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DOI: 10.3791/51356-v
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우리는 (E) 9.5 및 이후 단계 배아 일에 마우스 배아 내의 배아 또는 다 능성 세포로부터 유래 된 내인성 및 그래프트 세포의 세포 운명 및 표현형 모두를 모니터하기 위해, 염료를 주입하는 DNA 벡터, 바이러스, 세포를 일련의 방법을 설명 개발.
이 절차의 전반적인 목표는 배아 마우스 심장에서 세포 사체 또는 DNA를 주입하는 것입니다. 세포 지방을 조사하거나 유전자 발현을 국소적으로 조작하기 위해 먼저 임신한 쥐의 배아를 해부하고 배아 심장을 노출시킴으로써 이를 수행합니다. 다음으로 DNA 염료 또는 세포를 심장의 표적 관심 영역에 주입합니다.
그런 다음 배아를 배양한 후 심장을 제거하고 배양합니다. 마지막으로, 주입 또는 표지된 세포의 운명은 현미경 검사를 통해 결정됩니다. 궁극적으로, 주입, 표지 또는 유전자 변형 세포의 운명은 컨포칼 현미경 또는 광 및 에피 형광 현미경으로 모니터링되어 심장 발달 중 특정 유전자 및 세포의 기능적 중요성을 밝힙니다.
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