2023년 9월 8일
이 논문은 편광에 민감한 이광자 현미경을 적용하여 표지가 없는 아밀로이드 상부구조-구형석 내의 국소 조직을 특성화하는 방법을 설명합니다. 또한 샘플을 준비 및 측정하고, 필요한 설정을 조립하고, 데이터를 분석하여 아밀로이드 섬유의 국소 조직에 대한 정보를 얻는 방법을 설명합니다.
우리의 목표는 아밀로이드라고 하는 단백질 응집체의 검출을 위한 새로운 광학 마커와 기술을 개발하는 것입니다. 그들은 알츠하이머병 및 제2형 당뇨병과 같은 다양한 질병에 관여합니다. 따라서 이러한 질병을 치료하기 위해서는 아밀로이드를 시각화하는 기술이 필요합니다.
우리는 이광자 현미경을 사용하여 아밀로이드 상부 구조 내부의 아밀로이드 피브릴 방향을 검출할 수 있음을 입증했습니다. 아밀로이드 특이적 염료를 사용할 뿐만 아니라 아밀로이드의 자가형광을 이용해서도 달성할 수 있습니다. 우리의 기술은 비선형 광학 현상에서 작동하기 때문에 단광자 형광 현미경 기술과 비교할 때 각도 광선택을 줄이고 축 분해능을 향상시키며 광 산란을 낮추고 광독성을 낮추고 더 깊은 샘플 침투를 달성할 수 있습니다.
편광에 민감한 이광자 형광 현미경은 단백질 응집체뿐만 아니라 DNA 소포 및 지질막과 같은 다양한 복잡한 생물학적 구조의 내부 구조를 이미지화하는 데 유망한 도구입니다.
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본 연구에서는 편광 민감성 이광자 현미경을 적용하여 스페룰라이트(spherulites)로 알려진 무표지 아밀로이드 초구조의 국소적 조직화를 특성 분석하는 방법을 탐구합니다. 본 연구는 아밀로이드 피브릴을 조사하는 데 필요한 시료 준비, 측정 및 데이터 분석 과정을 중점적으로 다룹니다.
편광 민감성 이광자 현미경(ps-2PFM)은 신경퇴행성 질환 연구의 핵심 과제인 아밀로이드 응집체의 무표지, 고해상도 구조 특성 분석을 가능하게 합니다. 이 방법은 구정(spherulites) 내의 3차원 섬유 조직을 분석함으로써 초기 발견 및 타겟 검증 워크플로우에서 예측 신뢰도를 높입니다. 복잡한 생물학적 시스템 내의 분자 배열을 조사하는 이러한 능력은 바이오 제약 R&D의 리스크 조정 포트폴리오 의사결정을 지원합니다.
ps-2PFM은 단백질 응집에 대한 가설 기반 조사를 가능하게 함으로써, 초기 발견 단계와 중개 연구 모두를 지원하며 발견에서 전임상 단계로 이어지는 연속 과정에 통합됩니다.