Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation

Daniel Kai Long Tham; Hakima Moukhles

doi:10.3791/55974

Biotinylation을 사용하여 기본 Astrocyte 문화에서 단백질의 세포 표면 표현 및 Endocytic 속도를 결정

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Neuroscience

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Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation

Biotinylation을 사용하여 기본 Astrocyte 문화에서 단백질의 세포 표면 표현 및 Endocytic 속도를 결정

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10:42 min

July 3, 2017

DOI: 10.3791/55974-v

Daniel Kai Long Tham¹, Hakima Moukhles¹

¹Department of Cellular and Physiological Sciences,University of British Columbia

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

혈장 막에서 발현 된 단백질의 세포 표면 발현 및 endocytic 속도를 결정하기 위해 고안된 두 가지의 바이오 티 닐화 기반 방법이이 보고서에 제시되어있다.

이 비디오에서는 세포 표면 비오틴화(cell-surface biotinylation)와 펄스 추적 비오틴화(pulse-chase biotinylation)의 두 가지 방법을 제시합니다. 다음 시연에서는 성상교세포를 사용합니다. 이들은 뇌에서 가장 풍부한 신경교세포(glial cell) 유형이며, 관심 단백질인 아쿠아포린-4(Aquaporin-4)를 발현합니다.

이 논문에서 사용하는 방법은 다양한 세포 유형에 적용할 수 있으며, 여기에는 현탁 세포 또는 부착 세포가 포함될 수 있습니다. 이러한 기술은 비오틴이 접근할 수 있는 세포 외 도메인을 가지고 있는 한 거의 모든 막관통 단백질의 세포 표면 발현 및 내재화를 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 이 세포 표면 비오틴화(biotinylation) 분석의 전반적인 목표는 성상세포의 원형질막에서 수분 투과성 채널 Aquaporin-4의 발현에 대한 라미닌의 효과를 측정하는 것입니다.

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