Name: 멀티 깊이 원형 단면 Endothelialized 마이크로 채널 - 온 - 칩의 개발을위한 절차 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-21T19:45:00.000+00:00
Duration: 10 min 55 s
Description: 배우세요 다층 원형 단면 내피세포화 마이크로채널 온 칩 제작 방법을 통해 생체 미세혈관의 3D 구조를 모사하고 실시간 영상으로 혈관 현상을 연구하는 기술을 익히세요.

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이 연구는 부분적으로 국립 과학 재단 (NSF 1,227,359)는 각각 국립 과학 재단 (EPS-1003907), 국립 과학 재단 (1007978) 후원 WVU 사전 사무실 및 WVU PSCoR에 의해 자금 WVU EPSCoR 프로그램에 의해 지원되었다. 미세 작업은 WVU 공유 연구 시설 (클린 룸 설비)과 웨스트 버지니아 대학의 칩 연구소 (마이크로 칩 연구소)에 미세 유체 통합 세포 연구로 이루어졌다. 공 촛점 이미징 WVU 현미경 이미징 시설에서 이루어졌다.

1. 포토 레지스트 마스터 금형의 석판 제작 다음 프로토콜은 30 ~ 60 μm의 사이 직경의 미세을 제작하는 과정을 보여줍니다. 작은 직경 (이하 30 μm의), 포토 레지스트의 단일 스핀 코팅 마이크로를 얻으려면이 필요합니다. <ol><li> 사용하기 전에 클린 24 시간에 4 ° C에서 냉장고에서 리플 로우 레지스트를 전송하고 실내 온도를 따뜻하게 할 수 있습니다. </li><li> 실리콘 웨이퍼를 청소하고 탈수 할 수 있도록 150 ° C에서 한 시간 동안 구워. 탈수는 실리콘 기판에 포토 레지스트 접착 도움을 줄 것입니다. </li><li> 스핀 코팅 포토 레지스트의 첫 번째 레이어는 다음과 같은 조리법을 사용하여 : </li></ol><table border="1"><tbody><tr><td> 단계 </td><td> 시간 (초) </td><td> 속도 (rpm) </td><td> 가속 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 2 &lt;/ TD&gt; <td> 300 </td><td> 최고 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 10 </td><td> 0 </td><td></td></tr><tr><td> 3 </td><td> 3 </td><td> 300 </td><td> 최고 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 60 </td><td> 600 </td><td> 최고 </td></tr><tr><td> 5 </td><td> 10 </td><td> 500 </td><td> 최고 </td></tr><tr><td> 6 </td><td> 10 </td><td> 600 </td><td> 최고 </td></tr></tbody></table><ol start="4"><li> 그런 다음 90 초 동안 110 ° C의 온도 열판에 웨이퍼를 굽는다. 부드러운 빵을 한 후 포토 레지스트의 두께는 20 ~ 30 μm의 수 있습니다. </li><li> 코트에게 첫 번째 레이어에 사용되는 것과 동일한 조리법에 따라 포토 레지스트의 두 번째 레이어를 회전. </li><li> 부드러운 빵을 90 초 동안 110 ° C의 온도 열판에 배치하여 다시 웨이퍼. 이 부드러운 빵을 한 후 포토 레지스트의 두께는 40 ~ 60 μm의 수 있습니다. </li><li> photor를 노출하여 긍정적 인 마스터 패턴을 생성영화 마스크를 통해 14,500 엠제이 / cm 2의 노광량으로 UV 빛을 ESIST. </li><li> 탈 (DI) 물 (1시 2분 (V / V))의 개발을 희석. 패턴이 완전히 개발 될 때까지 용액에 반복적으로 웨이퍼를 씻어. 다음 DI 물과 웨이퍼를 세척하고 질소 가스를 사용하여 말립니다. </li><li> 리플 로우 : 4 분, 용매 증발을 방지하기 위해 유리 페트리 접시 덮개를위한 120 ° C의 온도 열판에 배치 웨이퍼. 열판에서 웨이퍼를 제거하고 실온까지 냉각 할 수 있습니다. 리플 로우 후의 레지스트 두께는 50 μm의 수 있습니다. </li></ol> 2. PDMS 마이크로 채널 네트워크 소프트 리소그래피 제작 <ol><li> 10:1 중량 비율 (기본 : 경화제)에서 폴리 디메틸 실록산 (PDMS) 솔루션을 준비하고 행성 원심 믹서를 사용하여 철저하게 섞는다. </li><li> 리플 로우 포토 레지스트 마스터 금형에 PDMS 솔루션을 캐스팅합니다. 가스를 15 분 동안 데시 케이 터에서 주조 PDMS를 놓고. 필요한 경우 남아있는 거품을 제거하기 위해 질소 가스를 사용합니다. </li><li> 그것을 치료 할 수 있도록 3 시간 동안 60 ° C의 온도에서 오븐에 PDMS를 굽는다. 그런 다음 마스터 금형 치료 PDMS 층을 제거합니다. </li><li> 채널 네트워크에 구멍을 펀치로 유입 / 유출 구멍을 만들 날카롭게 주먹을 사용합니다. 질소 가스를 사용하여 PDMS의 표면을 청소합니다. </li><li> 4.5 × 10 -2 Torr의 및 3.5 피트 / 분의 산소 유량의 압력에서 플라즈마 클리너 내부에 30 초 동안 산소 플라즈마 두 PDMS 레이어를 처리합니다. 그런 다음 광학 현미경으로 수동으로 PDMS의 표면을 맞 춥니 다. 물 한 방울 정렬의 더 나은 제어에 필요한 경우에 사용합니다. </li><li> 60 ° C 영구적 인 결합을 달성하기 위해 30 분 동안 오븐에서 장치를 굽는다. </li></ol> 3. 칩 HUVEC 문화 및 시드 <ol><li> 문화는 L-글루타민과 문화 매체와 HUVECs 10 % 태아 소 혈청 (FBS)와 보충. 일에 대한2와 5 사이에 전자 실험 구절을 사용 하였다. </li><li> HUVECs가 합류되면, 37 ℃에서 2-6 분 동안 세포를 계산하고 최초의 HEPES이 (HEPES-BSS) 생리 식염수를 버퍼로 세포를 세척하여 그들을 수확 후 트립신 / EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산)과 부화와 세포 치료 트립신이 완료된 후, 트립신을 중화 솔루션과 트립신 / EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산)을 중화. 원심 분리를 수집하기 위해 8 % 덱스 트란과 문화 매체에있는 세포를 일시 중지합니다. 덱스 트란은 더 나은 세포 파종 및 첨부 돕기 위해 중간 점도를 높이기 위해 사용되었다. </li><li> 5 4.5 × 10 -2 Torr의의 작동 압력 분 및 3.5의 산소 유량 피트 3 / 분 산소 플라즈마 장치를 취급합니다. 다음 DI 워터로 장치를로드하고 멸균 층류 생물 안전 후드에서 8 시간 동안 UV 빛으로 취급합니다. </li><li> 세포가 준비되어 하루 전에 1X 인산염 장치를 세척 피브로넥틴 (100 ㎍ / ㎖, DIL와 코트 다음 (1X PBS) 완충 식염수1X PBS로 uted), 4 ° C에서 하룻밤 냉장고에 품어. </li><li> 피브로넥틴 코팅 후 1X PBS 다음 배지와 부하 장치를 씻는다. 15 분 37 ° C의 온도에서 장치를 품어. </li><li> 3-4 X 10 6 세포 / ML의 세포 농도와 8 % 덱스 트란 문화 매체에 HUVEC 세포를로드합니다. 장치의 하나 입구에서 세포의 20 μL 방울을 배치하고 미세 유체 채널에 세포를 소개를 기울이십시오. 15-20 분 후 세포는 채널의 측면 벽에 부착하기 시작합니다. 장치에게 전지보다 균일 한 분포를 생성 할 때마다 15 분을 돌립니다. 필요한 경우, 추가 하중을 수행 할 수 있습니다. </li></ol> 4. 장기 관류 설정 정적 문화의 5-6 시간 후, 첨부 HUVECs 완전히 확산하기 시작합니다. 10 μL / 시간의 지속적인 흐름으로 원격 제어 주사기 펌프 시스템을 사용하여 관류를 설정합니다. 관류는 F를 조정할 수 있습니다또는 더 높은 유량,는 2 주 4 일 사이 기간 동안 지속될 수있다. 5. 세포 염색 및 현미경 특성 <ol><li> 세포가 장치 안에 합류에 도달하면, 첫째, 철저하게 매체를 제거 1X PBS로 장치를 세척한다. 다음 희석제 (4 μL-1 ML)로 희석 붉은 염료로 장치를로드합니다. 셀 로딩 절차와 비슷 염료를 넣습니다. 상온에서 5 분 동안 어둠 속에서 장치를 배양 한 후 염색을 중지 배지로 장치를 세척한다. 염료의 긴 배양은 세포 독성과 disadhesion가 발생할 수 있습니다. </li><li> 1X PBS (ML 당 2 방울)에 희석 파란색 염료로 장치를로드합니다. 상온에서 5 분 동안 어둠 속에서 부화 후 철저하게 1X PBS로 장치를 세척한다. </li><li> 거꾸로 광학 현미경으로 세포 염색을 검사합니다. 염색이 좋으면 (1X PBS로 희석 3.5 % 파라 포름 알데히드) 고정 매체로 마이크로를로드 한 후 잠수함중간과 완전히 알루미늄 호일로 커버를 고정에있는 장치. 4의 온도에 냉장고에 장치를 보관 ° C 건조하고 photobleaching에에서 장치를 방지 할 수 있습니다. 고정 장치는 이제 공 촛점 현미경 스캐닝 레이저로 할 수있는 공 촛점 이미징을위한 준비가되어 있습니다. </li></ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

<html> 1. 마스터 금형 제작 혈관의 형태 학적위한 설계 원칙 중 하나는 네트워크를 통해 혈관 직경의 분포는 최소의 에너지 고려에 의해 지배되는 진술 머레이의 법칙 16로 알려져 있습니다. 또한 분기점에서 부모 혈관의 직경 큐브 딸 혈관의 직경 큐브의 합에 해당된다는 진술 ( <img alt="식 1" fo:content-width="0.9in" fo:src="/files/ftp_upload/50771/50771eq1.jpg" src="/files/ftp_upload/50771/50771eq1.jpg" width="100px" /> 또한) 19 Poiseuille의 법칙은 다음과 같이 혈관의 대부분에서 전단 응력의 ​​크기를 추정하는 데 사용되었습니다 <img alt="식 2" fo:content-width="0.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50771/50771eq2.jpg" src="/files/ftp_uplo...

미세 혈관은 혈액 순환 시스템의 일부로서, 혈액과 조직 사이의 상호 작용을 중재 신진 대사 활동을 지원, 조직의 미세 환경을 정의하고, 많은 건강과 병적 상태에 중요한 역할을한다. 체외에서 기능 미세 혈관의 재현부는 복잡한 혈관 현상의 연구 플랫폼을 제공 할 수 있습니다. 그러나, 내피 세포 마이 그 레이션 분석, 내피 관 형성 분석과 쥐 및 쥐 대동맥 링 분석 등의 생체 미세 혈관 분석, 종래의 입체 (3D) 형상과 연속 흐름 제어에 대해 생체 내 미세 혈관의를 다시 할 수 없습니다 1-8. 동물 모델과 같은 각막 신생 혈관 분석, 병아리 융모 막 혈관 분석 및 마트 리젤 플러그 분석 등의 생체 분석,에서를 사용하여 미세 혈관의 연구는 더 많은 시간이 소요되는 비용 높은 관찰과 quantifications에 대해 도전하고 있습니다윤리적 문제 1, 9-13 올립니다. 하지 않았을 등 쉽게 엄격하게 제어 생물학적 조건과 역동적 인 유체 환경과 같은 연구 14, 동물 생체에 관련된 높은 실험 비용과 복잡성을 축소 및 단축하면서 micromanufacturing 및 미세 유체 칩 기술의 발전은 생명 과학에 대한 통찰력의 다양한 활성화 기존의 거시적 기술로 할 수 있었다. 여기, 우리는 endothelialized를 구성하는 방법을 제시 마이크로 - 온 - 칩 생체 내 미세 혈관에서의 3D 형상을 모방하고 포토 리소그래피 리플 로우 레지스트 기술, 소프트 리소그래피, 그리고 미세 유체의 조합을 사용하여 제어 지속적인 혈류의 흐름에서 실행됩니다.

<table><tbody><tr><td>Reagent/Material</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Reflow Photoresist</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZP4620</td><td></td></tr><tr><td>Developer</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZ 400K</td><td></td></tr><tr><td>PDMS</td><td>Dow Corning Corporation</td><td>Sylgard 184</td><td></td></tr><tr><td>MCDB 131 Culture Medium</td><td>Invitrogen</td><td>10372-019</td><td></td></tr><tr><td>NacBlue 핵 염색</td><td>Invitrogen</td><td>H1399</td><td></td></tr><tr><td>PKH Red Stain</td><td>Sigma</td><td>MINI26 및 PKH26GL</td><td></td></tr><tr><td>Fibronectin</td><td>Gibco</td><td>PHE0023</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamine</td><td>Sigma G7513</td><td></td><td>Buffered</td></tr><tr><td>Saline Invitrogen</td><td>14040-133</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HEPES Buffered Saline</td><td>Solution Lonza</td><td>CC-5024</td><td></td></tr><tr><td>트립신/EDTA</td><td>인비트로젠</td><td>25300-062</td><td></td></tr><tr><td>트립신 중화액</td><td>Lonza</td><td>CC-5002</td><td></td></tr><tr><td>PDMS 경화제</td><td>다우코닝 코퍼레이션</td><td>실가드 184</td><td></td></tr><tr><td>1차 인간 배꼽 정맥 내피 세포</td><td>Lonza</td><td>CC-2517</td><td></td></tr><tr><td>소 태아 혈청</td><td>Lonza</td><td>14-501F</td><td></td></tr><tr><td>희석제 C</td><td>Sigma</td><td>CGLDIL</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst33342</td><td>Invitrogen, Molecular Probes</td><td>R37605</td><td></td></tr><tr><td>덱스트란</td><td>Sigma</td><td>95771</td><td></td></tr><tr><td>3.5% 파라포름알데히드</td><td>전자 현미경 과학</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spinner</td><td>Laurell Technologies Corporation</td><td>WS-400BZ-6NPP/ LITE</td><td></td></tr><tr><td>데시케이터</td><td>BelArt 제품</td><td>999320237</td><td></td></tr><tr><td>도립 현미경</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ti</td><td></td></tr><tr><td>주사기 펌프 시스템</td><td>하버드 장치</td><td>PHD Ultra</td><td></td></tr><tr><td>Laminar Biosafety Hood</td><td>Thermo Scientific</td><td>1300 시리즈 A2</td><td></td></tr><tr><td>행성 원심 믹서</td><td>Thinky</td><td>ARE-310</td><td></td></tr><tr><td>Isotemp 오븐</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-246-516GAQ</td><td></td></tr><tr><td>광학 현미경</td><td>Zeiss</td><td>Invertoskop 40C</td><td></td></tr><tr><td>플라즈마 클리너</td><td>Harrick Plasma</td><td>PDC-32G</td><td></td></tr><tr><td>핫플레이트</td><td>Barnstead/Thermolyne Cimarec</td><td>SP131635</td><td></td></tr><tr><td>레이저 스캐닝 컨포칼 현미경</td><td>Zeiss</td><td>LSM 510</td><td></td></tr></tbody></table>

멀티 깊이 원형 단면 endothelialized 마이크로 채널 - 온 - 칩의 개발을위한 절차

Procedure for the Development of Multi-depth Circular Cross-sectional Endothelialized Microchannels-on-a-chip

생체 내 동물 연구는 더 많은 시간이 소요되는, 비싼, 그리고 관찰과 정량화가 매우 어려운됩니다 때문에 노력은 미세 혈관의 연구를위한 생체 분석의 개발에 초점을 맞추고있다. 세 가지 차원 (3D) 형상에 대해 생체 내 미세 혈관의 대표 및 지속적인 유체 흐름을 제공 할 때 그러나, 생체 미세 혈관 분석에서 기존의 제한이 있습니다. 포토 리소그래피 리플 로우 레지스트 기술, 소프트 리소그래피, 그리고 미세 유체의 조합을 사용하여, 우리는 멀티 깊이 원형 단면 endothelialized 개발 한 제어 연속 관류에 따라 생체 내 미세 혈관에서의 3D 형상을 모방하고 실행 마이크로 - 온 - 칩 흐름. 긍정적 인 리플 로우 레지스트는 반원형 단면 미세 네트워크와 마스터 몰드를 제조하는 데 사용되었다. REPL 개의 폴리 디메틸 실록산 (PDMS) 마이크로의 정렬 및 본딩마스터 금형 icated, 원통형 마이크​​로 네트워크를 만들었습니다. 마이크로의 직경은 잘 제어 할 수 있습니다. 또한, 칩 내부에 씨앗을 품고 기본 인간 제대 정맥 내피 세포 (HUVECs)는 세포 4 일 이주 사이의 기간 동안 지속적인 제어 관류에 따라 마이크로의 내부 표면을 지어 것으로 나타났다.

멀티 깊이 마이크로 네트워크를 제조하는 우리의 접근 방식은 미세 크로스 섹션에게 15 반올림하는 생체 미세 혈관에서의 복잡한 3D 형상을 모방. 또한, 부모 분기 채널의 직경과 딸 채널은 대략 전체 채널 저항이 낮고 유속이 네트워크 16-18 전역에 균일 있도록 필요한 수준에서의 유체 흐름을 유지하기 위해 머레이의 법칙을 준수하십시오. 반원형 포토 레지스트 마스터 금형의 제조 및 원형 단면 PDMS 마이크로 채널 네트워크에 대한 프로세스 및 결과는 영화 1, 그림 2는 각각 영화 2에서 설명 하였다. PDMS 마이크로 채널 네트워크의 기하학적 특징은 특징과 그림 2에 나타내었다. 우리의 결과는 포토 레지스트 리플 로우 기술은 다중 깊이 분기 채널 네트워크를 만들 수 있다는 것을 보여 전NA 더 편리 포토 레지스트의 리플 로우 기술로 접근, 약 머레이의 법칙을 순종 혈...

마이크로 - 온 - 칩 플랫폼은 포토 리소그래피 리플 로우 레지스트 기술, 소프트 리소그래피, 그리고 미세 유체의 조합에 의해 개발되었다. endothelialized 마이크로 플랫폼은 생체 내 미세 혈관에서의 3 차원 (3D) 구조를 모방 제어 지속적인 혈류의 흐름에서 실행하고, 고품질의 실시간 영상을 허용하고 미세 혈관 연구에 적용 할 수 있습니다.

멀티 깊이 원형 단면 Endothelialized 마이크로 채널 - 온 - 칩의 개발을위한 절차

Efforts have been focused on developing in vitro assays for the study of microvessels because in vivo animal studies are more time-consuming, expensive, ...

본 절차의 전반적인 목표는 생체 내 미세혈관의 3D 기하학적 구조를 모방하며 제어된 연속 관류 흐름 하에 작동하는, 다중 깊이의 원형 단면 내피 세포 미세 채널 칩을 개발하는 것입니다. 이는 먼저 양성 리플로우 가능 포토레지스트를 사용하여 반원형 단면의 미세 채널 네트워크가 형성된 마스터 몰드를 포토리소그래피 공정으로 제작함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 이 마스터 몰드를 사용하여 두 개의 폴리디메틸실록산 미세 채널을 복제하고, 이를 정렬 및 접합하여 원통형 미세 채널 네트워크를 생성하는 것입니다.다음으로, 1차 인간 제대정맥 내피세포를 마이크로채널 네트워크 내에 배치한 후, 4일에서 2주 사이의 기간 동안 제어된 연속 배지 관류 조건 하에서 세포를 배양합니다. 최종적으로, 현미경 상에서 막과 핵이 관찰되는 세포 단층의 합류가 마이크로채널 네트워크의 내면을 따라 형성되어, 복잡한 혈관 현상 연구를 위한 플랫폼이 될 수 있는 기능적 미세혈관의 계산이 가능해집니다. 하지만 세포 이동 분석, 관 형성 분석, 링 분석과 같은 기존의 개별 미세혈관 분석법들은 3차원적 기하학적 구조와 연속적인 흐름 제어 측면에서 개별 미세혈관을 재현하는 데 한계가 있습니다.당사의 기존 미세가공법과 같은 기술의 주요 장점은 단면이 둥근 생체 내 미세 혈관의 복잡한 3D 기하학적 구조를 모방한 다층 깊이의 미세 유체 채널 네트워크를 관례적으로 제작할 수 있다는 점입니다. 또한, 이는 유체 흐름을 필요한 수준으로 유지하여 전반적인 채널 저항을 낮추고 네트워크 전체에 걸쳐 유량이 더 균일하게 흐르도록 하여 더욱 느린 속도에 근접한 미세혈관 생체자기 시스템을 설계할 수 있게 합니다. 본 절차는 제 연구실의 대학원생이 시연합니다. 이 과정은 텍스트 프로토콜에 상세히 기술된 대로 직경 30 µm에서 60 µm 사이의 미세 채널로 구성된 포토레지스트 마스터 몰드 제작부터 시작됩니다. 간단히 설명하자면, 사용 24시간 전에 4 °C 냉장고에서 리플로우 포토레지스트를 클린룸으로 옮겨 실온에서 가온해 둡니다.텍스트 프로토콜의 절차에 따라 사전 세척된 실리콘 기판 위에 포지티브 리플로우 포토레지스트 층을 스핀 코팅하는 것으로 시작하십시오. 그런 다음 패턴 마스크를 통해 포토레지스트를 UV 광선에 노출시킨 후 패턴화된 마이크로 채널을 현상하십시오. 마지막으로, 리플로우 공정을 거쳐 반원형 단면의 마이크로채널 네트워크를 생성합니다.마스터 몰드가 준비되면, 베

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Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

우리는 마이크로 bioreactors에서 세포의 3 차원 배양을위한 칩 기반의 플랫폼을 설명합니다. 하나의 칩 10 미오 최대 집 수 있습니다. 멸균, 폐쇄 순환 루프에서 유체 흐름, 산소 장력 등에 관한 정확하게 정의된 조건 하에서 재배 세포 수 있습니다.

Perfused 마이크로 bioreactors의 칩 기반의 입체 세포 배양

우리는 세 차원 세포 배양을위한 다공성 고분자 칩의 microfabrication 두 가지 프로세스를 제시한다. 첫 번째는 용매 증기 용접 공정과 결합 핫 엠보싱입니다. 두 번째는 생산의 중요한 단순화하기 위해 선도적인 이온 트랙 기술과 함께 최근에 개발된 microthermoforming 프로세스를 사용합니다.

입체 세포 배양을위한 칩 크기의 공사장 공중 발판의 Microfabrication

microvascular 크기의 채널 (&lt;30 μm의)와 microfluidic 장치의 전체 내부 3D 표면에 걸쳐 문화 내피 세포 단일층를하는 방법이 설명되어 있습니다.

Hematologic 질환의 Microvascular 상호 작용 유학을위한 Endothelialized Microfluidics

석판술으로 새겨져와 PDMS에서 가공 Microfluidic 흐름 여왕님 EC 장애와 염증과 관련된 기능적 결과를 알아내기 위해 적용됩니다. 대표 실험에서는 차등 전단 응력의 능력 시토킨 활성화 EC monolayers에 monocytic 세포 접착을 조절하기 위해이 입증되었습니다.

온칩 내피 염증성 Phenotyping

일차원 국한 미세 환경에서 세포의 자발적인 이동을 연구하는 정량적 방법이 설명된다. 이 방법은 미세 채널을 활용하고 번의 실험에서 서로 다른 조건 하에서 세포의 다수의 이동을 연구하기 위해 이용 될 수있다.

미세 채널에서 세포의 이동에 관한 연구

이 간행물 transendothelial 전기 저항 (TEER)의 직접 정량화에 대 한 통합 된 전극 가진 기관-온-칩 소자의 제작을 설명합니다. 유효성 검사, 혈액-뇌 장벽 안쪽이 미세 장치 유사 했다 및 장벽 기능 모니터링 했습니다. 전극 통합 및 직접 TEER 정량화에 대 한 제시 방법 일반적으로 적용 됩니다.

제조 및 통합된 전극 Transendothelial 전기 저항을 직접 측정 하는 기관-온-칩 시스템의 유효성 검사

여러 가지 방법입니다 미세 장치에 포함 된 비 직사각형 섹션의 채널의 제조에 사용할 수 있습니다. 그들의 대부분을 다단계 제조 하 고 광범위 한 맞춤 포함. 이 문서에서 한 단계 접근입니다 순차적 습식된 에칭에 의해 다른 기하학적 횡단면의 미세 채널 제조에 대 한 보고 됩니다.

1 단계 접근입니다 미세 채널 순차적 습식된 에칭 프로세스에 의해 다른 형상 섹션의 조작

여기, 우리 stretchable, 듀얼 채널의 제작, 기관 수준 기능 체 외업과 위한 기관 칩 미세 세포 문화 장치를 설명 하는 프로토콜을 제시.

Stretchable, 듀얼 채널, 미세 기관 칩의 확장 가능한 제작

여기서는 마이크로머신 마이크로유체 플랫폼을 사용하여 3차원 단순화 및 미분화 피부 모델을 생성하는 프로토콜을 제시합니다. 병렬 흐름 접근법은 주사기 펌프에 의해 제어되는 상피 세포의 파종을 위해 진피 구획의 시상 증착을 허용합니다.

마이크로머신 마이크로유체 플랫폼의 간소화된 3차원 스킨 온-어칩 모델 생성

이 프로토콜에서는 생리학적으로 관련된 미세혈관 환경을 재현하고 전체 백혈구 부착/이동 캐스케이드를 재현할 수 있는 생체모방 미세유체 분석법이 염증성 질환에서 백혈구-내피 세포 상호작용을 연구하는 데 사용됩니다.

염증 중 백혈구-내피 세포 상호작용을 연구하는 미생리학적 시스템

배우세요 다층 원형 단면 내피세포화 마이크로채널 온 칩 제작 방법을 통해 생체 미세혈관의 3D 구조를 모사하고 실시간 영상으로 혈관 현상을 연구하는 기술을 익히세요.

멀티 깊이 원형 단면 Endothelialized 마이크로 채널 - 온 - 칩의 개발을위한 절차

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