味覚アッセイ:ショウジョウバエにおける摂食行動の測定方法

- 味の好みのアッセイを行うために、チャンバー、例えば、等しいセクションに分割されたペトリ皿を使用してください。異なる味の2つの溶液の間の選択を測定する場合は、無味の食品着色剤を使用して赤で1つを、もう1つを青でラベル付けします。

今、麻酔と以前に飢えたハエを部屋の真ん中に追加し、皿をカバーします。潜在的な色バイアスを排除するために暗闇の中で実験を行い、一定期間にわたって摂氏25度でインキュベートします。

摂食行動と味の好みを測定するために、異なる色の腹部を持つハエの数を比較します。例のプロトコルでは、様々なスクロース溶液間の選択を測定する味好みアッセイのデモンストレーションが見られます。

-実験を始めるには、標準的なフライバイアルの底に水で綿のボールを飽和させる。準備されたバイアルにハエを加え、綿球を使ってバイアルを閉じた状態にし、環境に配慮したインキュベーターにバイアルを置き、100ミリモルスクロース溶液10マイクロリットル、赤い食品着色物13マイクロリットル、97マイクロリットルの水を組み合わせて1ミリモルスクロースのコントロールタスタントを準備します。

次に、5ミリモルスクロースの実験タスタントを準備し、100ミリメートル15ミリメートルプラスチックペトリ皿を得て、12時位置でプレートの端にできるだけ近いコントロールタスタントの3つの10マイクロリットルの滴を置くことによってアッセイチャンバーを作成します。 3時位置で、実験用タスタントの10マイクロリットルの滴をできるだけプレートの端に近づけます。

次に、100の飢えたハエの空のバイアルは、すべての動物を麻酔するのに十分な長さのCO2パッドに飛びます。 準備したアッセイ室の真ん中に動物を磨き、皿の蓋で覆う。アッセイ室を不透明な段ボール箱に入れ、その後、状態と遺伝子型がテストされているボックスの外側にラベルを付けます。