High-resolution Respirometry to Assess Mitochondrial Function in Permeabilized and Intact Cells

Siamak Djafarzadeh; Stephan M. Jakob

doi:10.3791/54985

JoVE Journal
Biology

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High-resolution Respirometry to Assess Mitochondrial Function in Permeabilized and Intact Cells

고해상도 호흡율은 투과성이 그대로 세포에서 미토콘드리아 기능을 평가하는

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08:33 min

February 8, 2017

DOI: 10.3791/54985-v

Siamak Djafarzadeh¹, Stephan M. Jakob¹

¹Department of Intensive Care Medicine, Inselspital, Bern University Hospital,University of Bern

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

고해상도 호흡율은 미토콘드리아의 산소 소비를 결정하는 데 사용된다. 이것은 미토콘드리아 호흡 사슬 복합체 '(I-IV) 호흡 속도, 최대 미토콘드리아 전자 전달계 용량 및 미토콘드리아 외막 무결성을 결정하기위한 간단한 기술이다.

이 절차의 전반적인 목표는 고해상도 호흡계를 사용하여 미토콘드리아 산소 소비량을 측정하는 것입니다. 이 방법은 다음과 같은 미토콘드리아 기능 장애와 관련된 증후군 및 질병의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 패혈증, 다양한 신경 질환 및 노화 관련 장애. 이 기술의 주요 장점은 더 높은 감도와 온전한 세포 또는 투과성 세포와 같은 소수의 생물학적 샘플을 사용한 결합 억제제 적정 실험에서 기질을 수행할 수 있는 능력을 가지고 있다는 것입니다.

절차를 시연하는 사람은 제 연구실의 기술자인 Sandra Nansoz가 맡을 것입니다. 절차를 시작하기 전에 폴라로그래픽 산소 센서를 공기 보정한 다음 호흡 완충액의 세포를 1밀리리터당 6번째 세포의 1배로 재현탁시키고 산소 그래프의 한 챔버에 있는 호흡 매체를 2.1ml의 세포 현탁액으로 교체합니다. 스토퍼로 챔버를 닫고 챔버의 자기 교반 막대를 분당 700회 회전으로 설정합니다.

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