Kwantyfikacja obfitości lipidów i ocena rozmieszczenia lipidów w Caenorhabditis elegans za pomocą barwienia czerwienią nilową i czerwienią olejową O

Ogólnym celem tych metod barwienia jest ilościowe określenie obfitości lipidów wewnątrzkomórkowych i ocena dystrybucji lipidów w różnych tkankach. Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania dotyczące metabolizmu lipidów, takie jak to, w jaki sposób lipidy są regulowane genetycznie i biochemicznie oraz które stany chorobowe regulują homeostazę lipidów. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest stosunkowo prosta i niedroga do wykonania.

Aby przeprowadzić barwienie lipidów czerwienią nilową, robaki płytkowe na pożywce do wzrostu nicieni lub NGM wysiane późną logarytmią OP50 E.coli i hodują robaki w temperaturze 20 stopni Celsjusza do wczesnego stadium L4. Umyj robaki jednym milimetrem roztworu PBST i przenieś zawiesinę ślimaka do 1,5 mililitrowej probówki do mikrofuge. Odwiruj robaki pod 560-krotnością grawitacji przez jedną minutę.