Immortaliserede kræft cellelinjer kan dyrkes som 3D-cellekulturer, en værdifuld model for biologisk forskning. Denne protokol beskriver massespektrometri billeddannelse af 3D cellekulturer, herunder forbedringer i prøveforberedelse platform. Målet med denne protokol er at instruere brugerne at forberede 3D cellekulturer til massespektrometri billeddannelse analyse.