Name: Microfluidic 장치를 사용하여 셀 캡처 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T15:28:15.000+00:00
Duration: 29 min 2 s
Description: 배우세요 마이크로플루이딕 장치를 사용한 세포 캡처 및 염색 방법으로 전혈에서 특정 세포를 분리하고 면역형광 염색을 수행합니다. 이 기술은 신경과학 및 진단 연구에 활용됩니다.

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microfluidic 장치를 사용하여 셀 캡처

Cell Capture Using a Microfluidic Device

Microfluidic 장치를 사용하여 셀 캡처

준비된 장치들은 10개 또는 20개 단위의 키트로 포장되어 있으며, 배송 시 박스에 담겨 냉장 상태로 전달됩니다. 키트에는 실험 수행에 필요한 모든 구성품이 포함되어 있습니다. 키트 내의 실험 구성품으로는 주사기와 완충액이 들어있는 패킷이 있으며, 이는 실온에서 보관 가능합니다. 또한, 본 실험에서 따를 프로토콜 사본이 함께 제공됩니다.또한 냉장 상자가 있으며, 여기에는 실제 장치와 냉장이 필요한 모든 작동 버퍼가 들어 있습니다. 일반적으로 키트는 10개 또는 20개 단위로 포장되어 있습니다. 사용하지 않을 때는 키트를 냉장 보관해야 합니다.각 주사기와 키트 구성품에는 세심하게 라벨이 부착되어 있으며, 이 라벨들은 우리가 따르는 프로토콜의 표와 일치합니다. 따라서 개별 단계에서 어떤 주사기나 키트 구성품을 사용해야 하는지에 대해 모호함이 없습니다. 장치들의 포장을 풀고 생물학적 안전 작업대(biological safety cabinet)에 배치한 후, 호중구를 분리하고 이후의 게놈 응용 분석을 위해 용해하는 절차를 수행하겠습니다. 이는 얻어진 세포 용해물을 사용하여 분리하거나, 세포 용해물에서 RNA를 추출할 예정이기 때문입니다.따라서 실험 공간이 단순히 멸균된 상태일 뿐만 아니라, 일반적으로 환경에 존재하는 모든 RNA로부터 깨끗한 상태인지 확인해야 합니다. 그러므로 RNA를 분해하는 용액으로 모든 작업 구역과 장비를 닦아내는 것이 매우 중요합니다. 일반적으로 여러 제조사에서 구입할 수 있는 RNA SAP 또는 RNAs away를 사용하여 모든 도구와 작업 표면을 닦아냅니다.장치는 열 밀봉 파우치에 포장되어 제공됩니다. 각 장치는 밀봉되어 있으며 바코드가 부착되어 있습니다. 임상 샘플을 사용하는 경우, 이 바코드를 기록해 두어야 합니다.이제 장치의 밀봉을 해제하고 커버를 벗긴 후, 펌프 유지 매니폴드 장치(pump Holding manifold device)에 배치합니다. 사용할 혈액 샘플은 전혈 샘플입니다. 이를 표준 1 mL BD 주사기에 넣어 흘려보낼 것이며, 이 주사기를 주사기 1로 표시합니다.일반적인 절차는 패키지에서 시린지를 꺼내고 혈액 튜브의 캡을 조심스럽게 제거하는 것입니다. 그다지 700 µL 또는 0.7 mL의 혈액을 취하여 그 중 절반인 350 µL를 1.5 mL 튜브에 주입합니다. 이렇게 하면 혈액을 추가 공정으로 전달할 수 있습니다.혈액 샘플 튜브를 전달한 후에도 장치 결함이 발생할 경

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

우리는 세포 캡처 및 문화를 활성화할 수 있습니다 microfluidic 장치의 제조를위한 프로토콜을 설명합니다. 이 방법에서는 이러한 microfluidic 채널 내에서 홈과 같은 패턴 microstructures는 셀 수있는 부두 내에서 낮은 전단 응력 영역을 작성하는 데 사용됩니다.

세포 행동 유학을위한 그루브 패턴 Microfluidic 장치

이 문서에서는, 우리는 유체 흐름에 따라 입자의 구속을위한 microfluidic 기반의 방법을 제시한다. 우리는이를 통합 microdevice에 임의의 입자의 감금 및 미세 조작을 가능하게, 피드백 제어 메커니즘을 사용하여 유체의 정체 지점에 안정적인 입자 트래핑을 보여줍니다.

단일 입자 Microfluidic 기반 유체 트랩

이 문서에서 우리는 단일 세포 분석을위한 마이크로 유체 칩을 제시한다. 그것은 수있는 세포 내 단백질, 효소, 조효소, 형광 분석이나 면역에 의해 두 번째 메신저의 정량화.

단일 세포의 다목적 화학 분석을위한 미세 유체 칩

세포의 빠른 기계적인 변형은 고분자 나노 물질의 세포 내 전달을위한 약속, 벡터없는 방법으로 떠오르고있다. 이 프로토콜은 다양한 애플리케이션을 위해 시스템을 사용하는 방법에 대한 자세한 정보를 제공.

강력한, 미세 유체 세포 내 전달 플랫폼으로 휴대 뒤쪽에서

여기에서는 모세관 기반 원심 미세유체 장치를 사용하여 크기 제어 가능한 단분산 W/O(Water-in-Oil) 미세방울에 대한 간단한 생산 방법을 보여줍니다. 이 방법은 소량의 시료만 필요하며 고수율 생산이 가능합니다. 우리는 이 방법이 신속한 생화학 및 세포 분석에 유용할 것으로 기대합니다.

단 분산 미세 방울의 크기가 제어 형성을위한 모세관 기반 원심 미세 유체 장치

여기에서는 고효율 단세포 분리 및 장기 클론 배양을 가능하게 하는 새로운 마이크로웰 설계 개념을 활용하는 미세유체 플랫폼으로 단일 세포를 분리 및 배양하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

높은 처리량 단일 세포의 분리 및 문화를위한 미세 유체 플랫폼

이 문서 시드 방울에 세포의 캡슐화 능률을 제공 하기 위해 물방울 미세 장치에 피 펫 팁을 사용 하 여 셀의 부족 한 인구를 위한 프로토콜을 제공 합니다.

피 펫 팁 드롭릿 미세 플랫폼 시드 셀에 대 한 메서드를 기반으로

이 보고서는 여러 단일 세포의 고효율 페어링 및 현미경 분석을 달성할 수 있는 단일 세포 배양 실험을 설정하는 미세 유체 칩 기반 방법을 설명합니다.

미세 유체 칩으로 결정적인 방식으로 단일 셀 기반 공동 배양 구축

획기적인 곡선(BtC)은 다공성 미디어에서 박테리아의 운반을 연구하는 효율적인 도구입니다. 여기에서는 현미경 검사법과 유동 세포계 계수와 함께 유체 장치를 기반으로 한 도구를 소개하여 BtC를 획득합니다.

유체 장치를 현미경 검사법과 유동 세포측정과 결합하여 공간 저울을 가로지르는 다공성 미디어에서 미생물 수송을 연구합니다.

임상 미세유체 칩은 임상 환자 혈액 샘플 전처리를 단순화하고 순환 종양 세포(CTC)를 칩에 면역 형광으로 염색하여 단일 CTC를 신속하게 검출하고 식별할 수 있는 중요한 생물 의학 분석 기술입니다.

다용도 순환 종양 세포의 분리를 위한 임상 미세유체 칩 플랫폼

이 프로토콜은 개별 인간 말초 혈액 단핵 세포의 사이토카인 분비 역학을 정량적으로 측정하기 위한 고급 미세유체 플랫폼을 설명합니다. 이 플랫폼은 예를 들어 지질다당류로 자극된 각 개별 세포에 대해 최대 3개의 사이토카인(IL-6, TNFα 및 IL-1β)을 병렬로 측정합니다.

개별 다기능성 세포의 동시 및 순차적 사이토카인 분비를 해결하기 위한 미세유체 접근법 

배우세요 마이크로플루이딕 장치를 사용한 세포 캡처 및 염색 방법으로 전혈에서 특정 세포를 분리하고 면역형광 염색을 수행합니다. 이 기술은 신경과학 및 진단 연구에 활용됩니다.

Microfluidic 장치를 사용하여 셀 캡처

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