى ، يسترشد بضع الوخز بالإبر بالتشريح الحديث والميكانيكا الحيوية ويعتقد أن تلف الأنسجة الرخوة حول مفصل الركبة يسبب الالتصاق والانكماش ، مما يدمر التوازن الميكانيكي لمفصل الركبة وينتج نقاط ضغط عالية في المفصل. لذلك ، غالبا ما يتم أخذ نقاط التصاق الأنسجة والانكماش والضغط العالي كنقاط علاج15,16.

يظهر التحليل الميكانيكي الحيوي للأنسجة الرخوة أن نقاط التعلق بالأوتار والعظام هي في الغالب حيث تتركز إجهادات الأنسجة الرخوة ، وتسمى أيضا تركيز الإجهاد ، وحيث يتم إنتاج المنتجات المرضية مثل الالتصاقات والتقلصات والعقيدات الشبيهة بالحبل بسهولة17. بالإضافة إلى ذلك ، أثبتت الممارسة السريرية أن نقاط العطاء التي تم العثور عليها عن طريق الجس غالبا ما تتداخل مع نقاط التعلق بالأوتار والعظام. لذلك ، اختارت هذه الدراسة إدخال الأوتار من الأوعية الإنسية ، والأوعية الوحشية ، والمستقيم الفخذي ، والعضلة ذات الرأسين الفخذية ، والجراب الأنسيريني. على الرغم من أن بضع الوخز بالإبر يسبب صدمة أقل للأنسجة ، إلا أنه لا يزال طريقة للتدخل الغازي. أثناء التدخل ، من الضروري اتباع الإجراء المكون من أربع خطوات من بضع الإبر بدقة: الموقع ، الاتجاه ، الضغط والإفراج ، والثقب. بالإضافة إلى ذلك ، يجب على المستخدمين توخي الحذر مع درجة الاسترخاء وتكرار العلاج لكل تدخل. ينصح بإطلاق كل نقطة علاج 2-3 مرات مرة واحدة في الأسبوع لمنع الضرر المفرط للأنسجة. بعد اكتمال التدخل بالإبر ، يتم تطهير مفصل الركبة في الطرف الخلفي الأيسر للأرنب مرة أخرى ويتم تطبيق الضمادات على نقطة دخول الوخز بالإبر.

مفاصل الركبة المستقرة هي شرط أساسي للحفاظ على التوازن الميكانيكي وأداء الحركات الفسيولوجية الطبيعية18. العضلات والأوتار - عوامل مهمة في الحفاظ على استقرار مفصل الركبة - هي هياكل الأنسجة اللزجة المرنة التي تحدد الخواص الميكانيكية المختلفة للعضلات في الانقباض والسحب السلبي ، والتي تعد مكونات مهمة للخصائص الميكانيكية للعضلات وتضمن الوظيفة الحركية الطبيعية للعضلات. يرتبط معامل المرونة ، وهو مؤشر على الخواص الميكانيكية للأنسجة الرخوة ، ارتباطا إيجابيا بالتغيرات في الوظيفة الميكانيكية لعضلات الفخذالفخذية 19. من الناحية الفسيولوجية ، يشمل تقلص العضلات الهيكلية شكلين: تقلص واحد وتقلص الكزاز. الأول هو الوحدة الأساسية لنشاط العضلات ، في حين أن الأخير ينتج بشكل أساسي حركة سلسة للعضلات الهيكلية. لذلك ، يتم استخدام السعة القصوى للانقباض الفردي والكزازي بشكل شائع لتقييم وظيفة انقباض العضلات.

يؤدي ضمور العضلات الهيكلية المهمل إلى انخفاض تقلص الكزاز والانكماش الطوعي الأقصى ، مما يشير إلى انخفاض في قدرة انقباض العضلات20. يمكن أن يؤدي انخفاض قوة العضلات إلى إتلاف وظيفة الأوتار ، ويتجلى ذلك في انخفاض في مرونة الأوتار وانخفاض في قدرة الأوتار على مقاومة التشوه8. في ظل الظروف المرضية ، يمكن أن ينخفض استرخاء الإجهاد وخصائص الشد للأوتار ، مما يؤدي إلى فقدان مفصل الركبة للتوازن وتسريع تطور KOA. لذلك ، في هذه الدراسة ، تم اختيار معامل المرونة ، سعة الانقباض الفردي ، سعة الانقباض الكزازي لعضلات الفخذ ، خصائص الشد لوتر عضلات الفخذ مثل الحمل النهائي ، الإزاحة القصوى ، الصلابة ، وكذلك استرخاء الإجهاد لوتر عضلات الفخذ لتقييم تأثير بضع الوخز بالإبر على الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ. تم استخدام اختبار الإجهاد والضغط لمنطقة تحمل الغضروف وتلطيخ Safranin O / Fast Green لغضروف مفصل الركبة لتقييم ما إذا كان العلاج بالإبر قد حسن الخواص الميكانيكية لعضلات الفخذ الرباعية ومارس تأثيرا وقائيا على الغضروف. تظهر النتائج التجريبية أن بضع الوخز بالإبر جنبا إلى جنب مع نظرية "تعديل العضلات والأوتار لعلاج اضطرابات العظام" يمكن أن يحسن بيئة الإجهاد للغضروف ، ويؤخر تنكس الغضروف ، ويكون له تأثير وقائي على الغضروف عن طريق تعديل الخواص الميكانيكية للعضلات والأوتار من عضلات الفخذ.

هناك بعض القيود على هذه التجربة. من ناحية ، لم نقم بتقييم اختلال الركبة وتأثيره على الاختلالات الميكانيكية الحيوية في الركبة. من ناحية أخرى ، اختارت هذه الدراسة طريقة Videman المعدلة لتجميد تمديد الطرف الخلفي الأيسر لنمذجة KOA لتوضيح دور بضع الوخز بالإبر في تأخير تنكس الغضروف عن طريق تعديل الخواص الميكانيكية للأنسجة الرخوة حول الركبة. ومع ذلك ، لم يتم التحقيق في دور بضع الوخز بالإبر في هشاشة العظام في الركبة الناجم عن عوامل مؤلمة ، مثل الأربطة وتمزق الغضروف المفصلي. بالإضافة إلى ذلك ، فإن التدخل بالإبر هو نوع من الجراحة المغلقة ذات الحد الأدنى من التدخل الجراحي. في هذه الدراسة ، تم إجراء كل من تدخلات الجس والوخز بالإبر دون تعريض الأنسجة المريضة في ظروف الرؤية غير المباشرة. للحد من تأثير العوامل الذاتية على النتائج التجريبية ، تم إجراء كل من الجس والتدخل بالإبر من قبل نفس الموظفين. وبالتالي ، على الرغم من وجود بعض القيود ، إلا أنها لا تؤثر على موثوقية استنتاجات هذه الدراسة.

باختصار ، تصف هذه الورقة بالتفصيل تحريض نموذج KOA بطريقة Videman المعدلة (تثبيت تمديد الطرف الخلفي الأيسر) وتدخل بضع الإبر. كما يوضح تحليل آلية علاج بضع الوخز بالإبر ل KOA من خلال التجارب على معامل المرونة ووظيفة انقباض عضلات الفخذ ، والخصائص الميكانيكية لوتر عضلات الفخذ ، وقوة وضغط منطقة تحمل الغضروف المفصلي ، وتلطيخ Safranin O / Fast Green لغضروف مفصل الركبة. قد توفر دراسة آلية بضع الوخز بالإبر لتحسين الخواص الميكانيكية الحيوية للأنسجة الرخوة نظرة ثاقبة جديدة في علاج KOA والإصابات الجهازية الأخرى المرتبطة بالرياضة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للكشف عنه.

Acknowledgments

تم دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82074523,82104996).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acupotomy Beijing Zhuoyue Huayou Medical Devices Co., Ltd. 0.4 x 40 mm
Connect Cast Orthopedic Casting Tape Suzhou Connect Medical Technology Co.,Ltd. KCP06 15.0 cm x 360 cm
Double-sided Foam Tape Deli Group Co.,Ltd. NO.30416 36 mm x 5 yard x 2.5 mm
Environmental Dewaxing Solution Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. G1128
Ethanol absolute Beijing Hengkangda Medicine Co., Ltd.
Fast Green solution Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. G1031
Fast grenn FCF Sigma,America 2353-45-9
Fatigue testing machine BOSE, America Bose Electro Force 3300
Four-channel physiological recorder Chengdu Instrumeny Frctory RM-6420
FPD-305E Fuji, Japan
FPD-306E Fuji, Japan
Hematoxylin solution Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. G1005
Medical iodophor disinfectant Shan Dong Lircon Medical Technology Co., Ltd.
Medical Tape Shandong Rongjian Sanitary Products Co., Ltd. 200402 1.5 x 500 cm
Muscle tension transducer  Chengdu Instrumeny Frctory JH-2204005, 50 g
Prescale Fuji, Japan
Real-time SWE ultrasound diagnostic instrument SuperSonic Imagine SA,France SuperSonic Imagine AixPlorer
Rhamsan gum Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. WG10004160
Safranine O Sigma,America 477-73-6
Safranine O solution Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd. G1015
Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) IBM, America

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Roseti, L., Desando, G., Cavallo, C., Petretta, M., Grigolo, B. Articular cartilage regeneration in osteoarthritis. Cells. 8 (11), 1305 (2019).
  2. Cui, A. Y., et al. Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies. EClinicalMedicine. 29-30, 100587 (2020).
  3. Miyauchi, A., et al. Alleviation of murine osteoarthritis by deletion of the focal adhesion mechanosensitive adapter, Hic-5. Sci Rep. 9 (1), 15770 (2019).
  4. Wright, T. Biomechanical factors in osteoarthritis: the effects of joint instability. HSS J. 8 (1), 15-17 (2012).
  5. Patsika, G., Kellis, E., Kofotolis, N., Salonikidis, K., Amiridis, I. G. Synergetic and antagonist muscle strength and activity in women with knee osteoarthritis. J Geriatr Phys Ther. 37 (1), 17-23 (2014).
  6. Blalock, D., Miller, A., Tilley, M., Wang, J. X. Joint instability and osteoarthritis. Clin Med Insights. Arthritis and Musculoskelet Disord. 8, 15-23 (2015).
  7. Henriksen, M., Christensen, R., Danneskiold-Samsøe, B., Bliddal, H. Changes in lower extremity muscle mass and muscle strength after weight loss in obese patients with knee osteoarthritis: a prospective cohort study. Arthritis Rheum. 64 (2), 438-442 (2012).
  8. Schwartz, A. G., Lipner, J. H., Pasteris, J. D., Genin, G. M., Thomopoulos, S. Muscle loading is necessary for the formation of a functional tendon enthesis. Bone. 55 (1), 44-51 (2013).
  9. Felson, D. T. Osteoarthritis as a disease of mechanics. Osteoarthr Cartil. 21 (1), 10-15 (2013).
  10. Ma, S. N., et al. Effect of acupotomy on FAK-PI3K signaling pathways in KOA rabbit articular cartilages. Evid Based Complement Alternat Med. 2017, 4535326 (2017).
  11. Yu, P., et al. Research progress of experimental animal models of knee osteoarthritis. China Medical Herald. 16 (27), 41-44 (2019).
  12. Li, L. H., et al. Research progress of rabbit knee osteoarthritis model. Journal of Jiangxi University of Chinese Medicine. 31 (4), 108-113 (2019).
  13. Zhang, W., Gao, Y., Guo, C. Q., Khattab, I. Z. A., Mokhtari, F. Effect of acupotomy versus electroacupuncture on ethology and morphology in a rabbit model of knee osteoarthritis. J Tradit Chin Med. 39 (2), 229-236 (2019).
  14. An, X. Y., et al. Chondroprotective effects of combination therapy of acupotomy and human adipose mesenchymal stem cells in knee osteoarthritis rabbits via the GSK3 beta-cyclin D1-CDK4/CDK6 signaling pathway. Aging Dis. 11 (5), 1116-1132 (2020).
  15. Guo, C. Q., Liu, N. G. Analysis on the distribution features of Ashi points in Jingjin disorders. Journal of Basic Chinese Medicine. 17 (8), 899-900 (2011).
  16. Guo, C. Q., et al. Effects of acupotomy therapy on tenderness point around knee joint in patients with knee osteoarthritis: a randomized controlled clinical trial. Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. 33 (3), 3-5 (2010).
  17. Zhao, Y., Dong, F. H., Zhang, K. Analysis of soft tissues mechanical changes and treatment of meridian tendon pain. Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. (9), 705-707 (2008).
  18. Zhang, L. P., Cheng, F., Liu, D. Y., Zhu, L. G. Application progress of biomechanics in knee osteoarthritis. Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 34 (7), 1644-1647 (2016).
  19. Thomas, A. C., Sowers, M., Karvonen-Gutierrez, C., Palmieri-Smith, R. M. Lack of quadriceps dysfunction in women with early knee osteoarthritis. J Orthop Res. 28 (5), 595-599 (2010).
  20. Li, L., et al. Effects of unloaded muscle atrophy on contractile characteristics of hind-limb skeletal muscles in mice. Space Med Med Eng. 25 (5), 322-325 (2012).

Tags

بضع الإبر، هشاشة العظام في الركبة، نموذج الأرنب، اختلال التوازن الميكانيكي الحيوي، مفصل الركبة، التوازن الميكانيكي، فوائد بضع الوخز، الحد من الألم، تحسين حركة الركبة، الحد من التصاق الأنسجة الرخوة، نقاط تركيز الإجهاد، طريقة فيدمان المعدلة، إنشاء نموذج KOA، عملية بضع الوخز بالإبر، الاحتياطات، تقييم الفعالية، تعديل العضلات والأوتار لعلاج اضطرابات العظام النظرية، الكشف عن الخواص الميكانيكية، عضلات الفخذ الفخذية، ميكانيكا الأوتار، ميكانيكا الغضاريف والتشكل التقييم ، حماية الغضروف
تطبيق بضع الوخز بالإبر في نموذج هشاشة العظام في الركبة في الأرانب
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

LongFei, X., Yan, G., XiLin, C.,More

LongFei, X., Yan, G., XiLin, C., TingYao, H., WenTing, Z., WeiWei, M., Mei, D., Yue, X., ChangQing, G. Application of Acupotomy in a Knee Osteoarthritis Model in Rabbit. J. Vis. Exp. (200), e65584, doi:10.3791/65584 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter