Name: 호수 송어에 PCB의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 ( Salvelinus namaycush) 먹이에서 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 24 s
Description: 학습하세요 호수 송어(Salvelinus namaycush)에서 PCB 동족체의 순 영양 전송 효율을 실험실에서 평가하는 방법을. 자연 먹이를 이용한 이 기법은 수생 생태계의 오염 물질 역학 이해에 기여합니다.

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이 작업은 오대호 어업 위원회(Great Lakes Fishery Commission)와 애니스 수자원 연구소(Annis Water Resources Institute)의 일부 자금 지원을 받았습니다. 상표명, 제품명 또는 회사명의 사용이 미국 정부의 승인을 의미하지는 않습니다. 이 기사는 미국 지질조사국 오대호 과학 센터의 기고 1867입니다.

1 실험실 실험 <ol><li> 먹이 물고기를 구합니다 실험 기간 동안 포식자 물고기에 공급한다. 바람직하게는 이러한 먹이 물고기는 현장, 냉동에서 캡처, 약 -30 ° C에서 보관해야합니다. 먹이 물고기에 대한 잠재적 인 소스로 상업 낚시 작업을 고려하십시오. </li><li> 실험실 탱크에 포식자 물고기를 소개 실험에 사용한다. 15 포식자 물고기까지 870-L의 각 탱크에 도입되었으며, 30 포식자 물고기까지 이전의 연구 (16, 18)에서 2380-L 탱크에 각각 도입되었다. </li><li> 선택한 먹이 물고기의 다이어트 포식자 물고기를 적응. 적응되면, 포식자 물고기는 실험을 시작하기 전에 1-3개월이 다이어트에 남아 있어야합니다. </li><li> 무작위로 먹이 물고기의 배치에서 10-20 복합 샘플을 선택하여 먹이 물고기의 샘플을 따로 설정합니다. 복합 시료 물고기의 먹이의 수 먹이의 크기에 따라 3 ~ 100의 수물고기입니다. 각 복합 샘플은 냉동 팩에 넣어 약 -30 ° C에서 보관을 두 번해야한다. </li><li> 각 탱크에 물고기 30-50%을 희생하여 실험을 시작합니다. <ol><li> , 물고기를 안락사 큰 플라스틱 용기에 물 45 L로 Finquel의 8g을 혼합 한 후 Finquel 용액으로 용기에 물고기를 배치합니다. </li><li> 일단 안락사, 처리 시간까지 약 -30 ° C에서 가방, 두 번 가방, 저장에 한 탱크에서 희생 된 물고기를 모두 넣습니다. </li><li> 각 탱크 내에 남아있는 물고기의 각각의 무게를 측정하고, 가중치를 기록; 마취는 가능성이 무게를 수행 할 필요합니다. </li><li> , 물고기를 마취 큰 플라스틱 용기에 물 45 L로 Finquel의 4.6 g을 혼합 한 다음 Finquel 용액으로 용기에 물고기를 배치합니다. </li><li> 물고기를 계량하기 전에 적용하려면 마취에 대한 몇 분 정도 기다립니다. </li></ol></li><li> 각 실험 일에, 해동적절한 먹이 물고기의 양, 그리고 약 1 5g에 무게 조각으로 먹이 물고기를 잘라. 다음, 각 탱크에 배치되는 먹이 물고기의 양을 달아 각각의 탱크에 먹이 물고기 조각을 드롭하고 약 1 시간이 공급하는 포식자 물고기를 할 수 있습니다. 그런 다음, 모든 음식을 먹지 제거 약 20 분간 자연 건조 식품을하도록 한 다음 각 탱크에 먹다 남은 음식을 무게. 탱크에 넣고 음식의 양은 매일 탱크마다 먹지 음식의 양을 기록한다. 주 : 하나의 수유 기간 매일 18시 소모하는 것처럼 대표 실험, 호수 송어가 많은 음식으로 공급 하였다. 그러나, 포식자 물고기는 고정 식량 16, 19에 배치 될 수있다. </li><li> 각 탱크에 남은 포식자 물고기 모두 희생하여 실험을 종료. , 물고기를 안락사 큰 플라스틱 용기에 물 45 L로 Finquel의 8g을 혼합 한 후 Finquel 용액으로 용기에 물고기를 배치합니다. 기록 t희생 된 물고기의 각 그는 무게. 신뢰할 수있는 결과를 위해, 실험은 적어도 130일 대해 바람직하게는 최소 100 일 동안 실행한다. 처리 시간이 될 때까지 약 -30 ° C에 하나의 가방, 두 번 가방, 저장에 탱크에서 물고기를 모두 넣습니다. </li></ol> 2 물고기의 균질화 <ol><li> 포식자 물고기 및 / 또는 해동을위한 먹이 물고기 복합 세트를 선택합니다. 복합 부분적으로 해동 할 수 있습니다. 각 복합 균질화 0.5 시간 일에 필요할 수 있습니다. </li><li> 적합한 크기의 블렌더를 사용하여, 각 복합 재료의 균질화. 각 복합 들어, 세척, 아세톤 세척이라는 라벨을 병에 균질 (50~1백g) 샘플을 배치합니다. 그런 다음 항아리 모자와 처리 시간이 될 때까지 약 -30 ° C에서 항아리를 저장합니다. </li><li> 물고기를 균질화하는 데 사용되는 모든 장비를 세척 한 다음 제대로 샘플 사이의 증류수와 메탄올로 씻어냅니다. </li></ol> 3 추출 <ol><li> 20.0 g의 무게를의 200 ㎖의 비이커에 물고기 균질 조직을 해동. </li><li> 황산나트륨 약 40g을 넣고 주걱으로 잘 섞는다. </li><li> 추출물 20 겨 / ㎖의 최종 농도를 산출 농도 동족체 30, 61, 161, 및 166를 포함하는 대리 스파이크 스파이크 액을 합한다. </li><li> 매 20 분을 혼합하면서 샘플을 실온에서 건조하도록 허용합니다. </li><li> 샘플이 샘플 추출을위한 준비가되어있는 시점에서 마른 모래의 일관성을 도달 할 수 있습니다. </li><li> 테프론 종기 칩, 속 슬렛, 콘덴서를 포함하는 500 ㎖의 플라스크에 속 슬렛 추출 장치를 설정합니다. </li><li> 거친 프릿 디스크 바닥이나 종이 골무와 유리 골 무에 건어물 혼합물을 추가합니다. </li><li> 샘플 사용을 비커에 50 % 헥산과 50 %의 디클로로 메탄 150 mL를 넣고 주걱 비이커 벽을 긁어 동안 교반 하였다. </li><li> 속 슬렛을 통해에 사이클에 부착 된 플라스크 속 슬렛의 상단에 용매를 전송하고 그것을 허용플라스크. </li><li> 다시 150 mL를 두 번 반복합니다. </li><li> 가열 소자 상에 부착 된 플라스크에 속 슬렛를 놓고 콘덴서를 연결합니다. </li><li> 가열 소자를 켜고 부드러운 종기 용매를 가지고, 다음 16 시간 차가운 물이 콘덴서에 공급되어 있는지 확인하고 최소 압축을 풉니 다. </li><li> 용매를 식힌 다음 샘플 플라스크의 물을 포함하고 있는지 확인합니다. 물을 함유하는 플라스크를 들어 황산나트륨을 추가하고 물을 황산 나트륨에 의해 흡수 될 때까지 소용돌이 친다. </li><li> 질소 샘플 집중 또는 온수 욕조가있는 Kaderna 덴마크어 (KD) 유리 설치 프로그램을 사용하여 샘​​플을 집중. </li><li> 시료 2 이하 ㎖를 증발하고 5 ㎖의 메스 플라스크에 사용될 유리로부터 샘플을 전송할 헥산 작은 세정액을 사용하여 5 ㎖의 최종 부피로 나오게. </li><li> 10 ㎖의 유리 병에 전송하고 샘플 정보와 함께 레이블을 붙입니다. </li></ol><ol><li> 활성화 실리카 겔 100 g의 진한 황산 44g을 첨가하여 산성화시킨 실리카 겔을 준비한다. </li><li> 하단 유리솜의 작은 플러그를 함유하는 작은 크로마토 그래피 컬럼으로 산성화시키고 실리카 겔 10g을 추가한다. </li><li> 헥산 10 ㎖로 컬럼을 미리 세척 한 후, 컬럼에 시료 추출물 1 ㎖를 추가합니다. </li><li> 헥산 20 ㎖로 칼럼을 용출하고, 20 ㎖의 테이퍼 유리관에 모은다. </li><li> 질소 기류하에 질소 증발기 (N-VAP) 장치에 유리 튜브를 삽입하고 뜨거운 물에 침지. </li><li> 미만 1 ml의 증발하지만 건조하지. </li><li> N-VAP 장치에서 제거하고 헥산의 작은 세탁으로 1 mL 용량 플라스크에 전송합니다. </li><li> 1.8 ml의 오토 샘플러 바이알 샘플 정보로 표지에 전송합니다. </li><li> 유리 병에 내부 표준의 4 μl를 스파이크. 샘플은 지금 분석을위한 준비가되어 있습니다. </li></ol> 5 애널가스 크로마토 그래피에 의한 ysis은 - 질량 분석 네거티브 화학 이온화를 사용하여 <ol><li> 계측기를 교정 표준을 사용하여 표준이 잘​​ 분리 이성체의 그룹으로 구성된 혼합물에서 사용할 수 있습니다. 믹스 1-5 거의 Arochlors 1016, 1221, 1232, 1242, 1248, 1254에서 발견 이성체 모두로 구성하고, 1260 믹스 1은 멀티 레벨 교정 믹스로서 사용되며, 시스템의 선형성은 적어도 제조함으로써 확인된다 이 100 ng를 / ㎖ 사이 농도의 오 보정 레벨. 믹스 2-5은 각 동족체에 대한 단일 지점 교정으로 사용됩니다. </li><li> 반응물 가스 등의 캐리어 가스 (1 ㎖ / 분) 및 메탄 등의 수소와 네거티브 화학 이온화 모드에서 질량 분석 시스템 - 크로마토 그래피를 설정. </li><li> 분리를위한 0.25 μm의 막 두께에 DB-XLB로 코팅 된 융합 실리카, 캐 필러 리 컬럼 (0.25 mm 내경 × 60m)를 사용합니다. 26 다음 25 ° C / 분의 60에서 212 ° C에 프로그램 오븐 온도,0 ° 1 ° C / 분 C, 다음 4 분의 최종 대기 시간, 4 ° C / 분에서 280 ° C까지. 인젝터 및 전송 라인 온도는 280 ° C로 설정해야합니다. 비분 할 분사 모드를 이용하여 시료 1-2 μl를 주입한다. </li><li> 13 C 표지 decachlorobiphenyl를 사용하여 내부 표준 방법에 의해 모든 표준 및 샘플을 분석 할 수 있습니다. </li><li> 두번째 소스 표준 및 Aroclors 1242 및 1260을 실행하여 초기 교정에 대한 검사를 수행 한 다음이 검사 과정에서 관찰 된 양의 Aroclor의 동족체에 대한 예측 값을 비교. </li><li> 모든 샘플의 초기 교정 절차가 성공적으로 수행되면, 완전한 분석. 교정 초기 캘리브레이션으로부터 교정의 혼합물 중 하나를 사용하여 매 10 샘플 검사 실행. </li></ol> 순 영양 전송 효율의 6 계산 <ol><li> 각 조합에 대해 O, γ, 그물 영양 전사 효율을 계산다음 식을 이용하여 F 탱크와 PCB의 동족체 : <img alt="식 (1)" fo:content-width="2in" src="/files/ftp_upload/51496/51496eq1.jpg" /> [PCB 수 f] 실험 끝에 탱크 포식자 물고기의 평균 PCB의 동족체 농도이고, W의 f는, 실험의 끝에 탱크 포식자 물고기의 평균 중량이다 [PCB I] 전 실험의 시작에서 포식자 물고기의 평균 중량이고, 섭취 PCB의 동족체의 양의 중량을 지칭 W 실험의 시작에서 탱크 포식자 물고기의 평균 PCB의 동족체 농도이고, PCB 동족체는 실험 과정 동안 탱크 내의 각 송어로 평균적으로 섭취. </li><li> 탱크 지속에 포식자 물고기 당 먹을 먹이 물고기의 평균 양 (무게)에 의해 먹이 물고기 복합에서 PCB의 동종의 평균 농도를 곱하여 상기 식의 분모를 계산실험의 전체 과정을 보내고. </li></ol>

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</ol>

γ의 가장 정확한 추정치를 들어, 정확하게 실험자의 실험 과정에서 탱크 및 탱크의 각각에 먹지 음식의 양에 각각 배치 된 음식의 양 모두를 추적 할 수 있어야한다. 이를 달성하기 위해, 실험자는 탱크로부터 먹지 식품을 모두 제거하고 무게를 정확하게 판별 할 수 있어야한다. 실제로 포식자 물고기가 먹은 음식의 정확한 추적뿐만 아니라, γ의 정확한 추정은 실험의 충분한 기간에 따라 달라질 수 있습니다. 널리 인용 실험실 연구가 구체적으로 자신의 음식이 기간 (22, 23)에 105-224일 원거리에서 물고기의 PCB 영양 전달 효율을 평가하기 위해 설계 감안할 때, 적어도 백일의 기간, 바람직하게는 적어도 130일는 것이 좋습니다. 또한, 바이어스는 전문가의 시작에서 PCB의 판정을위한 샘플 포식자 물고기의 수가 부족하여 γ의 추정치에 도입 될 수있다eriment 14. 샘플 크기가 감소 탱크 증가 포식자 물고기의 모든 평균 PCB 농도 반영하지 PCB 농도와 포식자 물고기의 샘플을 얻는 확...

물고기가 오염 물질을 축적하는 속도에 영향을 미치는 모든 요인 중에서 물고기가 먹는 음식에서 오염 물질을 보유하는 효율성은 가장 중요한1-3 중 하나입니다. 환경 오염에 대한 다양한 시나리오에서 오염된 물고기를 섭취하는 사람과 야생 동물 모두에 대한 미래 위험을 예측하기 위해 위험 평가 모델이 개발되었으며, 이러한 예측의 신뢰성은 물고기가 먹이에서 오염 물질을 보유하는 효율성 추정치의 정확성에 결정적으로 의존합니다4.
포식자가 섭취한 음식의 오염 물질이 장 벽을 통해 운반되는 효율은 총영양 전달 효율(gross trophic transfer efficiency)5로 알려져 있습니다. 포식자의 장 벽을 통해 운반되는 오염 물질의 양 중 일부는 결국 정제 및/또는 대사 변형을 통해 손실될 수 있습니다. 포식자가 섭취한 음식의 오염 물질이 포식자에 의해 유지되는 효율성은 제거 및 대사 변형으로 인한 손실을 포함하여 순 영양 전달 효율(net trophic transfer efficiency)6로 알려져 있습니다.
먹이에서 물고기로 유기 오염 물질의 총 영양 전달 효율은 옥탄올-물 분배 계수 Kow3,7로 측정된 지질 제휴를 포함하여 오염 물질의 화학적 특성에 따라 달라지는 것으로 보입니다. Thomann3에 의해 개발된 경험적 관계에 따르면, 총 영양 전달 효율은 log Kow가 5와 6 사이의 값과 같을 때 상대적으로 높습니다. Thomann3 관계에 따르면 총 영양 전달 효율은 log Kow가 6에서 10으로 증가함에 따라 log Kow 단위당 50%의 비율로 기하급수적으로 감소합니다.
그럼에도 불구하고, 먹이에서 물고기를 잡기 위한 폴리염화비페닐(PCB) 동족체의 총 영양 전달 효율은 대부분의 경우 Thomann3 관계를 따르지 않는 것으로 보입니다. 먹이에서 호수 흰살 생선 (Coregonus clupeaformis)에 대한 PCB 동족체의 영양 전달 효율은 Thomann8이 제안한 관계를 따랐지만, PCB 동족 동물의 영양 전달 효율은 대서양 연어 (Salmo salar) 9, 무지개 송어 (Oncorhynchus mykiss) 10, 코호 연어 (Oncorhynchus kisutch) 11 에 대한 log Kow와 약한 관련이 있거나 전혀 관련이 없었습니다, 북부 창꼬치(Esox lucius)11.
이 연구의 전반적인 목표는 먹이에서 물고기 물고기에 대한 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율을 추정하기 위한 실험실 기술을 제시하는 것이었습니다. 호수 송어(Salvelinus namaycush)는 호수 송어가 실험실 탱크에서 비교적 쉽게 유지 관리할 수 있기 때문에 우리 실험을 위한 물고기로 선택되었습니다. 블로터(Coregonus hoyi)는 호수 송어가 자연 환경에서 먹기 때문에 호수 송어에게 먹이가 되는 먹이 물고기로 선택되었습니다12. 또한, 실험실 실험에서 추정한 호수 송어의 순 영양 전달 효율이 Thomann3 관계를 따르는지 여부를 확인했습니다. 우리는 또한 호수 송어의 활동 정도가 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율(γ)에 상당한 영향을 미치는지 여부를 확인했습니다. 로렌시아 오대호(Laurentian Great Lakes)에서 호수 송어의 활동은 먹이 그물의 변화로 인해 호수 송어가 먹이를 찾는 데 더 많은 에너지를 할당하게 되었기 때문에 최근에 증가한 것으로 여겨집니다13. 호수 송어는 이 호수 송어를 상대적으로 높은 유속에 노출시켜 한 세트의 수조에서 운동하도록 강요받은 반면, 다른 호수 송어는 상대적으로 낮은 유속을 가함으로써 상대적으로 비활성 상태를 유지하도록 허용되었습니다. 마지막으로, γ 추정치에서 최고 수준의 정확성을 보장하고 실험실 결과를 해당 분야에 적용할 수 있도록 하기 위해 주의 깊게 따라야 하는 실험실 절차의 구체적인 세부 사항과 실험실 기술을 기반으로 한 연구를 위한 향후 방향에 대해 논의합니다. 순 영양 전달 효율은 실험실과 현장 모두에서 추정할 수 있으며 장점과 단점은 두 접근 방식 모두와 관련이 있습니다. γ 추정치의 정확도는 식품 소비량 추정치의 정확도에 따라 다릅니다. 실험실에서 물고기가 먹는 음식의 양은 적절한 프로토콜을 따를 때 정확하게 결정할 수 있는 반면, 현장에서 물고기가 먹는 음식의 양은 일반적으로 생물 에너지학 모델링을 통해 추정됩니다. 먹은 음식의 양을 도출하기 위해 생물 에너지학 모델링을 사용하면 식품 소비 추정치에 상당한 양의 불확실성을 도입할 수 있습니다. 어류 생물 에너지학 모델은 호수 송어의 경우 검출 가능한 편향 없이 식품 소비를 추정하는 것으로 나타났지만, 호수 흰살 물고기15,16의 경우 식품 소비에 대한 생물 에너지학 모델 추정치에서 상당한 편향이 감지되었습니다. 반면에, 실험실에서 추정된 순영양전달효율(net trophic transfer efficiency)의 추정치는 실험실과 현장(field) 사이의 섭식률(feeding rate)의 차이로 인해 현장에 적용되지 않을 수 있다17. 실험실과 현장의 증거에 따르면 섭식 속도가γ 14,17에 영향을 미칠 수 있습니다.
실험실에서 γ 추정하기 위해 본 연구에서 사용된 방법론은 포식자 물고기에게 먹이를 주고 포식자가 먹는 먹이 물고기의 양을 정확하게 추적할 수 있는 상황에 적용할 수 있습니다. 이를 달성하기 위해 실험자는 탱크에 넣기 전에 모든 음식의 무게를 측정해야 합니다. 그리고 실험자는 탱크에서 먹지 않은 음식을 모두 꺼낸 다음 먹지 않은 음식의 무게를 잴 수 있어야 합니다. 또한, 포식자와 피식자 물고기 모두의 샘플에 대한 충분한 수준의 균질화를 얻기 위해 적절한 믹서 및 블렌더 제품군을 사용할 수 있어야 합니다. 마지막으로, PCB 동족체 농도를 결정하는 데 사용되는 가스 크로마토그래피 – 질량 분석 기기는 상대적으로 낮은 농도에서 개별 PCB 동족체를 검출하고 정량화할 수 있어야 합니다.

<table><tbody><tr><td>870-L 유리 섬유 탱크</td><td>Frigid Units</td><td>RT-430-1</td><td></td></tr><tr><td>2,380-L 유리 섬유 탱크</td><td>Frigid Units</td><td>RT-630-1</td><td></td></tr><tr><td>Tricaine methanesulfonate (Finquel)</td><td>Argent Chemical Laboratories, Inc.</td><td>C-FINQ-UE-100G</td><td>Eugenol은 마취제로 사용할 수도 있습니다.</td></tr><tr><td>Ashland 셰프 나이프</td><td>시카고 칼 SKU</td><td>1106336</td><td></td></tr><tr><td>도마</td><td>Williams-Sonoma</td><td>3863586</td><td></td></tr><tr><td>Hobart verical 믹서 (40 쿼트)</td><td>Hobart Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1.9-L 푸드 프로세서</td><td>Robot Coupe, Inc.</td><td>RSI 2Y1&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>폴리에틸렌 백 (다양한 크기)</td><td>Arcan Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>I-Chem jars</td><td>I-Chem</td><td>220-0125</td><td></td></tr><tr><td>탑로드 전자 저울</td><td>Mettler Toledo</td><td>Mettler PM 6000&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>황산나트륨, 무수 - 과립</td><td>EMD</td><td>SX0760E-3</td><td></td></tr><tr><td>유리 추출 골무 (45mm x 130mm)</td><td>Wilmad-Lab Glass</td><td>LG-7070-114</td><td></td></tr><tr><td>테프론 끓는 칩</td><td>Chemware</td><td>919120</td><td></td></tr><tr><td>Rapid Vap 질소 샘플 농축기</td><td>Labconco</td><td>7910000</td><td></td></tr><tr><td>N-Vap 질소 농축기</td><td>Organomation</td><td>112</td><td></td></tr><tr><td>Soxhlet 추출 유리 제품 (500ml)</td><td>Wilmad-Lab 유리</td><td>&nbsp; LG-6900-104</td><td></td></tr><tr><td>헥산</td><td>버딕 & 잭슨&nbsp;</td><td>Cat. 211-4</td><td></td></tr><tr><td>디클로로메탄</td><td>버딕 & 잭슨&nbsp;</td><td>Cat. 300-4</td><td></td></tr><tr><td>실리카겔</td><td>BDH</td><td>Cat. BDH9004-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Labl Line 5000 다중 단위 추출 히터</td><td>Lab Line Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Agilent 5973 GC/MS와 화학 이온화</td><td>Agilent</td><td>5973N</td><td></td></tr><tr><td>내부 표준 솔루션&nbsp;</td><td>Cambridge Isotope Laboratories</td><td>EC-1410-1.2</td><td></td></tr><tr><td>PCB 동족체 교정 표준</td><td>Accustandard</td><td>C-CSQ-SET</td><td></td></tr><tr><td>DB-XLB 컬럼(60m x 0.25mm, 0.25미크론)</td><td>Agilent/ J& 승</td><td>122-1262</td><td></td></tr></tbody></table>

호수 송어에 pcb의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 (<em&gt; salvelinus namaycush</em&gt;) 먹이에서

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey

먹이에서 물고기를 먹는 물고기 폴리 염화 비 페닐 (PCB) 이성체의 순 영양 전달 효율 (γ)의 실험실 추정하는 기술은 여기에 설명되어 있습니다. 135 일 실험실 실험 동안, 우리는 팔 실험실 탱크에 보관 부풀어 오른 송어 (Salvelinus의 namaycush)에 미시간 호수에서 잡은했다 (Coregonus hoyi)를 공급. 부풀어 오른 호수 송어 자연 먹이입니다. 탱크 사에서, 비교적 높은 유속은 낮은 유속이 다른 네 개의 탱크에 사용 된 반면, 낮은 송어 활동을 허용, 송어 의해 비교적 높은 활성을 확인하는 데 사용 하였다. 탱크 탱크 별 기준으로, 실험 하루에 송어 먹게 음식의 양을 기록 하였다. 각 송어은 실험의 시작과 끝에서 칭량 하였다. 팔 각 탱크에서 4 구에 송어은 실험의 시작에서 희생하고, 각 탱크에 남아있는 모든 10 송어는 euthan 하였다이었다실험의 끝에 집중식. 우리의 실험 끝에 송어에서, 실험의 개시시 송어 75 PCB의 이성체의 농도를 측정하고, 실험에 bloaters 동안 송어로 공급. 이러한 측정에 기초하여, γ는 팔 각 탱크의 PCB (75)의 동족체들 각각에 대해 계산 하였다. γ 활성 및 비활성 호수 송어 75 PCB의 동족체 각각에 대해 계산되었다 의미한다. 실험 8 개의 탱크에 복제 되었기 때문에,에 대한 표준 오차는 γ 추정 할 수 의미한다. 이런 유형의 실험 결과는 환경 오염의 다양한 시나리오에 따라 오염 된 물고기를 먹는 인간과 야생 동물에 대한 미래의 위험을 예측하는 위험 평가 모델에 유용하다.

초기 호수 송어 최종 호수 송어는 무게가 853에서 1천5백66그램 (표 1)였다 의미하는 동안 무게가 694-907g 원거리 의미로 호수 송어, 실험 기간 동안 성장의 상당한 양을 보여 주었다. 135 일간의 실험 과정에서 호수 송어에 의해 소비되는 음식의 평균 금액은 641에서 2천6백49g였다. 평균 PCB 동종 농도가 원거리로 평균 PCB 동종 농도가 0.03에서 원거리 동안 호수 송어에서 PCB의 동족체 농도 평균은에 의해 29.31로 실험의 시작에 0.01에서 7.14 NG / g (습식 중량 기준)로, 실험 기간 동안 증가 실험 (표 2)의 결론. 9 월 적발 부풀어 오른의 10 복합 샘플에 걸쳐 평균 PCB의 동종 농도는 0.03에서 26.56 NG / g였다. 월 잡은 부풀어 오른의 10 복합 샘플에 걸쳐 평균 PCB의 동종 농도는 0.03에서 23.52 NG / g (표 2)였다. 참조실험에 사용 된 부풀어 오른에 대한...

먹이에서 물고기를 먹는 물고기 폴리 염화 비 페닐 (PCB) 이성체의 순 영양 전달 효율의 실험실 추정하는 기술이 제시된다. 필드로 실험 결과의 적용 가능성을 극대화하기 위해 물고기를 먹는 물고기는 일반적으로 현장에서 먹을 수 있습니다 먹이 물고기를 공급해야한다.

호수 송어에 PCB의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 (<em&gt; Salvelinus namaycush</em&gt;) 먹이에서

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from ...

다음 실험의 전반적인 목표는 먹이에서 호수 송어에 대한 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율을 추정한 다음 PCB 동족체의 염소화 정도 또는 지질 용해도 정도가 순 영양 전달 효율에 영향을 미치는지 확인하는 것입니다. 이는 먼저 호수 송어에게 최소 4개월 동안 블로(blo)와 같은 자연 식품을 먹이는 실험실 실험을 수행하여 달성됩니다. 두 번째 단계로, 추출 및 세척을 사용하여 호수, 송어 및 블로 조직에서 PCB를 추출하고 정량화 절차를 위한 추출물을 준비합니다.다음으로 음의 화학 이온화를 사용하는 가스 크로마토그래피 질량 분석법은 물고기 조직의 PCB 동족체 농도를 측정하기 위해 사용됩니다. 결과는 먹이에서 호수 송어에 대한 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율이 PCB 동족체의 염소화 정도에 크게 영향을 받지 않는다는 것을 보여줍니다. 결과는 또한 호수 송어 활동이 순 영양 전달 효율에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보인다는 것을 보여줍니다.오염 물질을 SIV 물고기에 직접 주입하거나 SIV 물고기의 먹이에 주입하는 것과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 SS 물고기가 자연 환경에서 야생 물고기의 오염 물질 축적 과정을 가장 잘 모방하는 방식으로 오염 물질을 축적한다는 것입니다. 이 방법을 시각적으로 시연하는 것은 농축 및 추출 단계를 올바르게 수행하기 위해 세심한 주의가 필요하기 때문에 매우 중요합니다. 이러한 단계는 시각적 관찰을 통해 가장 잘 배울 수 있습니다.이 절차를 시연하는 사람은 제 연구실의 화학자인 짐 오키프(Jim O'Keefe)입니다. 먼저 섭씨 30도의 마이너스 냉동고에 보관되어 있던 적절한 양의 먹이 물고기를 해동합니다. 해동된 먹이 물고기를 요리사 칼을 사용하여 약 1-5g 무게의 조각으로 자릅니다.그런 다음 각 탱크에 넣을 먹이 물고기의 양을 측정하고 조각을 각 탱크에 떨어뜨립니다. 포식자 물고기가 약 1시간 동안 먹이를 먹게 한 후 먹은 음식을 제거하고 약 20분 동안 자연 건조시킵니다. une 음식의 무게를 측정한 후 각 탱크에 넣은 음식의 양과 각 탱크에 대해 먹은 음식의 양을 기록합니다.포식자 물고기를 희생하고 얼린 후 해동을 위해 포식자, 물고기 및/또는 피식자 물고기 복합 재료 세트를 선택하고 적절한 크기의 균질화를 사용하여 복합 재료를 부분적으로 해동시킵니다. 각 복합 재료. 각 복합 재료에 대해 50-100g의 균질산 샘플을 세척, 아세톤, 헹굼 및 라벨링된 항아리에 넣습니다.항아리를 뚜껑을 씌운 후 추출을 위해 처리 할 때까지 섭씨 30 도의 영하에서 보관하십시오. 200밀리리터 비커에 해동된 균질화된 생선 조직 20g의 무게를 잰 다음 약 40g의 황산나트륨을 넣고 주걱으로 잘 섞습니다. CONGENERS 30, 61, 161 및 166을 포함하는 대리 스파이크 용액을 밀리리터당 20나노그램의 최종 농도로 추가합니다.발췌에서. 샘플을 실온에서 건조시키는 동안 혼합하십시오.ample가 마른 모래의 농도에 도달한 후 20분마다. 테프론 끓는 칩이 들어 있는 500ml 플라스크, 양말, sl 및 콘덴서가 있는 솔리 추출 장치를 설정합니다.그런 다음 말린 생선 혼합물을 굵고 프릿 디스크 바닥이 있는 유리 골무에 추가합니다. 샘플에 사용된 비커에 50%헥산과 50%클로로 메탄의 미리 혼합된 용액 150ml를 넣고 비커의 벽을 긁으면서 저어줍니다. 주걱을 사용하여 용매를 솔릿 상단으로 옮겨 솔릿을 통해 플라스크로 순환할 수 있도록 합니다.이전 단계를 반복한 후 부속 플라스크로 불을 붙인 양말을 발열체에 놓고 콘덴서를 장착합니다. 그런 다음 발열체를 켜서 용매를 부드럽게 끓입니다. 그런 다음 최소 16시간 동안 용매를 추출하여 응축기에 냉수가 공급되는지 확인합니다.용매가 냉각되면 샘플 플라스크에 물이 포함되어 있는지 확인하십시오. 물이 들어있는 플라스크의 경우 황산나트륨을 넣고 물이 흡수 될 때까지 휘젓습니다. 그런 다음 질소 샘플 농축기를 사용하여 샘플을 농축합니다.샘플의 부피가 2 밀리리터 미만인 경우, 샘플을 5 밀리리터 부피 플라스크로 옮깁니다. 그런 다음 5-7개의 헥산을 작게 세척하여 이전 유리 제품의 잔류 샘플을 부피 플라스크로 옮겨 최종 부피를 5ml로 가져옵니다. 이 시점에서 샘플을 10ml 바이알로 옮기고 샘플 정보로 라벨을 붙입니다.활성 실리카겔 100g에 진한 황산 44g을 첨가하여 산성화된 실리카겔을 준비합니다. 그런 다음 산성화된 실리카겔 10g을 바닥에 작은 유리솜 플러그가 들어 있는 작은 크로마토그래피 컬럼에 추가합니다. 10ml의 헥산으로 컬럼을 사전 세척한 후 샘플 추출물 1ml를 컬럼에 넣고 20ml의 헥산으로 컬럼을 용리화한 다음 테이퍼된 20ml 유리관에 샘플을 수집합니다.다음으로, 유리관을 질소 증발기 또는 NVAP 장치에 질소 흐름 아래에 놓고 뜨거운 물에 담그십시오. 샘플이 1 밀리리터 미만으로 농축되면 1 밀리리터 부피 플라스크로 옮깁니다. 그런 다음 헥산을 2-3회 작게 세척하여 잔류 시료를 튜브에서 부피 플라스크로 옮겨 최종 부피를 1ml로 만듭니다.그런 다음 샘플을 샘플 정보가 표시된 1.8ml 자동 샘플러 바이알로 옮깁니다. 적절한 내부 표준물질 4마이크로리터를 첨가하며, 이 경우 데카 클로로 회향을 바이알에 추가합니다. 적절한 표준을 사용하여 기기를 교정합니다.그런 다음 수소를 분당 1밀리리터의 운반 가스로, 메탄을 시약 가스로 사용하여 음의 화학 이온화 모드에서 크로마토그래피 질량 분석 시스템을 설정합니다. 0.25에서 DB XLB로 코팅된 용융 실리카 모세관 컬럼을 사용합니다. 분리를 위한 마이크로미터 필름 두께.분할 주입 모드를 사용하여 1-2마이크로리터의 시료를 주입합니다. 이 시점에서 탄소 13 표지 DECA 클로로 b 회향을 사용하여 내부 표준 방법으로 모든 표준물질과 샘플을 분석합니다. 두 번째 소스 표준물질과 화살표 Chlor 1242 및 1260을 실행하여 초기 보정을 수행한 다음 화살표 chlor 동족체에 대한 예측 값을 이 확인 절차에서 관찰된 양과 비교합니다.초기 보정 절차가 성공적으로 완료되면 모든 샘플의 분석을 완료합니다. 초기 보정의 보정 혼합물 중 하나를 사용하여 10개 샘플마다 보정 검사를 실행합니다. 트레 호수 송어는 초기 호수 송어로 상당한 성장을 보였습니다.평균 체중은 694g에서 907g 사이였으며 최종 호수 송어 평균 체중은 853g에서 1, 566g 사이였습니다. 호수 송어의 평균 PCB 동족체 농도는 모든 PCB 동족체에 대해 실험하는 동안 증가했습니다. 활동적인 호수 송어에 대한 평균 순 영양 전달 효율은 비활성 호수 송어와 크게 다르지 않았습니다.활동적인 호수 송어는 75개의 PCB 동족체 중 66개에 대해 비활성 호수 송어와 거의 동일한 효율로 섭취한 음식에서 PCB 동족체를 유지했습니다. 순 영양 전달 효율의 평균 추정치에 대한 표준 오차는 9개의 다른 PCB 동족체 중 6개에 대해 작았습니다. 순 영양 전달 효율의 평균 추정치에 대한 표준 오차는 염소화 정도가 순 영양 전달 효율의 추정치를 증가시켰기 때문에 상당히 낮았으며, 이는 순 영양 전달 효율의 추정치가 약간 감소한 것으로 나타났기 때문입니다.그러나, 순 영양 전달 효율은 PCB 동족체 AS log KOW의 염소화 정도가 증가함에 따라 크게 변하지 않았으며, 순 영양 전달 효율은 기하급수적으로 감소했다. 이 감소율은 0과 크게 다르지만 로그 KOW 단위당 7%와 같았습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 물고기에게 자연 식품을 먹이는 실험실 실험을 사용하여 먹이에서 물고기에 대한 CB 동족동물의 순 영양 전달 효율을 추정하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.헥산 및 디 클로로 메탄과 같은 유기 용제로 작업하는 것은 위험 할 수 있으므로이 절차를 수행 할 때 항상 적절한 환기와 같은 예방 조치를 취해야한다는 것을 잊지 마십시오.

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Research

연구

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Environment

환경

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여기에 제시된 것은 높은 정밀도와 분류학적 분해능으로 수생 약탈 진핵생물의 방목 속도를 정량화하는 단일 세포, epifluorescence 현미경 기반 기술에 대한 프로토콜입니다.

수생 생태계에서 유기 탄소 흐름의 새로운 경로를 밝히기 위해 추적자로 형광으로 분류 된 박테리아

이 프로토콜은 해수 및 생물학적 표본에서 지질의 결정을 위한 것입니다. 여과류의 지질은 고체의 경우 클로로폼 또는 클로로폼및 메탄올혼합물로 추출됩니다. 지질 클래스는 화염 이온화 감지와 막대 얇은 층 크로마토그래피에 의해 측정되고 그들의 합계는 총 지질 함량을 제공합니다.

해양 샘플의 총 지질 및 지질 수업 결정

학습하세요 호수 송어(Salvelinus namaycush)에서 PCB 동족체의 순 영양 전송 효율을 실험실에서 평가하는 방법을. 자연 먹이를 이용한 이 기법은 수생 생태계의 오염 물질 역학 이해에 기여합니다.

호수 송어에 PCB의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 (

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