Name: 합성과 기능화, Oligonucleotide 배달에 대 한 Fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 특성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-16T14:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: 배우세요 융합성 다공성 실리콘 나노입자를 합성하고 기능화하여 oligonucleotide를 효율적으로 전달하는 방법. 이 기술은 siRNA 기반 유전자 침묵 및 염증 조절 치료에 활용됩니다.

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이 작품을 통해 건강의 국가 학회에 의해 지원 됩니다 # R01 AI132413-01 계약.

1. 다공성 실리콘 나노 입자 (pSINPs)의 합성
주의: 화 수 소산 (HF)을 작업할 때는 항상 주의 사용 합니다. 그것의 안전 데이터 시트 (SDS) 모든 안전 지침을 따르십시오, 연기 후드, HF 포함 된 화학 물질을 처리 하 고 적절 한 개인 보호 장비 (PPE, 외부에 부 틸 장갑 이중 장갑, 랩 코트 밑, 얼굴 부 틸 앞치마를 착용 아래 안전 고글 방패). 모든 대학 및 R & D 연구소 HF 안전 사용 이전에 특정 교육이 필요합니다. 여기에 설명 되지 않은 추가적인 안전 대책도 필요으로 로컬 실험실 안전 조정자의 사전 승인 없이 HF를 사용 하지 마십시오.
<ol><li>
에칭 솔루션의 준비
	<ol>
<li>3:1 HF에 대 한 솔루션 에칭 (단계 1.3과 1.4에서 사용), 플라스틱을 채우기 있도록 수성 48 %HF 30 mL와 10 mL 절대 에탄올 (EtOH)의 실린더를 졸업 했다. 솔루션으로는 HF 유리를 녹이 고 고밀도 플라스틱 (예: 고밀도 폴 리 에틸렌)에 포함 되어야 합니다.</li>
		<li>1시 29분을 이륙 (1.5에서 사용된 단계), 플라스틱을 채우기 위한 HF 솔루션 1 mL의 수성 48 %HF 절대 에탄올의 29 mL와 실린더를 졸업 했다. 솔루션으로는 HF 유리를 녹이 고 고밀도 플라스틱 (예: 고밀도 폴 리 에틸렌)에 포함 되어야 합니다.</li>
		<li>10%에서 1 M 코 솔루션 만들기 EtOH 초과 pSi 해산 (단계 1.3과 1.5에서 사용).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Etch 셀 설정
	<ol>
<li>테 플 론에서 8.6 cm 셀 엣지2 잘 엣지 (지역 o-링, 내 에칭 하 고 A에 의해 영역을 계산 하는 데 사용할 수 있는 실리콘 표면의 직경을 측정 하 여 계산 = πr2), 내림차순 (그림 2a)에: (1)는 테 플 론 셀 가기; (2) 링; (3) 단 결정의 4 분의 1 조각 (1 0 0)-지향적인 p + +-유형 실리콘 웨이퍼 (다이아몬드 커터를 사용 하 여); 내 무 반으로 잘라 (4) 알루미늄 호 일; (5) 테 플 론 셀 베이스 나사를 부드럽게 누설을 방지 하기 위해 강화.</li>
		<li>EtOH에 잘 채워. 닦 고 테 플 론 셀 상단과 기지 사이 틈새에 삽입. 제거 시 건조 닦아 이면 엣지 셀 밀봉 된다. 젖은, 셀 누출 되 고 강화 하는 경우 나사 밀봉 될 때까지 더.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
실리콘 웨이퍼 연마
	<ol>
<li>증기 두건으로 조립된 etch 셀을 가져.</li>
		<li>3:1 HF 용액 10 mL에 잘 채워.</li>
		<li>Etch 셀에서 긍정적인 리드를 알루미늄 호 일 (전극)에 연결할 연결 부정적인 리드 백 금 코일 (카운터 전극) 회로 (그림 2b)를 완료 하는 etch 셀의 3:1 HF 용액에 몰입 하 고.</li>
		<li>정 전류 50 mA cm-2 60에서 실행 s. 일단 엣지 완료 되 면, 회로에서 셀을 제거 하 고 3:1 HF 주사기를 사용 하 여 신중 하 게 밖으로 헹 굴. 세 번 EtOH 린스 합니다.</li>
		<li>잘 작성 하 여 에칭된 레이어를 멀리 해산 1 M 코의 10 mL를 천천히. 버블링가 라 앉 다 때까지 기다립니다.</li>
		<li>물을 세 번, 그리고 EtOH 3 번 코를 씻어.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
실리콘 웨이퍼에 다공성 층을 화학적 에칭
	<ol>
<li>사각 파형의 교류 전류 50 mA/cm2 0.6 s의 낮은 current density와 400 mA/cm2 0.36의 높은 전류 밀도 실행 s 500 사이클 반복.</li>
		<li>일단 엣지 완료 되 면, 회로에서 셀을 제거 하 고 3:1 HF 주사기를 사용 하 여 신중 하 게 밖으로 헹 굴. 세 번 EtOH 린스 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
해제-실리콘 웨이퍼에서 다공성 계층에서
	<ol>
<li>1시 29분의 10 mL 잘 채워 HF 솔루션.</li>
		<li>3.7 mA/cm2 250의 상수 실행 s. 일단 엣지 완료 되 면, 회로에서 셀을 제거. PSi 레이어 표시 파문 나타내는 결정 실리콘 웨이퍼에서 분리를 할 수 있습니다. 부드럽게 HF 솔루션 1시 29분에 밖으로 세척 하 고 EtOH 3 번, 그 후에 세 번 물으로 씻어.</li>
		<li>완전 한 분리에 대 한 pSi 계층의 둘레를 균열 단단히 피 펫 팁을 사용 하 여. EtOH를 사용 하 여 수집 된 테 플 론에서 pSi 조각 (칩) 에칭 셀 무게 보트로. 유리 제 작은 유리병에 칩을 전송. PSi 칩 저장을 위해 6 개월 이상 EtOH에 실내 온도에 보관 수 있습니다.</li>
		<li>잘 작성 하 여 모든 나머지 다공성 실리콘 웨이퍼에 멀리 분해 1 M 코의 10 mL를 천천히. 버블링가 라 앉 다 때까지 기다립니다.</li>
		<li>물을 세 번, 그리고 EtOH 3 번 코를 씻어.</li>
		<li>1.3-1.5 단계를 반복 하 여 전체 웨이퍼 두께 에칭.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Sonicating 다공성 층 나노 입자 형성에 대 한
	<ol>
<li>디 물 2 ml EtOH에서 pSi 칩이 포함 된 유리 유리병의 용 매를 교체 합니다.</li>
		<li>단단히 뚜껑을 닫고 parafilm를 사용 하 여 밀봉.</li>
		<li>유리 sonicator 목욕에서 유리병 및 중단 pSi 칩의 볼륨은 표면 아래에 완전히 빠져들 것 같은 장소.</li>
		<li>12 h 35 kHz 및 RF 전력 48W의 sonicate. 쥡니다 동안 중요 한 물 손실 방지, 플라스 크의 여 물 목욕의 표면 접촉 되도록 반전 물으로 채워진 부피 플라스 크를 배치 합니다.</li>
		<li>유리 약 병을 1 h 더 큰 입자는 아래쪽에 정착를 허용 하기 위해 평평한 표면에 놓습니다. 상쾌한 피 펫;를 사용 하 여 수집 정지에는 하위-100 nm pSiNPs를 포함 되어 있습니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2입니다. fusogenic 지질 필름 준비
<ol><li>
지질 재고 솔루션의 준비
	<ol>
<li>증기 두건에서 DMPC, DSPE-말뚝-말 및 클로 프롬에 DOTAP 지질 수 화에 의해 지질 10 mg/mL 주식을 확인 합니다. 이러한 재고 솔루션 꽉 parafilm 물개에서 최대 6 개월 동안-20 ° C에 보관 수 있습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Fusogenic 지질 필름 만들기 참고: fusogenic 구성이 이루어집니다 지질, DMPC, DSPE-말뚝, 및 DOTAP, 76.2:3.8:20 및 96.2:3.8:0의 어 금 니 비율에서 각각.<ol>
<li>유리 병, DMPC, DSPE-말뚝의 15.16 μ 및 DOTAP의 19.63 μ 72.55 μ pipetting으로 혼합.</li>
		<li>선택 사항: 형광 라벨 지질 코팅, 또한 추가 DiI의 20 µ L 1 mg/mL의 농도에 EtOH에 녹아.</li>
		<li>하룻밤 증발을 클로 프롬 있도록 느슨한 모자와 함께 증기 두건에서 유리병을 놓습니다. 건조 필름 유리병의 하단에 흐린 하드 젤 같은 물질을 될 것입니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 로드 하 고 pSiNPs에 siRNA의 씰링
<ol><li>
재고를 로드 하는 염화 칼슘의 준비
	<ol>
<li>1.11 g CaCl의 분해2 M CaCl2 솔루션 RNAse 무료 물 10 mL에2 .</li>
		<li>> 10, 000에서 솔루션 원심 집계를 정착 하는 피 펫을 사용 하 여 상쾌한 수집 1 분 동안 g x. 또는, 0.22 μ m 필터를 통해 솔루션을 필터링 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
재고를 로드 하는 siRNA의 준비
	<ol>
<li>수 화 또는 RNAse 무료 물에서 150 µ m siRNA를 희석. 이 재고 솔루션 aliquoted 수 있으며 자주 freeze-thaw 주기를 받아야 하지 않습니다는 적어도 30 일 동안-20 ° C에서 냉동 보관.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
염화 칼슘과 pSiNPs에 siRNA를 로드
	<ol>
<li>아이스 쥡니다 목욕을 준비 합니다.</li>
		<li>15 분 ultrasonication, siRNA의 부드럽게 피 펫 150 µ L 및 pSiNP의 150 µ L에 2 M CaCl2 의 700 µ L. 가스 생성을 위한 microcentrifuge 튜브의 뚜껑을 열어두고 해야 합니다.</li>
		<li>포함 하는 sonicator에서 siRNA 로드 칼슘 코팅 pSiNPs의 1 mL 튜브를 제거 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. 코팅 fusogenic 지질와 siRNA 로드 pSiNPs
<ol><li>
Liposome 압출 장비의 준비
	<ol>
<li>디 물으로 넓은 비 커를 채우십시오. 담가 1 폴 리카 보 네이트 막 (200 nm 모 공), 그리고 물 표면에 떠 여 4 필터 지원 제조업체의 지침에 따라 liposome 압출 키트 조립</li>
	</ol>
</li>
	<li>
SiRNA 로드 pSiNps와 함께 지질 영화 하이드레이팅
	<ol>
<li>3.3.3 단계에서 얻은 siRNA 로드 칼슘 코팅 pSiNPs의의 1 mL와 함께 유리 유리병에 말린된 지질 영화 하이드 레이트. 플라스틱 모든 지질 영화 유리병의 바닥에서 고 흐린 동종 솔루션으로 혼합 때까지.</li>
		<li>유리 병에 자석 교 반 막대를 배치 하 고 40 ° C (또는 높은 만큼 더 유체 액체 크리스탈 단계에 지질을 유지 하기 위해 지질 위상 변환 온도 이상) 입자가 열 하는 뜨거운 접시에 유리병을 배치 하면서 자석으로 20 분에 대 한 솔루션을 감동.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
돌출 크기 제어에 대 한 지질 코팅 pSiNPs
	<ol>
<li>압출 주사기에 지질 코팅 pSiNP-siRNA 솔루션의 1 mL 발음 압출 기의 1 개의 측에 빈 주사기와 다른 쪽 끝에 채워진된 주사기를 삽입 합니다.</li>
		<li>천천히 한 주사기, 폴 리카 보 네이트 막 통해 그리고 다른로에서 입자를 추진 하는 피스톤 밀고 하 여 압출을 시작 합니다. 20 회 반복 한다. 피스톤 붙어있다 면 필터와 멤브레인 막힌 될 수 있습니다. 압출 기를 분해 하 고 멤브레인 및 필터 지원 교체. 문제가 지속 되 면, 관리는 막힘 때까지 입자를 희석.</li>
		<li>Microcentrifuge 관으로 밀어낸된 입자를 수집 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5입니다. 펩 티 드를 타겟팅의 활용
<ol><li>
대상 펩타이드 지질 코팅을 변화
	<ol>
<li>1 mg/mL와 펩 티 드 주식 RNAse 무료 물에 펩 티 드 농도 준비 합니다.</li>
		<li>Fusogenic를 포함 하는 microcentrifuge 관에서 지질 코팅 pSiNPs, 부드럽게 1 mg/mL의 펩 티 드 사진 및 피펫으로 100 µ L를 추가 합니다. 튜브 20 분 (또는 > 2 h 4 ° C에서)에 대 한 실 온에서 정적 유지.</li>
		<li>초과 펩 티 드 또는 siRNA와 다른 소를 제거 하려면 1 h. 동일한 설정에서 PBS의 1 mL와 함께 두 번 더 원심 분리기 25 ° C에서 5000 x g 에서 회전 하 여 30 kDa 원심 필터에 세척.</li>
		<li>원하는 농도에서 PBS에 마지막 펩 티 드 활용 fusogenic 지질 코팅 pSiNPs를 resuspend. 입자 지금 aliquoted 및 적어도 30 일 저장을 위한-80 ° C에서 냉동 수 있습니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Ryther, R. C. C., Flynt, A. S., Phillips Iii, J. A., Patton, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((siRNA+therapeutics%3A+big+potential+from+small+RNAs%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">siRNA therapeutics: big potential from small RNAs.</a> Gene Therapy. 12, 5(2004).</li>
<li>Scherman, D., Rousseau, A., Bigey, P., Escriou, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+pharmacology%3A+progresses+in+siRNA+delivery+and+therapeutic+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">Genetic pharmacology: progresses in siRNA delivery and therapeutic applications.</a> Gene Therapy. 24, 151(2017).</li>
<li>Broderick, J. A., Zamore, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">MicroRNA therapeutics.</a> Gene Therapy. 18, 1104(2011).</li>
<li>Geisler, A., Fechner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-regulated+viral+vectors+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-regulated viral vectors for gene therapy.</a> World Journal of Experimental Medicine. 6 (2), 37-54 (2016).</li>
<li>Williams, P. D., Kingston, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasmid-mediated+gene+therapy+for+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Plasmid-mediated gene therapy for cardiovascular disease.</a> Cardiovascular Research. 91 (4), 565-576 (2011).</li>
<li>Ferreira, G. N. M., Monteiro, G. A., Prazeres, D. M. F., Cabral, J. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downstream+processing+of+plasmid+DNA+for+gene+therapy+and+DNA+vaccine+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Downstream processing of plasmid DNA for gene therapy and DNA vaccine applications.</a> Trends in Biotechnology. 18 (9), 380-388 (2000).</li>
<li>Shim, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+gene+editing%3A+delivery+and+regulatory+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmacologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Therapeutic gene editing: delivery and regulatory perspectives.</a> Acta Pharmacologica Sinica. 38, 738(2017).</li>
<li>Carlson, D. F., Fahrenkrug, S. C., Hackett, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+DNA+With+Fingers+and+TALENs%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+-+Nucleic+Acids%22%5BJournal%5D)">Targeting DNA With Fingers and TALENs.</a> Molecular Therapy - Nucleic Acids. 1, (2012).</li>
<li>Dai, W. -J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR-Cas9+for+in+vivo+Gene+Therapy%3A+Promise+and+Hurdles%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+-+Nucleic+Acids%22%5BJournal%5D)">CRISPR-Cas9 for in vivo Gene Therapy: Promise and Hurdles.</a> Molecular Therapy - Nucleic Acids. 5, e349(2016).</li>
<li>Adli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CRISPR+tool+kit+for+genome+editing+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">The CRISPR tool kit for genome editing and beyond.</a> Nature Communications. 9 (1), 1911(2018).</li>
<li>Houseley, J., Tollervey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Many+Pathways+of+RNA+Degradation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The Many Pathways of RNA Degradation.</a> Cell. 136 (4), 763-776 (2009).</li>
<li>Sahay, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficiency+of+siRNA+delivery+by+lipid+nanoparticles+is+limited+by+endocytic+recycling%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Efficiency of siRNA delivery by lipid nanoparticles is limited by endocytic recycling.</a> Nature Biotechnology. 31 (7), 653-658 (2013).</li>
<li>Wang, Y., Huang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+window+onto+siRNA+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">A window onto siRNA delivery.</a> Nature Biotechnology. 31 (7), 611-612 (2013).</li>
<li>Gilleron, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-based+analysis+of+lipid+nanoparticle-mediated+siRNA+delivery%2C+intracellular+trafficking+and+endosomal+escape%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Image-based analysis of lipid nanoparticle-mediated siRNA delivery, intracellular trafficking and endosomal escape.</a> Nature Biotechnology. 31 (7), 638-646 (2013).</li>
<li>Kim, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunogene+therapy+with+fusogenic+nanoparticles+modulates+macrophage+response+to+Staphylococcus+aureus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Immunogene therapy with fusogenic nanoparticles modulates macrophage response to Staphylococcus aureus.</a> Nature Communications. 9 (1), 1969(2018).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+Disruption+of+G%3Csub%3E0%3C%2Fsub%3E%2FG%3Csub%3E1%3C%2Fsub%3E+Switch+Gene+2+Enhances+Adipose+Lipolysis%2C+Alters+Hepatic+Energy+Balance%2C+and+Alleviates+High-Fat+Diet%E2%80%93Induced+Liver+Steatosis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Targeted Disruption of G0/G1 Switch Gene 2 Enhances Adipose Lipolysis, Alters Hepatic Energy Balance, and Alleviates High-Fat Diet–Induced Liver Steatosis.</a> Diabetes. 63 (3), 934-946 (2014).</li>
<li>Schlosser, K., Taha, M., Deng, Y., Stewart, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+delivery+of+MicroRNA+mimics+with+polyethylenimine+elevates+pulmonary+microRNA+levels%2C+but+lacks+pulmonary+selectivity%5BTitle%5D)+AND+%22Pulmonary+Circulation%22%5BJournal%5D)">Systemic delivery of MicroRNA mimics with polyethylenimine elevates pulmonary microRNA levels, but lacks pulmonary selectivity.</a> Pulmonary Circulation. 8 (1), 2045893217750613(2018).</li>
<li>Komarov, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+genetics-directed+identification+of+novel+pharmacological+inhibitors+of+FAS-+and+TNF-dependent+apoptosis+that+protect+mice+from+acute+liver+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Functional genetics-directed identification of novel pharmacological inhibitors of FAS- and TNF-dependent apoptosis that protect mice from acute liver failure.</a> Cell Death & Disease. 7, e2145(2016).</li>
</ol>

MJS는 스피너 커 생물 과학, Inc.의 과학 설립자 이며 회사에 주식 관심 있습니다.  이 프로젝트와 스피너 커 생물 과학, Inc.에 그것의 잠재적인 혜택의 전체 범위에 따라 상충 관리에 대 한 발견 되었습니다 있지만이 특정 게시에 포함 된 연구 결과 반드시 수 없습니다. 큰 삼각 돛 생물 과학, i n c.의 관심사와 관련 이 계약의 용어를 검토 하 고, 이해 충돌 정책에 따라 샌디에고가 주 대학에 의해 승인 되었습니다. 다른 사용 없다 공개 수 있습니다.

다공성 실리콘 나노 입자의 합성은 그림 5에 표시 됩니다. 로딩 단계 (3 단계)에서 fusogenic pSiNPs의 합성에 중요 한 단계가입니다. Fusogenic 나노 입자는 집계 하는 경우 후 합성 (그림 3), 이유는 다음과 같은 원인일 수 있습니다: (1) 염화 칼슘 주식 homogenously 준비 되지 않았습니다, 따라서 단계 3.1.2 신중 하 게 따라 하거나 해야 세련 된; (2) 또는 pSiNP의 비율: siRNA: CaCl2 또는 하나 이상의 세 가지 구성 요소 농도 최적화 되지 않을 수 있습니다. 다시 최적화 CaCl2 농도에서 출발이 좋습니다 (예를 들어, 1m 또는 3m 2 M에서에서 변경). 또한, 그것은 우리가 발견 하는 다른 공급 업체에서 동일한 화학 로드 단계, 그리고는 siRNA 로드 후속 실패에 더 낮은 pH 귀착되 CaCl2 동...

유전자 치료는 치료 결과 얻기 위해 특정 유전자 발현을 조절 한다. 유전자 변조에 대 한 수많은 도구 발견 되었고 ribonucleic 산 간섭 (RNAi) oligonucleotides (예를 들어, 짧은 간섭 RNA (siRNA)1,2, 예측에 관한 (미르)3,4 사용 하 여 포함 하 여 공부 ), DNA 플라스 미드5,6, nucleases (예, 아연 손가락, TALENS)8,7,및 CRISPR/Cas9 시스템9,10. 작업의 각 도구의 메커니즘 다릅니다, 하는 동안 모든 도구 셀의 세포질 또는 활성 핵을 도달 해야 합니다. 따라서, 이러한 도구 유도 생체 외에서 유전자 발현 조절에 중요 한 영향을 입증 했다, 하는 동안 생체 조건 효 험 extracellular와 세포 장애물에서 겪고 있다. 사실은 도구는 생물학 근원의 이다, 많은 효소 및 허가 시스템 저하 또는 외국 분자11제거 능력을가지고 우리 몸에 존재 합니다. 경우에도 그들은 endocytosis;에서 고통 받는 도구에 도달 목표 셀 캡슐화 하 고 산 성 위 같은 vesicles 저하 또는 셀에서 도구를 추방 하는에서 도구를 트랩 세포질 통풍 관의 모드입니다. 실제로, 연구는 지질 나노 입자는 약 70%는 siRNA의 통풍 관12,13의 24 시간 이내 셀에서 exocytosed는 macropinocytosis 통해 endocytosed 나타났습니다. 나머지 siRNA의 대다수는 lysosomal 통로가 통해 타락 및 궁극적으로 처음가 나노 입자와 셀 siRNA의 유일한 1-2% 달성 잠재적으로 RNAi13,14 endosomal 이스케이프 .
최근 fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자 (F pSiNPs) 다공성 실리콘 나노 입자와 fusogenic 지질 셸15의 구성 하는 siRNA 로드 코어를 개발 했습니다. 세 가지 주요 이점을 다른 기존의 oligonucleotide 전달 시스템을 제시 하는 F-pSiNPs: (1) fusogenic 지질 endocytosis를 무시 하 고 (1-2% 대 세포 세포질에 직접 전체 페이로드를 전달 하는 입자를 가능 하 게 코팅 endocytosed 입자13,14달성) (그림 1); (2) 높은 대량 로드는 pSiNPs에 siRNA의 (> 20 wt % 기존의 시스템에 의해 1-15 wt %에 비해)15, 급속 하 게 타락 세포질에 (일단 코어 입자 fusogenic 통풍 관을 통해 지질 코팅 창 고) 출시 siRNA; (3) 세포 유형 vivo에서 원하는 대상에 선택적 추적에 대 한 펩 티 드 활용.
F-pSiNP 시스템 효능 입을 중요 한 유전자를 시연 하고있다 (> 95% 생체 외에서; > 80 %vivo에서) 및 S. 구 균 폐 렴;의 치명적인 마우스 모델에서 후속 치료 효과 결과 출판 이전15. 그러나, F-pSiNP 시스템의 복잡 한 구조는 섬세 한 처리 및 생성 하는 균일 하 고 안정 된 나노 입자를 미세 조정된 최적화 필요 합니다. 따라서,이 작품의 목적은 철저 한 프로토콜 합성과 기능화, 같은 강력한 유전자 입을 효과 siRNAs의 대상된 배달에 사용 될 F-pSiNPs의 특성에 대 한 최적화 전략 제시 하는 것 이다.

<table><tbody><tr><td>1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DMPC)</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>850345P</td><td>분말</td></tr><tr><td>1,2-dioleoyl-3-trimethylammonium-propane (chloride salt) (DOTAP)</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>890890P</td><td>Powder</td></tr><tr><td>1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[maleimide(polyethylene glycol)-2000] (ammonium salt) (DSPE-PEG(2000) maleimide)</td><td>Avanti polar Lipids</td><td>880126P</td><td>분말</td></tr><tr><td>알루미늄 호일</td><td>VWR International, LLC</td><td>12175-001</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘 (CaCl2)</td><td>Spectrum</td><td>C1977</td><td>무수, 펠렛</td></tr><tr><td>클로로포름</td><td>Fisher Scientific</td><td>C6061</td><td></td></tr><tr><td>컴퓨터</td><td>Dell</td><td>Dimension 9200</td><td>PCI 카드 슬롯이 있는 모든 컴퓨터 허용</td></tr><tr><td>딜 염색 (1,1'- 디옥타 데실 -3,3,3', 3'- 테트라 메틸 인도 카르 보시아닌 과염소산 염 ( 'DiI'; DiIC18(3)))Life</td> <td>Technologies</td><td>D3911</td><td></td></tr><tr><td>에탄올 (EtOH)</td><td>UCSD Store</td><td>111</td><td>200 Proof</td></tr><tr><td>Hydrofluric acid (HF)</td><td>VWR International, LLC</td><td>MK264008&nbsp;</td><td>순도 : 48 %</td></tr><tr><td>Keithley 2651a Sourcemeter</td><td>Keithley</td><td>2651A</td><td></td></tr><tr><td>LabVIEW</td><td>National Instruments</td><td></td><td>샘플 프로그램 사용 위치: http://sailorgroup.ucsd.edu/sofware/</td></tr> <tr><td>LysoTracker Green DND-26</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L7526</td><td></td></tr><tr><td>리포좀 압출 세트(가열 블록 포함</td>) <td>Avanti Polar Lipids</td><td>610000</td><td></td></tr><tr><td>Microcon-30kDa 원심분리기 필터 유닛</td><td>EMD Millipore</td><td>MRCF0R030</td><td></td></tr><tr><td>O-ring</td><td>ChemGlass</td><td>CG-305-220</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010-049</td><td></td></tr><tr><td>플래티넘 코일</td><td>VWR International, LLC</td><td>AA10285-BU</td><td></td></tr><tr><td>수산화칼륨(KOH)</td><td>Fisher Scientific</td><td>P250-3</td><td></td></tr><tr><td>실리콘 웨이퍼</td><td>Siltronix</td><td>맞춤 주문</td><td></td></tr><tr><td>siRNA</td><td>Dharmacon</td><td>맞춤 주문</td><td>IRF5, 감지 5'-dTdT-CUG CAG AGA AUA ACC CUG A-dTdT-3' 및 안티센스 5'-dTdT UCA GGG UUA UUC UCU GCA G dTdT-3'</td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>VWR International, LLC</td><td>97043-960</td><td></td></tr><tr><td>표적 펩타이드 (CRV)</td> <td>CPC Scientific</td><td>맞춤형 주문</td><td>시퀀스 CRVLRSGSC; 두 개의 시스테인 잔기의 측쇄 사이의 이황화 결합에 의해 고리 형성</td></tr><tr><td>테프론 에칭 셀</td><td>Interface Performance Materials, Inc.</td><td>맞춤 주문</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure DNase/RNase-Free 증류수&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10977015</td><td></td></tr></tbody></table>

합성과 기능화, oligonucleotide 배달에 대 한 fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 특성

Synthesis, Functionalization, and Characterization of Fusogenic Porous Silicon Nanoparticles for Oligonucleotide Delivery

유전자 치료의 도래와 함께 효과적인 vivo에서 뉴클레오티드-페이로드 전달 시스템의 개발의 병행 수입 되고있다. Fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자 (F-pSiNPs)은 최근 높은 생체 조건 유전자 침묵 때문에 용량과 endocytosis를 방지 하는 독특한 세포 통풍 관 통로 로드 하는 높은 oligonucleotide 효능 설명 했다. F-pSiNPs의 합성은 포함 하는 다단계 프로세스: (1) 로드 및 실리콘 모;에서 oligonucleotide 페이로드 씰링 (2) 동시 코팅 및 다공성 실리콘 코어; 주위 fusogenic 지질의 크기 조정 그리고 펩 티 드를 지정 하 고 초과 oligonucleotide, 실리콘 파편, 및 펩 티 드를 제거 하는 세척의 (3) 활용. 그리고 동적 산란, 입자의 크기가 균일 특징 이다 전송 전자 현미경 검사 법에 의해 그것의 코어-쉘 구조를 확인할 수 있습니다. Fusogenic 이해는 질 성 로드 하 여 유효성을 검사할 염색, 1, 1'-dioctadecyl-3, 3, 3', 3'-tetramethylindocarbocyanine 과염소산염 (DiI), fusogenic 지질 bilayer에 고 대 얼룩 원형질 막에 대 한 관찰을 생체 외에서 세포 치료 endocytic 있어입니다. 대상 및 생체 조건 유전자 입을 신진대사 이전 대상 펩 티 드 F-pSiNPs의 가정 감염의 사이트에 도움 것으로 예상 된다 황색 포도상구균 폐 렴의 마우스 모델에서 정량 했다. S. 구 균 감염에의 응용, 넘어 F-pSiNP 시스템 바이러스 감염, 암, 자가 면역 질환 등 질병의 광범위의 유전자 치료에 대 한 어떤 oligonucleotide를 전달 하기 위해 사용할 수 있습니다.

Fusogenic pSiNPs의 성공적인 합성 균질 성, 약간 불투명 한 솔루션 (그림 3a)를 생산 한다. 실패 비율 및 pSiNPs의 농도 최적화: siRNA: CaCl2 (그림 3b) 로딩 시 집계 될 수 있습니다. 입자는 200 nm 세포 막을 통해 돌출 되어, DL로 측정 하는 fusogenic pSiNPs의 평균 유체역학 직경 해야한다 약 200 nm, 그리고 그림 4와 같이 평균 제타-잠재력 약 7 mV. 펩 티 드를 대상으로 표면 개 질, 후 전반적인 직경에서 230 될 증가 한다 nm, 그리고 평균 zeta 잠재력-3.4 아래로 감소 mV15. 돌출 크기에서 모든 광범위 한 편차는 실패 한 돌출 (d입자 &gt;&gt; d입체 면...

우리는 효과적인 생체 외에서 그리고 vivo에서 oligonucleotide 배달 fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 합성을 보여 줍니다. 다공성 실리콘 나노 껍질을 형성 하기 위하여 압출을 통해 fusogenic 지질에 의해 코팅은 핵심을 형성 하는 siRNA와 함께 로드 됩니다. 타겟팅 moiety 기능화 및 입자 특성화 포함 되어 있습니다.

합성과 기능화, Oligonucleotide 배달에 대 한 Fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 특성

With the advent of gene therapy, the development of an effective in vivo nucleotide-payload delivery system has become of parallel import. Fusogenic ...

이 프로토콜은 고효율siRNA를 전달하여 생체 내에서 유전자를 침묵할 수 있는 나노 입자 시스템의 합성을 설명합니다. 단순히 표적 펩티드와 siRNA 페이로드를 교환함으로써, fusogenic 나노 입자는 생체 내 유전자 변조를 요구하는 질병에 대한 잠재적 인 치료 제제로 사용될 수있다. 우리는 이전에 만성 염증을 종료하기 위해 대식세포에서 염증을 인코딩하는 유전자를 침묵시킴으로써 그람 양성 세균 감염에 대한 후생 나노 플랫폼을 사용하여 결과를 발표했습니다.이 절차를 수행하기 전에 실리콘 웨이퍼를 포함하는 Teflon 에칭 세포를 3 대 1 하이드로 플루오릭 산 용액에 조립하십시오. 0.6초 동안 곱타임당 50밀리미터의 낮은 전류 밀도와 500사이클 동안 반복되는 0.36초 동안 센티미터당 400밀리암퍼의 높은 전류 밀도로 사각 파형의 번갈아 전류를 실행합니다. 에칭이 완료되면 회로에서 세포를 제거하고 주사기를 사용하여 수력 불소성 용액을 조심스럽게 헹구습니다.그런 다음 에탄올로 세 번 헹구습니다. 실리콘 웨이퍼에서 다공성 층을 들어 올리기 위해 먼저 1-29 개의 수력 불소산 용액의 10 밀리리터로 에칭 세포의 우물을 채웁니다. 그런 다음 250초 동안 3.7밀리미터의 일정한 분과곱을 실행합니다.에칭이 끝나면 회로에서 셀을 제거합니다. 다공성 실리콘 층은 결정성 실리콘 웨이퍼로부터 분리를 나타내는 눈에 보이는 잔물결을 가질 수 있다. 수력 불소성 용액을 부드럽게 씻어 내고 에탄올과 물로 각각 3 배 헹구십시오.파이펫 팁을 사용하여 다공성 실리콘 층의 둘레를 단단히 부수고 완전한 분리를 합니다. 에탄올을 사용하여 테플론 에칭 셀에서 계량 보트로 다공성 실리콘 조각 또는 칩을 수집합니다. 그런 다음, 저장을 위해 유리 유리 바이알에 칩을 전송합니다.다음으로 다공성 실리콘 칩을 함유한 유리 바이알의 에탄올을 RNase 가 없는 물의 2밀리리터로 교체한다. 파라필름을 사용하여 유리병을 단단히 캡하고 밀봉하십시오. 유리 유리알을 초음파 식기 욕조에 넣고 다공성 실리콘 칩의 부피가 수조 표면 아래에 완전히 침수될 정도로 중단됩니다.초음파 처리 중 상당한 물 손실을 방지하기 위해 플라스크의 개구부가 수조의 표면에 닿도록 물로 채워진 볼륨 플라스크를 놓습니다. 그런 다음 48와트의 RF 전력으로 35 킬로헤르츠에서 다공성 실리콘 칩을 12 시간 동안 초음파 처리합니다. 초음파 처리 후 유리 유리 바이알을 평평한 표면에 1 시간 동안 배치하여 큰 입자가 바닥에 정착 할 수 있도록합니다.그런 다음 파이펫을 사용하여 상체를 수집합니다. 유리 바이알에 DMPC 용액 72.55 마이크로리터, DSPE-PEG 용액 15.16 마이크로리터, DOTAP 용액 19.63 마이크로리터를 추가하고 파이펫팅으로 혼합합니다. 용매가 하룻밤 동안 증발 할 수 있도록 느슨한 캡연기 후드에 유리병을 배치합니다.말린 필름은 유리병 의 바닥에 흐린, 하드, 젤 같은 물질이 될 것입니다. 다음으로, 이전에 준비된 아이스 초음파 처리 욕조에 150 마이크로리터의 다공성 실리콘 나노 입자를 포함하는 마이크로 센심 분리기 튜브를 배치합니다. 15분 간의 초음파 처리 하에, 시RNA 150 마이크로리터와 염화물 2개의 미디온 700마이크로리터를 다공성 실리콘 나노입자에 부드럽게 피펫합니다.초음파 처리기에서 siRNA로드 칼슘 코팅 다공 성 실리콘 나노 입자의 1 밀리리터를 포함하는 튜브를 제거합니다. 넓은 비커를 탈온화된 물로 채웁니다. 폴리카보네이트 멤브레인과 4개의 필터를 수면에 띄워 보세요.그런 다음 제조업체의 지시에 따라 리포솜 압출 키트를 조립합니다. 다음으로, siRNA 로딩된 칼슘 코팅 다공성 실리콘 나노입자의 1밀리리터로 유리 유리병에 말린 지질 필름을 수화한다. 모든 지질이 바이알 의 바닥에서 들어 올릴 때까지 파이펫과 흐린, 균일 한 용액이 관찰될 때까지.유리 유리 바이알에 마그네틱 교반 바를 추가하고 유리 판에 유리병을 놓고 입자를 섭씨 40도까지 가열하고 용액을 자기적으로 20 분 동안 교반합니다. 이에 따라 압출기의 한쪽에 빈 주사기를 부착합니다. 그런 다음, 지질 코팅 다공성 실리콘 나노 입자 용액의 1 밀리리터로 다른 주사기를 채우고, 압출기의 반대편에 주사기를 부착한다.피스톤을 천천히 밀어 내고, 한 주사기에서, 폴리카보네이트 멤브레인을 통과하고, 다른 주사기로 입자를 밀어 넣음으로써 압출을 시작합니다. 20번 반복합니다. 그런 다음 압출된 입자를 미세 원심 분리튜브로 수집합니다.RNase 가 없는 물에 밀리리터 당 1 밀리그램 펩티드 농도로 펩티드 스톡을 준비합니다. 후생 지질 코팅 다공성 실리콘 나노 입자를 포함하는 마이크로 원심 분리기 튜브에서 펩티드 스톡의 마이크로리터 100 마이크로리터와 파이펫을 부드럽게 추가합니다. 튜브를 실온에서 20분 동안 정전기상태로 유지합니다.과도한 펩타이드 또는 siRNA 및 기타 부형제를 제거하려면 실온에서 1시간 동안 5, 000회 g에서 회전하여 30킬로달톤 원심 필터로 세척하십시오. 원심 분리기는 동일한 설정에서 PBS의 1 밀리리터로 두 번 더. 원심분리에 따라, 최종 펩타이드-컨쥬게이드 후공지질 코팅 다공성 실리콘 나노입자를 원하는 농도로 PBS에서 재연한다.입자는 적어도 30 일 동안 영하 80도에서 알리인용및 저장될 수 있습니다. fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 성공적인 합성은 구조적 변화를 일으키지 않고 30 일 동안 저장되고 해동 될 수있는 균일하고 약간 불투명한 용액을 생성해야합니다. 비율 및 농도를 최적화하지 못하면 반복되는 동결 해동 주기뿐만 아니라 적재 시 집계될 수 있습니다.입자가 압출됨에 따라 동적 광 산란에 의해 측정된 fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 평균 유체 역학 직경은 약 200 나노미터여야 하며 평균 제타 전위는 약 7 밀리볼트가 되어야 한다. 표적화 펩티드를 사용하여 표면 변형 후 전체 직경은 230 나노미터 미만이어야하며 평균 제타 전위가 마이너스 3.4 밀리볼트로 감소합니다. 융합은 심포성 플루오로포레 DiI와 후생지질을 표시하고 공초점 현미경을 사용하여 체외 국소화를 관찰함으로써 확인될 수 있다.성공적인 융합은 후생성 다공성 실리콘 나노입자의 지질이 DiI를 플라즈마 멤브레인으로 옮기고 리소좀과 독립적으로 국한화될 때 관찰된다. 실패한 융합은 세포의 세포질 내의 DiI 국소화및 리소좀과의 공동 국소화를 보여줄 것이다. 이 fusogenic 나노 입자 시스템은 지금 세균성 감염 뿐 아니라 암 보조 치료 및 암 면역 요법에서 치료 응용을 위해 사용되고 있습니다.이 프로토콜은 siRNA 보다 더 많은 로드에 더욱 최적화될 수 있습니다. fusogenic 나노 입자 시스템은 mRNAs 및 CRISPR/Cas9 복합체와 같은 더 큰 성전환 페이로드를 적재하고 전달할 수 있는 잠재력을 보여주었습니다.

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광 반응성 고분자 나노 캐리어로부터의 siRNA 방출의 시공간 조절을 통한 유전자 침묵 예측

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기능성된 10 nm 폴리머-코팅 된 금 입자 피 대상에 대 한 및 약물 전달의 합성

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신경 성장 인자의 사업자로 서 다공성 실리콘 필름을 디자인

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사이토 솔 릭 siRNA 전달을 위한 중성 충전, pH 반응 형 고분자 나노 입자의 제조

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폴리전해질 복합 미셀의 조립 및 특성화

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RNA 압타머 및 리보스위치를 인코딩하는 DNA 플라스미드가 로딩된 다기능 실크 기반 마이크로캡슐의 제조

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Aqueous One-step Crosslinking 및 Co-nanopolymerization을 이용한 Stimuli-responsive Nanogel 합성

이 프로토콜은 산소 전달을 위해 설계된 계층적으로 다공성인 UiO-66 나노입자의 합성, 헤모글로빈 캡슐화, 표면 PEG질화를 상세히 설명합니다. 이 절차는 결함 공학과 변형 촉진 바이코치옹 커지먼트를 결합하여 생의학 응용에 적합한 투과율이 높고 생리학적으로 안정적인 운반체를 생성합니다.

산소 전달 응용을 위한 계층적 다공성 UiO-66 나노입자에서의 합성, 헤모글로빈 캡슐화 및 이교수 PEGylation

배우세요 융합성 다공성 실리콘 나노입자를 합성하고 기능화하여 oligonucleotide를 효율적으로 전달하는 방법. 이 기술은 siRNA 기반 유전자 침묵 및 염증 조절 치료에 활용됩니다.

합성과 기능화, Oligonucleotide 배달에 대 한 Fusogenic 다공성 실리콘 나노 입자의 특성

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