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多量ホモ測定器と無料、フリー、オープン ソースの明るさ解析ソフトウェアを使用しての体外校正無料定量化
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JoVE 신문 생화학
Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software
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多量ホモ測定器と無料、フリー、オープン ソースの明るさ解析ソフトウェアを使用しての体外校正無料定量化

DOI:
10.3791/58157-v

•

08:22 min

•

July 17, 2018

•

, , , , ,
1Cellular Imaging Group, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 2Division of Structural Biology, Wellcome Centre Human Genetics,University of Oxford, 3Dynamic Structural Virology Group,Biocruces Health Research Centre, 4IKERBASQUE,Basque Foundation for Science

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:50FKBP12F36V-mVenus Purification
  • 03:24Preparation of Multiwell Plate Array
  • 04:19Calibration-free Confocal Acquisition
  • 06:26Results: FKBP12 Dimerizes upon Addition of BB Dimerizer Drug
  • 07:23Conclusion

Summary

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このプロトコルでは、蛋白質ホモ重合体外に基づく商業光走査顕微鏡を用いた蛍光揺らぎを定量化するための校正無料のアプローチについて説明します。正しい取得の設定と解析方法が表示されます。

Tags

Protein Homo-oligomerizationIn Vitro QuantificationCalibration-freeConfocal MicroscopyBrightness AnalysisProtein-protein InteractionsDrug ScreeningCancer DrugsSmall-molecule InhibitorsFusion InhibitorsProtein DynamicsCell-cell InteractionsFKBP12His6 TagMVenus TagIMACSize-exclusion Chromatography

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