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DOI: 10.3791/57374-v
Yu Okazawa1,2, Kosuke Mizukoshi1,2, Yu Koyama2,4, Shoki Okubo5, Hiromitsu Komiyama1, Yutaka Kojima1, Michitoshi Goto1, Sonoko Habu3, Okio Hino2, Kazuhiro Sakamoto1, Akira Orimo2
1Department of Coloproctological Surgery,Juntendo University Faculty of Medicine, 2Department of Molecular Pathogenesis,Juntendo University Faculty of Medicine, 3Atopy Research Center,Juntendo University Faculty of Medicine, 4Department of Oral Pathobiological Science and Surgery,Tokyo Dental College, 5Department of Gastroenterology,Juntendo University Faculty of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
있도록 매우 민감한 탐지 목표 인간의 대 장 암 (CRC) 세포 조직 정착, 우리 여기 PDX 파생 CRC organoid 셀에 녹색 형광 단백질 (GFP) lentiviral 입자의 효율적인 변환에 대 한 프로토콜을 표시 스테레오-형광 현미경 관찰 받는 쥐로 그들의 주입에의 사전
이 방법은 대장암 환자에서 발견되는 미세전이에 대한 종양 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 마우스에서 GFP 표지, 환자 유래 대장암 오가노이드에 의해 유도된 미세 전이를 통해 매우 민감하게 검출할 수 있다는 것입니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 생쥐의 먼 장기에서 대장 종양 또는 오가노이드 유래 미세 전이를 감지하기 어려울 수 있기 때문에 어려움을 겪을 것입니다.
Yu Okazawa와 함께 시술을 시연하는 사람은 Kosuke Mizukoshi와 Yu Koyama로, 둘 다 우리 그룹의 박사 과정 학생이자 외과 의사입니다. 인간 결장직장암 세포 오가노이드를 생성하려면 먼저 웰당 150마이크로리터의 인공 세포외 기질을 얼음 위의 12웰 플레이트에 추가합니다. 모든 웰이 코팅되면 섭씨 37도의 5% CO2 인큐베이터에서 30-60분 동안 플레이트를 배양하여 겔을 응고시킵니다.
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