호수 송어에 PCB의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 ( Salvelinus namaycush) 먹이에서

다음 실험의 전반적인 목표는 먹이에서 호수 송어에 대한 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율을 추정한 다음 PCB 동족체의 염소화 정도 또는 지질 용해도 정도가 순 영양 전달 효율에 영향을 미치는지 확인하는 것입니다. 이는 먼저 호수 송어에게 최소 4개월 동안 블로(blo)와 같은 자연 식품을 먹이는 실험실 실험을 수행하여 달성됩니다. 두 번째 단계로, 추출 및 세척을 사용하여 호수, 송어 및 블로 조직에서 PCB를 추출하고 정량화 절차를 위한 추출물을 준비합니다.

다음으로 음의 화학 이온화를 사용하는 가스 크로마토그래피 질량 분석법은 물고기 조직의 PCB 동족체 농도를 측정하기 위해 사용됩니다. 결과는 먹이에서 호수 송어에 대한 PCB 동족체의 순 영양 전달 효율이 PCB 동족체의 염소화 정도에 크게 영향을 받지 않는다는 것을 보여줍니다. 결과는 또한 호수 송어 활동이 순 영양 전달 효율에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보인다는 것을 보여줍니다.

오염 물질을 SIV 물고기에 직접 주입하거나 SIV 물고기의 먹이에 주입하는 것과 같은 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 SS 물고기가 자연 환경에서 야생 물고기의 오염 물질 축적 과정을 가장 잘 모방하는 방식으로 오염 물질을 축적한다는 것입니다. 이 방법을 시각적으로 시연하는 것은 농축 및 추출 단계를 올바르게 수행하기 위해 세심한 주의가 필요하기 때문에 매우 중요합니다. 이러한 단계는 시각적 관찰을 통해 가장 잘 배울 수 있습니다.

이 절차를 시연하는 사람은 제 연구실의 화학자인 짐 오키프(Jim O'Keefe)입니다. 먼저 섭씨 30도의 마이너스 냉동고에 보관되어 있던 적절한 양의 먹이 물고기를 해동합니다. 해동된 먹이 물고기를 요리사 칼을 사용하여 약 1-5g 무게의 조각으로 자릅니다.

그런 다음 각 탱크에 넣을 먹이 물고기의 양을 측정하고 조각을 각 탱크에 떨어뜨립니다. 포식자 물고기가 약 1시간 동안 먹이를 먹게 한 후 먹은 음식을 제거하고 약 20분 동안 자연 건조시킵니다. une 음식의 무게를 측정한 후 각 탱크에 넣은 음식의 양과 각 탱크에 대해 먹은 음식의 양을 기록합니다.

포식자 물고기를 희생하고 얼린 후 해동을 위해 포식자, 물고기 및/또는 피식자 물고기 복합 재료 세트를 선택하고 적절한 크기의 균질화를 사용하여 복합 재료를 부분적으로 해동시킵니다. 각 복합 재료. 각 복합 재료에 대해 50-100g의 균질산 샘플을 세척, 아세톤, 헹굼 및 라벨링된 항아리에 넣습니다.

항아리를 뚜껑을 씌운 후 추출을 위해 처리 할 때까지 섭씨 30 도의 영하에서 보관하십시오. 200밀리리터 비커에 해동된 균질화된 생선 조직 20g의 무게를 잰 다음 약 40g의 황산나트륨을 넣고 주걱으로 잘 섞습니다. CONGENERS 30, 61, 161 및 166을 포함하는 대리 스파이크 용액을 밀리리터당 20나노그램의 최종 농도로 추가합니다.

발췌에서. 샘플을 실온에서 건조시키는 동안 혼합하십시오.ample가 마른 모래의 농도에 도달한 후 20분마다. 테프론 끓는 칩이 들어 있는 500ml 플라스크, 양말, sl 및 콘덴서가 있는 솔리 추출 장치를 설정합니다.

그런 다음 말린 생선 혼합물을 굵고 프릿 디스크 바닥이 있는 유리 골무에 추가합니다. 샘플에 사용된 비커에 50%헥산과 50%클로로 메탄의 미리 혼합된 용액 150ml를 넣고 비커의 벽을 긁으면서 저어줍니다. 주걱을 사용하여 용매를 솔릿 상단으로 옮겨 솔릿을 통해 플라스크로 순환할 수 있도록 합니다.

이전 단계를 반복한 후 부속 플라스크로 불을 붙인 양말을 발열체에 놓고 콘덴서를 장착합니다. 그런 다음 발열체를 켜서 용매를 부드럽게 끓입니다. 그런 다음 최소 16시간 동안 용매를 추출하여 응축기에 냉수가 공급되는지 확인합니다.

용매가 냉각되면 샘플 플라스크에 물이 포함되어 있는지 확인하십시오. 물이 들어있는 플라스크의 경우 황산나트륨을 넣고 물이 흡수 될 때까지 휘젓습니다. 그런 다음 질소 샘플 농축기를 사용하여 샘플을 농축합니다.

샘플의 부피가 2 밀리리터 미만인 경우, 샘플을 5 밀리리터 부피 플라스크로 옮깁니다. 그런 다음 5-7개의 헥산을 작게 세척하여 이전 유리 제품의 잔류 샘플을 부피 플라스크로 옮겨 최종 부피를 5ml로 가져옵니다. 이 시점에서 샘플을 10ml 바이알로 옮기고 샘플 정보로 라벨을 붙입니다.

활성 실리카겔 100g에 진한 황산 44g을 첨가하여 산성화된 실리카겔을 준비합니다. 그런 다음 산성화된 실리카겔 10g을 바닥에 작은 유리솜 플러그가 들어 있는 작은 크로마토그래피 컬럼에 추가합니다. 10ml의 헥산으로 컬럼을 사전 세척한 후 샘플 추출물 1ml를 컬럼에 넣고 20ml의 헥산으로 컬럼을 용리화한 다음 테이퍼된 20ml 유리관에 샘플을 수집합니다.

다음으로, 유리관을 질소 증발기 또는 NVAP 장치에 질소 흐름 아래에 놓고 뜨거운 물에 담그십시오. 샘플이 1 밀리리터 미만으로 농축되면 1 밀리리터 부피 플라스크로 옮깁니다. 그런 다음 헥산을 2-3회 작게 세척하여 잔류 시료를 튜브에서 부피 플라스크로 옮겨 최종 부피를 1ml로 만듭니다.

그런 다음 샘플을 샘플 정보가 표시된 1.8ml 자동 샘플러 바이알로 옮깁니다. 적절한 내부 표준물질 4마이크로리터를 첨가하며, 이 경우 데카 클로로 회향을 바이알에 추가합니다. 적절한 표준을 사용하여 기기를 교정합니다.

그런 다음 수소를 분당 1밀리리터의 운반 가스로, 메탄을 시약 가스로 사용하여 음의 화학 이온화 모드에서 크로마토그래피 질량 분석 시스템을 설정합니다. 0.25에서 DB XLB로 코팅된 용융 실리카 모세관 컬럼을 사용합니다. 분리를 위한 마이크로미터 필름 두께.

분할 주입 모드를 사용하여 1-2마이크로리터의 시료를 주입합니다. 이 시점에서 탄소 13 표지 DECA 클로로 b 회향을 사용하여 내부 표준 방법으로 모든 표준물질과 샘플을 분석합니다. 두 번째 소스 표준물질과 화살표 Chlor 1242 및 1260을 실행하여 초기 보정을 수행한 다음 화살표 chlor 동족체에 대한 예측 값을 이 확인 절차에서 관찰된 양과 비교합니다.

초기 보정 절차가 성공적으로 완료되면 모든 샘플의 분석을 완료합니다. 초기 보정의 보정 혼합물 중 하나를 사용하여 10개 샘플마다 보정 검사를 실행합니다. 트레 호수 송어는 초기 호수 송어로 상당한 성장을 보였습니다.

평균 체중은 694g에서 907g 사이였으며 최종 호수 송어 평균 체중은 853g에서 1, 566g 사이였습니다. 호수 송어의 평균 PCB 동족체 농도는 모든 PCB 동족체에 대해 실험하는 동안 증가했습니다. 활동적인 호수 송어에 대한 평균 순 영양 전달 효율은 비활성 호수 송어와 크게 다르지 않았습니다.

활동적인 호수 송어는 75개의 PCB 동족체 중 66개에 대해 비활성 호수 송어와 거의 동일한 효율로 섭취한 음식에서 PCB 동족체를 유지했습니다. 순 영양 전달 효율의 평균 추정치에 대한 표준 오차는 9개의 다른 PCB 동족체 중 6개에 대해 작았습니다. 순 영양 전달 효율의 평균 추정치에 대한 표준 오차는 염소화 정도가 순 영양 전달 효율의 추정치를 증가시켰기 때문에 상당히 낮았으며, 이는 순 영양 전달 효율의 추정치가 약간 감소한 것으로 나타났기 때문입니다.

그러나, 순 영양 전달 효율은 PCB 동족체 AS log KOW의 염소화 정도가 증가함에 따라 크게 변하지 않았으며, 순 영양 전달 효율은 기하급수적으로 감소했다. 이 감소율은 0과 크게 다르지만 로그 KOW 단위당 7%와 같았습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 물고기에게 자연 식품을 먹이는 실험실 실험을 사용하여 먹이에서 물고기에 대한 CB 동족동물의 순 영양 전달 효율을 추정하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

헥산 및 디 클로로 메탄과 같은 유기 용제로 작업하는 것은 위험 할 수 있으므로이 절차를 수행 할 때 항상 적절한 환기와 같은 예방 조치를 취해야한다는 것을 잊지 마십시오.