JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:26 min. • July 8th, 2025
Zabezpiecz znieczuloną mysz w pozycji leżącej.
Podskórnie wprowadzić elektrody stymulujące, wyrównując je z nerwem unerwiającym mięsień kończyny przedniej.
Podskórnie włóż elektrodę rejestrującą na górze mięśnia ramienia, elektrodę odniesienia do podkładek do chodzenia, a elektrodę masową z boku.
Zastosuj impulsy elektryczne do stymulacji neuronów kończyn przednich, indukując napływ jonów dodatnich i generowanie potencjału czynnościowego.
Potencjał czynnościowy indukuje pobudzające uwalnianie neuroprzekaźnika w połączeniu nerwowo-mięśniowym, co prowadzi do aktywacji i skurczu włókien mięśniowych.
Rejestruj połączoną odpowiedź wszystkich włókien mięśniowych — złożony potencjał czynnościowy mięśni lub CMAP.
Stosuj maksymalne bodźce, aby zapewnić stymulację wszystkich włókien mięśniowych.
Zakończ stymulację i określ opóźnienie, opóźnienie czasowe między inicjacją bodźca a reakcją.
Zwiększone opóźnienie wskazuje na zmniejszoną prędkość przewodzenia z powodu demielinizacji neuronów.
Zmierz amplitudę CMAP; zmniejszona wielkość wskazuje na utratę funkcjonalnych neuronów.
Aby zmierzyć CMAP na kończynach przednich, ustaw mysz na poduszce grzewczej w pozycji leżącej na plecach i użyj taśmy klejącej, aby przedłużyć obie kończyny przednie po bokach ciała. Następnie umieść 5 milimetrów elektrody stymulacyjnej podskórnie, nie nakłuwając leżących poniżej mięśni po obu stronach kończyny przedniej, aby wyrównać się z nerwem splotu ramiennego.
Następnie umieść elektrodę rejestrującą podskórnie nad mięśniem dwugłowym ramienia. Następnie umieść 3 milimetry elektrody referencyjnej pod kątem 30 stopni na podkładkach do chodzenia i włóż elektrodę masową podskórnie z boku myszy.
W tej konfiguracji elektrody znajdują się w bliskiej odległości od siebie. Nie dopuszczaj do tego, aby elektrody stykały się ze sobą, ponieważ zniekształca to nagranie.
Stymuluj wszystkie aksony za pomocą jednego impulsu na sekundę z czasem trwania bodźca wynoszącym 0,1 milisekundy. Aby uzyskać dane, rozpocznij stymulację, naciskając przycisk powtarzającego się bodźca w jednostce sterującej i obróć pokrętło regulatora intensywności, aby zwiększyć bodziec.
Aby osiągnąć bodźce supramaksymalne, należy stosować bodźce zwiększające, obracając pokrętło regulatora intensywności, aż amplituda odpowiedzi CMAP przestanie rosnąć. Stamtąd należy zwiększyć bodziec o 20%, aby upewnić się, że amplituda CMAP osiągnęła maksymalną odpowiedź. Zakończ stymulację, ponownie naciskając przycisk powtarzającego się bodźca.
Użyj narzędzia znacznika, aby wskazać następujące punkty w nagraniu: inicjacja odpowiedzi, maksymalny dodatni szczyt i maksymalny ujemny szczyt. Inicjacja bodźca jest określana automatycznie przez oprogramowanie.
Określ opóźnienie jako opóźnienie od zainicjowania bodźca do zainicjowania odpowiedzi. Użyj opóźnienia, aby ocenić demielinizację w aksonach. Zmierz amplitudę od maksymalnej wartości ujemnej do maksymalnej wartości szczytowej dodatniej i użyj wielkości amplitudy do skorelowania liczby aksonów funkcjonalnych.