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Caenorhabditis elegans의 장기 성장 및 이미징을위한 간단한 미세 유체 칩
Caenorhabditis elegans의 장기 성장 및 이미징을위한 간단한 미세 유체 칩
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
A Simple Microfluidic Chip for Long-Term Growth and Imaging of Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans의 장기 성장 및 이미징을위한 간단한 미세 유체 칩

Full Text
2,574 Views
10:45 min
April 11, 2022

DOI: 10.3791/63136-v

Jyoti Dubey1,2,3,4, Sudip Mondal1,5, Sandhya P. Koushika2

1National Centre for Biological Sciences,TIFR, 2Department of Biological Sciences,TIFR, 3InSTEM, 4Manipal Academy of Higher Education, 5Department of Mechanical Engineering,The University of Texas at Austin

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a microfluidic chip design and fabrication method for growing C. elegans with a continuous food supply for up to 36 hours. It also facilitates long-term high-resolution imaging of cellular processes during development.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Microfluidics
  • Developmental Biology

Background

  • The technique allows for the free growth of C. elegans within the device.
  • High-resolution imaging can be performed while the animal is trapped.
  • The device can be reused multiple times.
  • Cleanliness is crucial during fabrication to prevent leakage.

Purpose of Study

  • To develop a microfluidic device for studying C. elegans.
  • To enable continuous food supply and imaging over extended periods.
  • To facilitate the observation of cellular and sub-cellular processes.

Methods Used

  • Designing flow and control layers using rectangular shapes in software.
  • Printing photo masks with a laser plotter.
  • Cutting silicon wafers into 2.5 cm squares.
  • Cleaning wafers with potassium hydroxide and rinsing with deionized water.

Main Results

  • The device successfully supports the growth of C. elegans.
  • High-resolution imaging is achieved during development.
  • The methodology allows for repeated use of the device.
  • Maintaining cleanliness is essential for device functionality.

Conclusions

  • This microfluidic chip design is effective for studying C. elegans.
  • It provides a continuous food supply and enables long-term imaging.
  • The approach can be adapted for various developmental studies.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of the microfluidic device?
The main advantage is that C. elegans can grow freely while being trapped for high-resolution imaging.
How long can C. elegans be grown in the device?
C. elegans can be grown for up to 36 hours with a continuous food supply.
What is the importance of cleanliness during fabrication?
Cleanliness is crucial to avoid dust and leakage during device operations.
Can the device be reused?
Yes, the device can be reused several times for experiments.
What materials are used in the fabrication of the device?
Silicon wafers and polyester-based films are used in the fabrication process.
What imaging capabilities does the device provide?
The device enables intermittent long-term high-resolution imaging of cellular processes.

이 프로토콜은 최대 36 시간 동안 지속적인 식품 공급이있는 상태에서 C. elegans를 성장시키는 데 사용되는 간단한 미세 유체 칩 설계 및 미세 가공 방법론을 설명합니다. 성장 및 이미징 장치는 또한 며칠 동안 개발 중에 세포 및 하위 세포 프로세스의 간헐적 인 장기 고해상도 이미징을 가능하게합니다.

이 기술의 가장 큰 장점은 동물이 장치 내부에서 자유롭게 자랄 수 있고 고해상도 이미징을 위해 갇힐 수 있다는 것입니다. 이 장치는 여러 번 재사용 할 수 있습니다. 장치를 만드는 동안 청결은 장치 작동 중 누출을 방지하기 위해 먼지가없는 장치를 제작할 수있는 가장 중요한 요소입니다.

워드 프로세싱 소프트웨어에서 직사각형 모양을 사용하여 흐름 레이어에 대한 패턴 1과 제어 레이어에 대한 패턴 2를 디자인하고 폴리 에스테르 기반 필름에 최소 피처 크기가 8 마이크로 미터 인 레이저 플로터를 사용하여 포토 마스크를 인쇄합니다. 실리콘 웨이퍼를 높이와 너비가 2.5cm 인 정사각형 조각으로 자릅니다. 20 % 수산화 칼륨으로 1 분 동안 세척하고 탈 이온수로 웨이퍼를 헹굽니다.

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